瘦素抵抗原理

本文由 上海易利生物科技有限公司 整理汇编

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• 瘦素抵抗原理

  瘦素抵抗原理造成瘦素抵抗，产生负性心肌肌力作用血浆中瘦素的水平通常与体重,尤其是身体内脂肪组织的变化呈正相关。临床上肥胖症患者多出现不同程度的血液瘦素水平上升。由于瘦素的正常生理功能主要是通过瘦素受体介导的,肥胖症中瘦素水平的上升直接造成了瘦素受体水平的反馈性下调或是受体后信号转导受阻,这就是瘦素抵抗（LeptinResistance）。　　瘦素抵抗的出现是直接由循环中瘦素水平上升而引起的。作一个非常恰当的比喻，瘦素抵抗在肥胖症中的地位类似于胰岛素抵抗在2型糖尿病中的角色。生理水平的瘦素可引起血管舒张，对心肌功能无明显影响,而病理水平的瘦素可促进大量氧化自由基的产生，进而产生明显的负性心肌肌力作用。有证据表明,病理水平的瘦素引起的负性心肌肌力作用可能是通过内皮素受体（ET-1Receptor）及其下游的还原型辅酶Ⅱ（NAPDH）氧化酶的激活来实现的。NAPDH氧化酶的激活直接产生大量超氧阴离子。这些结果在瘦素过剩的db/db小鼠模型中已获得证实。上海易利生物科技有限公司主营产品：ELISA试剂盒，生物试剂，标准品，抗体，培养基，血清，细胞等科研产品。[详细]

  2018-12-30 10:00

  产品样册

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• 大鼠瘦素（leptin）说明书

  大鼠瘦素（leptin）说明书[详细]

  2015-07-03 00:00

  应用文章

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• DRG瘦素ELISA试剂盒

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4DRG瘦素ELISA试剂盒（德国DRG:EIA-2395）1、说明DRG公司的瘦素酶免试剂盒可用于人血清和血浆中瘦素的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。2、实验原理DRG公司的瘦素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合瘦素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性瘦素的病人样本在包被孔中与特异性兔抗瘦素抗体进行孵育，之后就会形成一个夹心复合物。孵育后，用洗涤液洗去未结合的物质，再加入过氧化物酶标记的抗兔抗体以检测结合在包被板上的瘦素的量。加入底物溶液后，显出的颜色强度与病人样品中瘦素的浓度成正比。3、试剂盒成分1）包被板，12×8孔，可拆，微孔中包被了抗瘦素抗体（单克隆）2）标准品（0-5），6支冻干型0.5mL，浓度：0,2,5,25,50,100ng/ml，内含0.3%的Proclin防腐剂3）质控品，2支，200ul，即用，2个浓度（低与高），具体数值与范围请见试剂瓶标签或QC质控单。内含0.3%的Proclin防腐剂。4）实验缓冲液，1支，11ml，即用，内含0.3%的Proclin防腐剂5）抗血清，1支，11ml，即用，单克隆瘦素抗血清，内含0.3%的Proclin防腐剂。6）酶复合物，1支，11ml，即用，辣根过氧酶标记的抗兔复合物，内含0.3%的Proclin防腐剂7）TMB底物液，1支，14ml，即用8）终止液，1支，14ml，即用，内含0.5M的H2SO4，避免接触终止液，以免刺激皮肤或灼烧皮肤。9）洗涤液（40×），1支30ml注：零标准品应视需要而定。4、实验所需器材（但试剂盒不提供）1）酶标仪（450±10nm）（如DRG公司的酶标仪）2）极ng确取样枪3）吸水纸。4）蒸馏水5、贮存条件未开启的试剂在28℃下贮存，在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂。酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。6、样品采集1）血清：静脉穿刺采集全血，待其凝血，在室温下离心分离血清。未完全凝血前请勿离心，接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。2）血浆：将全血采集到含有抗凝剂的离心管，采集后立即离心分离。3）样品的储存：实验开始前应用盖子将样品密封好，2-8℃下可存放24个小时，如实验之前需将样品贮存更长的时间，应当将样品冻存于-20℃的环境下，并且只能冻存一次，不能反复冻存。解冻的样本在实验之前必须要上下倒置几次。7、样品的稀释：在**次实验中，要是样品的浓度高于Z高标准品，则样品应用按实验步骤所描述用零标准品进行稀释，并重新检测。并且在计算浓度时需乘上此稀释因子。例子：a）按1：10稀释：10μL的血清+90μL的零标准品（充分摇匀）。b）按1：100释稀：10μL按a）稀释的血清+90μL的零标准品（充分摇匀）8、实验步骤所有的标准品、质控品和样品都必须做双份检测以确保所有的检测条件都一样。每一次实验都有一条标准曲线。1）将所需数目的板条置于板架上。。2）用一次性吸嘴将标准品质控品和样品分别15μL加入相应的检测孔中。3）每孔加入100μL的检测缓冲液。4）充分混合10秒，在此步骤中充分混合非常重要。5）室温下温育120分钟。6）快速弃去检测孔中的内含物，每孔用300μL洗涤液洗板三次，在吸水纸上拍干以除去残余液体。注意：洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7）每孔加入100μL抗血清。8）在室温下温育30分钟。9）快速弃去检测孔中的内含物，每孔用300μL的洗涤液洗板三次，在吸水纸上拍干以除去残余液体。10）每孔加入100μL酶联物。11）在室温下温育30分钟。12）快速弃去检测孔中的内含物，每孔用300μL的洗涤液洗板三次，在吸水纸上拍干以除去残余液体。13）每孔加入100μL底物液。14）室温温育15分钟。15）每孔加入50μL终止液以终止酶反应。16）在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。9、结果计算1）计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2）用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘，作一标准曲线。3）用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4）自动计算方法：在IFU上，它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5）样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果：人群ng/ml男性3.84±1.79女性7.36±3.73本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司公司地址：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-2681443[详细]

