荧光显微镜的成像系统怎样合成荧光照片

FluorCam-Pro植物多光谱荧光成像系统是FluorCam叶绿素荧光成像技术的最 新高级扩展产品。此系统既可用于PAM脉冲调制式叶绿素荧光动态成像分析，又可用于UV紫外光对植物叶片激发产生的多光谱荧光成像测量分析，还可选配滤波器组对GFP、RFP、YFP、SYBR Green等荧光蛋白和荧光染料进行稳态荧光成像测量。测量对象包括叶片、果实、花朵、整株拟南芥或其他小型植株、苔藓、微藻、大型藻类乃至特定的动物样品。

应用领域：

• 植物光合生理生态

• 植物逆境胁迫生理与易感性

• 植物初级代谢与次级代谢

• 植物表型组学成像分析（Phenotyping）

• 作物遗传育种与抗性筛选

• 种子萌发与活力监测

• 转基因植株筛选

功能特点：

• 多激发光-多光谱荧光成像技术：通过两种以上不同波长的光源激发植物样品中不同的发色团发出荧光并进行成像检测，即为多激发光多光谱荧光成像技术。植物的多光谱荧光主要包括叶绿素荧光、UV紫外光激发多光谱荧光和荧光蛋白荧光

• FluorCam-Pro无需更换任何配件即可同步实现多激发光-多光谱荧光成像功能：

• PAM脉冲调制式叶绿素荧光成像

• 紫外激发F440、F520、F690、F740多光谱荧光成像

• GFP、RFP、YFP等常用荧光蛋白成像

• 可根据用户需要定制荧光蛋白或荧光染料成像，如BFP、CFP、SYBR Green、DAPI等

• 可对黄酮、花青素含量进行定量测量

• 可进行自动重复成像测量和无人值守监测，可设置实验程序（Protocols）自动循环成像测量，成像测量数据自动按时间日期存入计算机（带时间戳）

• 测量样品为各种活体植物样品，包括叶片、花卉、果实、整株拟南芥或其他小型植物、微藻（包括液滴、多孔板、固体培养基）及大型藻类等

技术指标：

• 一体式设计，自带暗适应箱体

• 最 佳成像面积：20×20cm

• 测量参数：Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多个叶绿素荧光参数；紫外激发多光谱荧光成像参数：F440、F520、F690、F740；荧光蛋白荧光强度参数Ft；每项参数均可显示对应二维荧光彩色图像。并可测量计算黄酮醇指数Flavonol Index,、花青素指数Anthocyanin Index。

• 具备完备的自动测量程序（protocol），可自由对自动测量程序进行编辑

1)Fv/Fm：测量参数包括Fo，Fm，Fv，QY等叶绿素荧光参数

2)Kautsky诱导效应：Fo，Fp，Fv，Ft_Lss，QY，Rfd等叶绿素荧光参数

3)Quenching荧光淬灭分析：Fo，Fm，Fp，Fs，Fv，QY，ΦII，NPQ，Qp，Rfd，qL等50多个叶绿素荧光参数

4)Light Curve光响应曲线：不同光强梯度条件下Fo，Fm，QY，QY_Ln，ETR等叶绿素荧光参数

5)MultiColor紫外激发多光谱荧光成像（选配）

6)FPs荧光蛋白成像：GFP、YFP、RFP、BFP等（选配）

• 荧光激发光源组：全LED光源，包括620nm红光、5700K冷白光、735nm远红光、365nm紫外光，445nm品蓝光，470nm蓝光，505nm青光，530nm绿光，590nm琥珀色光等

• 高分辨率CCD相机

1)图像分辨率：1360×1024像素2)时间分辨率：在最 高图像分辨率下可达每秒20帧

• 具备7位滤波轮，标配叶绿素荧光滤波器，根据用户需要可定制紫外激发多光谱荧光和GFP、RFP、YFP、BFP等荧光蛋白专用滤波器

• FluorCam叶绿素荧光成像分析软件功能：具Live（实况测试）、Protocols（实验程序选择定制）、Pre–processing（成像预处理）、Result（成像分析结果）等功能菜单

• 自动测量分析功能：可设置一个实验程序（Protocol）自动无人值守循环成像测量，重复次数及间隔时间客户自定义，成像测量数据自动按时间日期存入计算机（带时间戳）

• 成像预处理：程序软件可自动识别多个植物样品或多个区域，也可手动选择区域（Region of interest，ROI）。手动选区的形状可以是方形、圆形、任意多边形或扇形。软件可自动测量分析每个样品和选定区域的荧光动力学曲线及相应参数，样品或区域数量不受限制（>1000）

• 输出结果：高时间解析度荧光动态图、荧光动态变化视频、荧光参数Excel文件、直方图、不同参数成像图、不同ROI的荧光参数列表等

应用案例：

1.抗病毒基因研究：叶绿素荧光成像与GFP成像联合分析

法国国家农业科学研究院一直致力于马铃薯y病毒组的抗病基因研究，通过不同基因编辑处理方法，验证抗病毒分子机制。相关研究中，研究人员利用FluorCam多光谱荧光成像系统的GFP荧光蛋白成像功能，定量分析感染面积与病毒积累量，从而直观地反映了不同基因功能对拟南芥病毒抗性的影响。同时，叶绿素荧光成像则反映病毒对光合系统的损伤，同步提供植物的光合表型信息。

参考文献：

• Zafirov D, et al. 2021. When a knockout is an Achilles' heel: Resistance to one potyvirus species triggers hypersusceptibility to another one in Arabidopsis thaliana. Mol Plant Pathol. 22: 334–347

• Bastet A, et al. 2019. Mimicking natural polymorphism in eIF4E by CRISPR‐Cas9 base editing is associated with resistance to potyviruses. Plant Biotechnology Journal 17: 1736–1750

