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如何从血液中提取游离DNA

pengjie0713 2017-02-19 19:47:47 612  浏览
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  • 辰琉偲 2017-02-20 00:00:00
    高中生物里边用的方法 原理: 1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度Z低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 准备工作: 制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500 mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180 mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。 方法步骤: 1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。 5 min 2.溶解DNA: 3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢 4.过滤:取黏稠物 5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min 6.过滤:取滤液。 7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5 min 8.DNA的鉴定:沸水浴5min 要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

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