  2018-11-14 10:00

  产品样册

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• 猪瘦素(LEP)ELISA试剂盒

  猪瘦素(LEP)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-12 00:00

  课件

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• 大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒

  大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  标准

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• 人瘦素(LEP)检测试剂盒

  人瘦素(LEP)检测试剂盒[详细]

  2015-03-16 00:00

  标准

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• 瘦素(leptin)ELISA试剂盒说明

  瘦素(leptin)ELISA试剂盒说明[详细]

  2016-07-29 00:00

  应用文章

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• 小鼠瘦素（LEP）试剂盒使用方法

  检测范围：96T30pg/ml-800pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中瘦素(LEP)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠瘦素(LEP)水平。用纯化的小鼠瘦素(LEP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入瘦素(LEP)，再与HRP标记的瘦素(LEP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠瘦素(LEP)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（1600pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 瘦素受体（长） Leptinreceptor单抗

  应用瘦素受体（长）Leptinreceptor单抗实验：试验验证过适用于Westernblotting实验、免疫组化实验（Immunohistochemistry）、ELISA实验。Leptinreceptor单抗?说明书，请打电话询要。乳腺癌相关抗原包装规格：0.1ml、0.2mlAnti-Leptinreceptor：鼠源单抗、兔源多抗重要提示：瘦素受体（长）Leptinreceptor单抗避免重复冻融，专为科研实验使用。欢迎打电话咨询详情！Ang-Ⅰ,人（Ang-Ⅰ）Elisa试剂盒NBB培养基盐酸喹那普利标准品人Elisa-血管内皮细胞粘附分子1试剂盒,(VCAM-1/CD106)试剂盒IL-1β,鱼类（IL-1β）Elisa试剂盒10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基颗粒?兔Elisa-甲状腺素Elisa试剂盒,(T4)试剂盒ACA-IgM,小鼠（ACA-IgM）Elisa试剂盒3%NaCl硫化氢生化管人Elisa-孕激素/孕酮试剂盒,(PROG)试剂盒5-氨基水杨酸,美沙拉秦标准品小鼠Elisa-葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽试剂盒,(GIP)试剂盒Cav-1,人（Cav-1）Elisa试剂盒人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)elisa试剂盒St-Ag,人（St-Ag）Elisa试剂盒磷酸西他列汀一水标准品人Elisa-脱氧胶原吡啶交联试剂盒,(DPD)试剂盒含糖牛肉汤培养基[详细]

