GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记试剂盒

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

2018-11-18 10:00 746阅读次数

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• GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记试剂盒

  GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记试剂盒产品说明书主要用途GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记试剂是一种旨在使用同位素（[γ32P]ATP）和cAMP依赖性蛋白激酶A（proteinkinaseK），标记纯化的目标融合蛋白，成为敏感探针的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种GST融合的重组蛋白。其应用于后续远西方杂交（FARWESTERNBLOT）印迹实验和印迹覆膜结合（BLOTOVERLAYBINDING）实验等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，反应敏感，重复性好。技术背景谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase；GST）融合蛋白（fusionprotein）的技术，广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的制造和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成，使用同位素（[γ32P]ATP）和cAMP依赖性蛋白激酶A（proteinkinaseK），标记纯化的目标融合蛋白，作为敏感的探针，在远西方杂交（FARWESTERNBLOT）印迹实验或印迹覆膜结合（BLOTOVERLAYBINDING）实验中，探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。产品内容缓冲液（ReagentA）毫升标记液（ReagentB）微升（用户自备）反应液（ReagentC）微升酶促液（ReagentD）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里；有效保证6月用户自备[γ32P]ATP同位素：用于同位素标记1.5毫升离心管：用于样品反应操作和保存的容器干式恒温仪：用于标记孵育液体闪烁计数器（liquidscintillationcounter）：用于同位素活性测定实验步骤1．准备好纯化的GST融合蛋白2．移取xx微升缓冲液（ReagentA）到1.5毫升离心管3．加入2.5微升用户自备的GST融合蛋白（总量为10微克）4．加入xx微升标记液（ReagentB）（注意：同位素总量为10毫居里/毫升；5000居里/毫摩尔）5．加入xx微升反应液（ReagentC）6．加入xx微升酶促液（ReagentD）7．枪头上下抽吸混匀8．放进30℃干式恒温仪孵育30分钟9．放进-70℃保存或置于冰槽里备用10．或使用5至10微升（107CPM）标记蛋白继续后续远西方杂交（FARWESTERNBLOT）印迹实验和印迹覆膜结合（BLOTOVERLAYBINDING）实验等注意事项1．本产品为20次操作2．本产品的标记效率可达60%以上3．操作时，须戴手套4．操作时，严格无菌5．同位素操作须严格遵守规章制度6．建议使用带滤芯的枪头进行操作7．同位素[γ32P]ATP（1居里=37GBq），建议使用ICN或AMERSHAM（安玛西亚）公司8．由于[γ32P]同位素的半衰期短，建议使用新鲜同位素材料；且标记后即刻使用9．可以直接在GST融合蛋白树脂上进行标记，然后常规洗脱或凝血酶（THROMBIN）切离纯化；纯化后进行同位素活性测定10．本公司提供系列同位素处理试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• GST融合蛋白纯化--纯化小量蛋白

  GST融合蛋白纯化--纯化小量蛋白[详细]

  2015-04-24 00:00

  选购指南

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• 谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白纯化试剂盒

  主要用途谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白纯化试剂是一种旨在通过谷胱甘肽亲和树脂的高度选择性结合，进一步竞争性温和洗脱，获得非变性的重组谷胱甘肽-S-转移酶标记蛋白的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种融合或标记在谷胱甘肽-S-转移酶上目标蛋白以及谷胱甘肽过氧化物酶和乙二醛酶Ｉ的分离纯化等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，纯化谷胱甘肽-S-转移酶结合能力强（2－4毫克/次），回收纯度和效率可达95％。技术背景研究编码蛋白首先通过重组DNA技术在细菌中表达，其中谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白系统有效地帮助目的基因获得高表达的目标蛋白。目的基因被引入到细菌中高度表达的谷胱甘肽-S-转移酶基因，利用该基因的表达系统，避免了翻译过程中影响表达的各种因素，从而得到满意的表达产物。除了谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白系统，还有His标记、β－半乳糖苷酶融合蛋白、trpE融合蛋白、硫氢还原（Trx）融合蛋白系统等。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白纯化试剂盒产品说明书（中文版）

  谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白纯化试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-04-29 00:00

  期刊论文

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• 人足细胞标记蛋白（PCX）ELISA试剂盒

  人足细胞标记蛋白(PCX)ELISA试剂盒上海elisa试剂盒厂家,广锐生物为高质量elisa的生产商及供应商，回馈各位老师们的大力支持，部分ELISA试剂盒年底促销优惠，限时购买。可来电了解详情，我们讲及时为您提供专业的技术服务。半胱胺酸蛋白酶蛋白-12（大、小鼠）Caspase-12抗体.大鼠TNFsR-Ⅰelisa试剂盒生产神经粘蛋白Neurocan抗体.样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白OPCML抗体.人calnexinelisa试剂盒生产胰岛素降解酶IDE抗体.成纤维细胞生长因子受体3FGFR3抗体.犬β-EPelisa试剂盒生产大鼠IgARatIgA抗体.小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)elisa检测技术人PGDSelisa试剂盒生产兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa检测技术人足细胞标记蛋白(PCX)ELISA试剂盒1、elisa规格：96孔/48孔2、货期：库存现货。3、产品订购以订货当日Zxin价格为准。4、Elisa试剂盒技术服务要求：专业，规范，GX。5、种属多，产品质量好，灵敏度高，免费技术代测。6、人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、鸡、马、猴、羊、猪、牛、各类植物等种属标本。人足细胞标记蛋白(PCX)ELISA试剂盒[详细]

  2018-10-23 10:30

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• 抗体/蛋白HRP标记制备试剂盒产品说明书

  上海哈灵生物科技有限公司HL40029v.A抗体/蛋白HRP标记制备试剂盒产品说明书主要用途抗体/蛋白HRP标记制备试剂是一种旨在通过高碘酸氧化产生活化的辣根过氧化酶，与抗体或蛋白中氨基偶联反应，进一步还原和中和作用，确保复合体的稳定的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种种系的抗体、纯化蛋白的HRP标记。其应用于后续WESTERNBLOT、免疫组化、ELISA等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，反应敏感，重复性好。技术背景辣根过氧化酶，分子量44Kd，常作为标记，用于免疫反应的定量检测（enzymeimmunoassay；EIA），例如免疫印迹WESTERNBLOT、免疫检测ELISA和免疫化学染色immunohistochemicalstaining等。辣根过氧化酶具有价廉、高纯、高特异活性、稳定等优点，成为主要的（占80％）抗体或蛋白缀和标记酶。基于辣根过氧化酶为糖蛋白，含有8个糖链，通过高碘酸避光氧化，使羟基和醛基分离后，活化的HRP既不失活，又能在碱性条件下，与所有蛋白或抗体存在的氨基进行偶联反应，形成席夫碱（Schiff'sbases），进而在酸性透析处理后去除剩余的高碘酸和预防自偶联。经过温和的硼氢化氰钠（sodiumcyanoborohydride）还原水合作用，以及乙醇胺（ethanolamine）或2-巯基乙胺（2-mercaptoethylamine）中和残余的醛基，使标记蛋白/抗体更加稳定。产品内容缓冲液（ReagentA）1毫升标记液（ReagentB）50微升还原液（ReagentC）200微升中和液（ReagentD）50微升保存液（ReagentE）1毫升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里；有效保证6月用户自备目标抗体或蛋白：用于HRP标记1.5毫升离心管：用于样品反应操作和保存的容器震荡器：用于混匀反应物实验步骤移取10微升（总量100微克）用户自备的目标抗体或蛋白（分子量在160Kd左右或以下）加入90微升缓冲液（ReagentA），混匀加入10微升标记液（ReagentB），混匀室温下（25℃）孵育1小时或4℃冰箱里孵育16小时加入10微升还原液（ReagentC），混匀室温下孵育15分钟加入10微升中和液（ReagentD），混匀室温下孵育15分钟加入130微升保存液（ReagentE），混匀获得标记蛋白或抗体终浓度0.6毫克/毫升即刻放进-70℃保存或置于冰槽里备用或继续后续ELISA、WESTERNBLOT、IMMUNOHISTOLOGY等注意事项本产品为5次（100微克/次）操作操作时，须戴手套样品中避免含有叠氮化钠（sodiumazide）、Tris、甘氨酸（glycine）、氢氧化铵（NH4OH）等，否则干扰标记如果标记液（ReagentB）没有充分溶解，可以放在4℃冰箱里72小时或更长时间后使用如果需要增加标记量，则相应增加试剂用量如果标记500Kd以上的蛋白或抗体，则使用20微升标记液（ReagentB）即可标记效率取决于目标蛋白或抗体与活化HRP的分子摩尔浓度比例和结构关系HRP标记蛋白复合体在4℃温度下保持4周稳定；在－20℃温度下，保持6个月稳定标记抗体后续应用建议用量如下：应用标记抗体浓度ELISA250纳克/毫升至2.5微克/毫升WESTERNBLOT0.5微克/毫升至50微克/毫升IMMUNOHISTOLOGY2.0微克/毫升至5.0微克/毫升本公司提供系列蛋白/抗体标记试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定不含污染性蛋白酶[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 人ATP酶(ATP)检测试剂盒

