细菌DNA的提取方法有哪些？

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  上海依肯机械设备有限公司 2019-08-14 16:39:51

  <p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 0px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">答：一、水煮模板法——主要用于PCR反应</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">操作Z简便，对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高，可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">二、CTAB/NaCl 法</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高，蛋白杂质较少，保存时间长，编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候，这样Z后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些，得到的DNA可用于Southern blot。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">注意：长时间保存DNA可放于-20℃，但要尽量减少反复冻融，否则影响DNA质量。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">三、盐析法</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">介于方法一和方法二之间，CTAB虽然取出糖分效果较好，但CTAB本身也是有毒的，所以此方法放弃了CTAB。</p><p style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;margin-top: 17px; margin-bottom: 17px; padding: 0px; color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_38">实验注意：提基因组Z好要将枪头尖剪掉（剪掉以后在酒精灯上迅速过一下，使其断口圆滑）。以免枪头损伤基因组，抽干时Z好是风干。</p>

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