• Bastet A, et al. 2018. Trans-species synthetic gene design allows resistance pyramiding and broad-spectrum engineering of virus resistance in plants. Plant Biotechnology Journal: 1–13

2.不同颜色凌霄叶片的叶绿素荧光与紫外激发多光谱荧光成像分析（易科泰EcoTech®实验室）

产地：欧洲

荧光显微镜怎么调荧光：专业指南

荧光显微镜作为现代生物学、医学研究和材料科学中不可或缺的工具，广泛应用于观察细胞结构、分子定位以及各类荧光标记物的追踪。如何调节荧光显微镜中的荧光信号，以获得清晰且高对比度的图像，常常是初学者和有经验的使用者都会遇到的挑战。本文将详细介绍荧光显微镜的荧光调节方法，包括如何选择合适的滤光片、设置激发光源、优化荧光强度等方面，帮助用户提升实验效果和图像质量。

荧光显微镜的基本构成

在调节荧光显微镜的荧光效果之前，了解其基本构成至关重要。荧光显微镜主要由光源、滤光片系统、样品载物台、反射镜和相机等部分组成。光源提供激发光，而滤光片系统则用来过滤特定波长的光线，使得激发光照射到样品上，进而激发样品发出荧光。为了优化荧光图像的质量，正确调节每一个组成部分都是必要的。

选择合适的激发光源

激发光源是荧光显微镜的核心之一，合适的激发波长能够大化样品的荧光信号。常见的激发光源包括氙灯、汞灯和LED灯等。选择激发源时，首先要根据荧光染料的激发波长范围来选定。不同的荧光染料对不同波长的激发光有佳响应，因此确保激发源的波长与样品的激发要求相匹配，是调节荧光显微镜的步。

设置合适的滤光片系统

滤光片系统在荧光显微镜中起着至关重要的作用。滤光片通常分为激发滤光片、放射滤光片和透射滤光片，分别用于选择性地控制激发光的通过、分离样品发出的荧光以及去除杂散光。在选择滤光片时，应根据染料的吸收和发射波长来确定合适的激发和发射滤光片。例如，对于绿色荧光蛋白(GFP)，选择与其激发波长(488 nm)和发射波长(510 nm)相匹配的滤光片是十分必要的。

优化荧光强度

在调整荧光显微镜时，荧光强度是影响图像质量的另一个关键因素。过低的荧光强度会导致图像对比度不清晰，而过高的强度则可能导致信号饱和。通过调整激发光源的强度、曝光时间以及光学增益，可以获得合适的荧光强度。样品的浓度、染料的质量以及荧光标记物的稳定性也会对荧光强度产生影响，因此在实验过程中应时刻注意这些变量。

调整焦距和图像对比度

调整焦距是确保荧光图像清晰的必要步骤。使用荧光显微镜时，焦距的精确调整能帮助获得清晰的图像。适当的图像对比度调整有助于突出荧光信号，减少背景噪音。通过微调曝光时间和亮度，也可以增强对比度，使得样品的荧光信号更加鲜明。

总结

调节荧光显微镜的荧光效果是一个精细且复杂的过程，涉及到多个因素的协调。选择合适的激发光源、滤光片系统的优化、荧光强度的调整以及图像的焦距与对比度设置，都是确保高质量荧光图像的重要步骤。通过深入理解并熟练掌握这些调节技巧，可以显著提升实验的效果和图像的清晰度。希望本文能为使用荧光显微镜的科研人员提供有价值的指导，帮助大家在荧光成像中获得佳的实验结果。

      基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术，是取被检测者外周静脉血或其他组织细胞，扩增其基因信息后，通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测，分析它所含有的基因类型和基因缺陷及其表达功能是否正常的一种方法，从而使人们能了解自己的基因信息，明确病因或预知身体患某种疾病的风险。

      基因检测可以诊断疾病，也可以用于疾病风险的预测。疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因。目前应用Z广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。

      深圳市乐土jing准YL公司已有一台奥林巴斯倒置显微镜CKX53，现需要荧光产品来观察细胞，我们工程师在了解到客户需求后，通过多次沟通测试看效果Z终选用我司的倒置荧光附件MI-BGU-LED、显微镜摄像头MS23和0.63XC相机接口，当时客户手上没有荧光样品，用的我司荧光切片，反馈效果不错，拍相差活细胞效果也可以。我司在深圳有办事处，客户有疑问我们有专业的工程师解答或者上门维护。

（来源：广州市明美光电技术有限公司）

荧光微球形状为球形，直径在几纳米至几十微米之间，微球表面或内部负载有荧光物质，在受到一定的能量激发时能够发出荧光的微粒。与纯荧光化合物相比，荧光微球具有相对稳定的发光行为和形态结构。荧光微球作为一种特殊的功能微球，由于在单个微球中富集了能够发射荧光的有机或无机物质，除具有无机物和有机物的性能外，同时在外界能量刺激下还能发射荧光，因此在众多领域都具有广泛的应用，如生物化学、生物医药、临床医学、基因分析以及光学仪器等，其中荧光微球在医药、生物方面的应用尤为重要。

近期有位客户需要一台倒置荧光显微镜用于荧光微球研究，明美销售经理推荐倒置荧光显微镜MF52-N搭配显微镜相机MS23。

采用倒置荧光显微镜MF52-N搭配显微镜相机MS23拍摄荧光微球

倒置荧光显微镜MF52-N,由LED落射荧光显微系统与倒置生物显微系统组成，采用优良的无限远光学系统，配置长工作距离平场物镜与大视野目镜。物镜成像清晰无场曲光晕，衬度较高。整理清晰度好，获得用户的认可。

如果您对荧光微球显微镜感兴趣或有疑问，欢迎与我们联系，期待与您相约！

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