  2018-11-05 10:00

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• 瘦素（LEP）ELISA试剂盒使用说明

  瘦素（LEP）ELISA试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%瘦素（LEP）ELISA试剂盒检测范围：0.2μg/L-8μg/L瘦素（LEP）ELISA试剂盒实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠瘦素（LEP）水平。用纯化的大鼠瘦素（LEP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入瘦素（LEP），再与HRP标记的瘦素（LEP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素（LEP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠瘦素（LEP）浓度。瘦素（LEP）ELISA试剂盒样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。瘦素（LEP）ELISA试剂盒操作步骤：标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为6μg/L，4μg/L，2μg/L，1μg/L，0.5μg/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。瘦素（LEP）ELISA试剂盒注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。瘦素（LEP）ELISA试剂盒保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-05 10:00

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• 小鼠瘦素（LEP）酶联免疫分析

  小鼠瘦素（LEP）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T30pg/ml-800pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中瘦素（LEP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠瘦素（LEP）水平。用纯化的小鼠瘦素（LEP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入瘦素（LEP），再与HRP标记的瘦素（LEP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素（LEP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠瘦素（LEP）浓度。[详细]

  2018-12-30 10:00

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• 大鼠瘦素(Leptin)检测试剂盒

  大鼠瘦素(Leptin)检测试剂盒[详细]

  2024-09-14 10:15

  操作手册

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• 人瘦素(LEP)ELISA试剂盒

  人瘦素(LEP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-20 13:38

  安装说明

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• 小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒

  小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-29 01:16

  课件

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• 猪瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒

  猪瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-05-28 00:00

  应用文章

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• 人瘦素（Leptin）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人瘦素（Leptin）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Leptin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Leptin与单抗结合，加入生物素化的抗人Leptin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，Leptin浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Leptin浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。血清、血浆建议作1：5稀释（取20ul，加标本稀释液80ul,稀释5倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成40ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Leptin含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的Leptin检测浓度小于30pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人Leptin。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 牛瘦素（leptin）说明书间接法

  www.biokanu.com牛瘦素（leptin）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中瘦素（leptin）的含量。实验原理本试剂盒应用间接法测定标本中牛瘦素（leptin）水平。用纯化的牛瘦素（leptin）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的瘦素（leptin）标准品和未知浓度的瘦素（leptin）待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素（leptin）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛瘦素（leptin）浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶8标准品S1（3600ng/L）0.5ml×1瓶2链霉亲和素-HRP6ml×1瓶标准品S2（2400ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条标准品S3（1200ng/L）0.5ml×1瓶4生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1瓶标准品S4（600ng/L）0.5ml×1瓶5显色剂A液6ml×1瓶标准品S5（300ng/L）0.5ml×1瓶6显色剂B液6ml×1/瓶9说明书1份7终止液6ml×1瓶10封板膜2张标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融操作步骤根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中加入50微升样本，盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。37℃温育30分钟洗涤：操作同4。加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。洗涤：操作同4。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值待入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以稀释倍数（×5×n）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。线形范围：200ng/L-4000ng/L规格：96人份/盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-22 10:00

  产品样册

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• 人瘦素受体(LEPR)检测试剂盒

  人瘦素受体(LEPR)检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 22:30

  安装说明

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• 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒

  大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

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• 人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒

  人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  操作手册

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