  人ATP酶(ATP)检测试剂盒[详细]

  2014-09-29 00:00

  应用文章

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• 人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)检测试剂盒

  人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)检测试剂盒[详细]

  2015-03-10 00:00

  操作手册

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• 足细胞标记蛋白/足盂蛋白（PCX）ELISA试剂盒说明书

  足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的BFGF标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlβ-EP小鼠β内啡肽规格：48T/96Tβ-Cat小鼠β连环蛋白/联蛋白规格：48T/96TβManase小鼠β甘露糖苷酶规格：48T/96TIFN-β/IFNB小鼠β干扰素规格：48T/96TAβ1-42小鼠β淀粉样蛋白1-42规格：48T/96TAβ1-40小鼠β淀粉样蛋白1-40规格：48T/96TβGAL小鼠β半乳糖苷酶规格：48T/96Tβ-hexosaminidaseA小鼠β氨基己糖苷酶A规格：48T/96Tβ2-GP1IgA/G/M小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M规格：48T/96TαHBDH小鼠α羟基丁酸脱氢酶规格：48T/96Tα-glucosidase小鼠α葡萄糖苷酶规格：48T/96Tα-GST小鼠α谷胱甘肽S转移酶规格：48T/96TαManase小鼠α甘露糖苷酶规格：48T/96TIFN-α小鼠α干扰素规格：48T/96TGal小鼠α半乳糖基抗体规格：48T/96TαNAG小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶规格：48T/96TAFU小鼠αL岩藻糖苷酶规格：48T/96TIDUA小鼠αL艾杜糖苷酸酶规格：48T/96Tα2-PI小鼠α2纤溶酶YZ物规格：48T/96T[详细]

  2018-10-09 10:00

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• 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)检测试剂盒

  人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)检测试剂盒[详细]

  2015-03-17 00:00

  标准

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• 藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法

  藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法[详细]

  2015-06-17 00:00

  期刊论文

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• 别藻蓝蛋白标记试剂盒

  别藻蓝蛋白标记试剂盒Lightning-Linkisaonestepantibodylabe领kit,requiringjust30secondshands-ontime.Theantibodyiscovalentlybondedtothelabelinadirectionalandcontrolledprocessatnear-neutral.Allophycocyaninisalarge105kDafluorescentphycobiliproteincommonlyusedinFACSanalysis.Itabsorbsat650nmandemitsat662nm.[详细]

  2024-09-29 00:10

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• 辣根过氧化物酶标记试剂盒

  辣根过氧化物酶标记试剂盒Immunohistochemistryexperiments-stillexperiencinghiackgroundasaresultofsecondaryantibodies?Whybothergodirect!LinkyourprimaryantibodieswithHRPusingLightning-LinktheWorld’seasiesttouseantibodylabe领kit,whichrequiresonly30secondshands-ontime.[详细]

