叶绿素提取实验

　　叶绿素研磨仪适用于对水质叶绿素a的测定分光光度法的实验应用，同时也是环境监测站、水文水资源等对水质监测检测的常备实验设备；主要是用于对浮游植物叶绿素a的检测提取。

　　叶绿素a本身对环境无害，但它是估计浮游植物生物量的重要指标，通过对其浮游植物叶绿素a含量的检测，可掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平；因此在环境监测中，叶绿素a的含量也是评价水体富营养化的指标之一。

　　叶绿素研磨仪可适用于对生物样品的快速裂解组织匀浆，提取核酸RNA/DNA和蛋白质，酵母/细胞的裂解，药物活性成分APIs提取，食品残留农药或有毒物质样品的处理，PCR(聚合酶链反应)快速研磨制备等等。

　　把样品组织和磨球同时放入球磨罐中，利用研磨设备系统开启的高频摆动作用，磨球可在高速运转中与样品组织碰撞和摩擦，导致样品组织被研磨、破碎、混合可在几秒到几分钟内轻松实现对样品的实验前处理操作。

　　常用来检测测定叶绿素的方法便是分光光度法，应用三色方程664nm、647nm、630nm、750nm的吸光计算叶绿素a.b.c叶绿素的含量；单色方程测定了脱镁叶绿素A校正后的含量。

　　叶绿素研磨仪研磨设备的高通量处理，大大提高了实验的工作效率，不但可用于对细胞破碎、细胞破裂，还可用于提取植物样品中核酸和蛋白质分析成分的应用。另外，对于热敏感生物样品的前处理还可选低温配件进行低温研磨。为确保样品研磨前处理的重现性、有效性和可比性，在对研磨设备进行参数设置时，需保证同一样品的研磨条件相同。

　　通常叶绿素研磨仪主要应用在对水质样品的叶绿素a提取。那该研磨设备的是怎样对叶绿体的色素提取分离的呢，其操作原理如何，对色素的分离提取又在于哪些呢？

　　叶绿素A研磨仪可在几分钟内完成对藻类细胞等样品的研磨和粉碎，应用丙酮溶液提取叶绿素a，可确保后续实验对于水质中叶绿素a浓度的准确测量不受影响。另外，该研磨设备三维一体的振荡研磨方式，可使样品的研磨变得更均匀、更细、重复性更好，且样品间无交叉污染，是真正的高通量研磨振荡系统。
　　
　　叶绿体色素分离的关键在于：叶片要新鲜、浓绿，研磨要快速、充分；在滤液收集后，要及时的应用棉塞塞住试管口，防止滤液的挥发。叶绿体中色素的提取关键在于：滤液的细线不仅要细、直，而且要含有多种色素的存在，且过滤纸上的滤液细线不能接触到层析液；避免接触，滤纸上叶绿体中的色素将会在层析液中被溶解，则表示此次实验失败。
　　
　　应用丙酮提取叶绿体色素的滤液，在光源面前看到的是绿色。因为色素滤液对着光源，眼睛可感知到色素液的透射光。背对光源时看到的是红色，也称之为荧光。
　　
　　应用叶绿素A研磨仪可适用于这些样品的应用分析。组织匀浆液的快速分解，核酸、RNA、DNA和蛋白质的提取纯化；样品PCR聚合酶链反应的快速制备；酵母、细菌细胞的裂解分解；提取yao用活性成分；在LC/MS/MS 测试食品残留农药或有毒物质样品处理，对农药/ 杀虫剂等物的分析。

前言

MIQE是描述评估qPCR实验所需的最小信息，该指南是稿件投稿时需要同时提交的一个清单。通过作者提供相关的实验条件和实验特点，审稿人可以评价实验所用方法的可靠性。另外提供详细的实验所用试剂、序列和分析方法，其他研究人员可以利用这些信息进行重复实验。

对于核酸提取MIQE有明确要求两点——实验组与对照组的定义及每一组的样本数量。

无论采用手工法还是试剂盒，只要符合MIQE的要求并实现良好的可操作性和重现性，就是合理客观的技术方法。MIQE在该部分操作中的要求又分为两大块——样本描述和核酸提取方法。

样本描述

▶  样本采集和处理的方法描述

▶ 样本的来源描述（宏观解剖还是激光显微切割）

▶  样本是如何即时处理（保存条件及时间）

▶  冷冻样本的冷冻方法和时间

核酸提取

采取的提取方法：

1）手工法：小批量经济型

2）自动化仪器：大批量高效型

按获取的物质可分为DNA和RNA：

◆ DNA：适合拷贝数变异、SNP分析等实验

◆ RNA：适合基因表达、长非编码RNA等实验

图源：网络，侵删

按提取方法分为化学法和机械破碎法：

◆ 化学法：适合采用碱裂解法的样本，质粒提取、菌类的提取

◆ 机械破碎法：比较坚硬有一定韧性的物质，动植物组织

更推荐使用合适的商品化的核酸提取试剂盒，流程标准化程度更高，质量更容易得到保证，这样在方法描述时可以更简单一些，直接引用试剂盒的生产厂家、货号和名称即可。

DNA酶或RNA酶的处理细节：

基因表达实验中，RNA模板如果存在DNA污染，会严重干扰最后的结果。因此提取RNA时要加入DNA酶将DNA消化掉，工作浓度、处理温度和时间要加以说明，同时也要加入RNase抑制剂提供保护。使用柱纯化试剂盒提取RNA时也可以在柱上进行DNA消化。同样的，提取DNA时也要将RNA消化掉，尽管残留RNA对DNA为模板的qPCR实验影响小得多。

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☑  数据可靠性：连续1000次实验后，结果高度一致。

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