醋酸和醋酸根离子一起测定可以用离子色谱吗

实验背景

醋酸甲地孕酮与醋酸甲羟孕酮均为人工合成的孕激素,在畜牧业中, 曾被用作动物生长促进剂。但这类药物成分会残留在动物组织中，长期或大量食用含有醋酸甲羟孕酮和醋酸甲地孕酮的食品, 会使人出现内分泌紊乱等一系列症状。

安谱实验根据2019年新国标GB31660.4-2019 《动物性食品中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，在牛奶基质中使用CNW Poly-Sery MCX小柱进行了实验，发现此方法操作简单，回收率高于85%，重现性好。

接下来，小编带大家走进安谱实验室

一起来学习具体检测方案吧~

一、样品前处理牛奶基质：酶解

取试样2g，于50 mL离心管中，加内标外标工作液（样品基质空白加40ul 100ppb内标，样品基质加标加入40ul 100ppb内标+40ul 100ppb混合外标，使Z终检测浓度为20ppb）加0.2mol/L乙酸铵缓冲液4 mL，涡旋混匀后加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶（货号CFEQ-4-150001-0002）40μL，于37℃下避光水浴低速振荡，酶解16h。

样品提取

试样经酶解后，加乙酸乙酯10 mL，于旋涡振荡器上剧烈振荡10 min， 4000 r/min离心5 min，取上清液至梨形瓶中。残渣加乙酸乙酯10 mL重复提取1次，合并上清液，50℃旋转蒸发至干。加乙腈10 mL、正己烷5ml使溶解，转至50ml离心管中，低速涡旋10s，3000 r/min离心2 min，弃正己烷层，下层液于50℃旋转蒸发至干，加30%甲醇水溶液3 mL，溶解，备用待上样。

二、小柱操作

SBEQ-CA3279  CNW Poly-Sery MCX 混合型强阳离子交换 SPE 小柱 60mg， 3mL/50pcs活化：3mL甲醇平衡：3mL水上样：待测液淋洗：3mL水，3mL50%甲醇水，淋洗后抽干洗脱：5mL甲醇浓缩：氮吹吹干，用0.2 mL乙腈（80%）-0.1%甲酸溶液溶解残余物，涡旋混匀，过0.22 μm滤膜，供GX液相色谱-串联质谱仪测定。

三、LCMS/MS测定条件液相条件色谱柱：Athena C18（2.1*50mm，1.8um）柱温：30℃进样量：10ul流动相：

质谱参数离子源： ESI扫描方式：正离子模式检测方式：MRM电离电压：4000V离子源温度：100℃雾化温度：330℃

定性定量离子醋酸甲地孕酮：385/267（定性定量）385/325（定性）甲羟孕酮乙酸酯（醋酸甲羟孕酮）：387/285（定性）387/327（定性定量）甲地孕酮乙酸酯-D3：388/270（定性定量）

四、实验谱图1. 标品谱图（20ppb）

2. 牛奶基质空白谱图

3. 牛奶基质加标20ppb

五、实验数据

注：本次实验牛奶基质空白中未检测到醋酸甲地孕酮，醋酸甲羟孕酮的含量为0.095ug/kg 。

六、实验耗材 本次实验所用耗材如下，供大家参考：