  2024-09-28 00:01

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• 小鼠ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)ELISA试剂盒

  小鼠ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)ELISA试剂盒[详细]

  2016-08-18 00:00

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• 小鼠ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)ELISA试剂盒

  小鼠ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)ELISA试剂盒[详细]

  2016-07-18 00:00

  应用文章

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• 生物素抗体标记试剂盒

  生物素抗体标记试剂盒Lightning-LinkLightning-Linkisaonestepantibodylabe领kit,requiringjust30secondshands-ontime.Theantibodyiscovalentlybondedtothelabelinadirectionalandcontrolledprocessatnear-neutralpH.LabelTheattachmentofbiotintobiomoleculesisanimportantlaboratorytechnique.Biotinbindstothetetramericavidinproteins,includingstreptavidinandneutravidin,withexceptionallyhighaffinity,andthisinteractionisexploitedinvariousapplicationssuchaswesternblotting,immunohisthochemistryandELISA.Thebiotininthekithasanextendedlinkertofacilitatemolecularinteractions.Lightning-LinkBiotinhasbeenoptimisedfortwoseparateapplications.TypeAisintendedforassaysinwhichastreptavidin-labeleddetectionreagentwillbeused,whilstTypeBisoptimisedforassaysinwhichthebiotinylatedproteiniscapturedbystreptavidinimmobilizedonasurface（ieplates,nitrocellulose,magneticbeadsetc）.[详细]

  2024-09-29 11:24

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• 高质量定点标记蛋白——专为细胞检测打造

  义翘神州成功开发了一系列定点标记重组蛋白产品，该类产品通过精准位点特异性标记技术，可有效维持蛋白的天然构象与生物学活性，具有优异的稳定性及批间一致性；应用与细胞检测时可显著提升检测的灵敏度、特异性……[详细]

  2026-01-22 10:47

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• 小鼠足细胞标记蛋白（PCX）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  小鼠足细胞标记蛋白（PCX）酶联免疫分析试剂盒使用说明书[详细]

  2016-02-23 00:00

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• 动物肝星状细胞标记蛋白DESMIN表达免疫组化检测试剂盒

  动物肝星状细胞标记蛋白DESMIN表达免疫组化检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途动物肝星状细胞标记蛋白DESMIN表达免疫组化检测试剂是一种旨在使用免疫抗体显色技术，即通过抗DESMIN多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗，使用染料二氨基联苯胺染色显示棕褐色，分析肝星状细胞DESMIN蛋白表达和分布状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种人体、大鼠、小鼠等肝星状细胞标记蛋白DESMIN蛋白检测。广泛用于肝星状细胞鉴定、肝脏发育、肝纤维化病变的研究。产品严格无菌，即到即用，显色清晰，操作简捷，性能稳定。技术背景肝星状细胞（Hepaticstellatecells；HSC），也称为Ito细胞、窦周细胞（perisinusoidalcell）、维生素A储存细胞、脂肪细胞、或脂肪储存细胞。其位于实质细胞（parenchymalcell）和内皮细胞（endotheriallining）之间，具有维甲类化合物代谢、储存和体内平衡、胞外基质重建、生长因子和细胞因子的制造、窦腔收缩和舒张、肝组织发育和再生的功能，与肝纤维化的发生、门静脉高压（portalhypertension）和肿瘤转移有关。结蛋白（desmin）属于第三类中间丝蛋白（intermediatefilaments），在1984年由Yokoi等发现在肝星状细胞表达，成为其标记蛋白之一，也是识别肝星状细胞的金标准。进一步研究发现：1）结蛋白在正常大鼠门静脉周围（periportal）细胞呈阳性，而在ZY静脉（pericentral）周围50%呈阴性；2）小鼠肝脏发育过程中，结蛋白阳性的肝星状细胞在肝实质（parenchyma）散在分布；3）结蛋白阳性的肝星状细胞分布在狄氏窦周间隙（perisinusoidalspaceofDisse）的沿边分区（littoralcompartment）；4）大鼠静止型（quiescent）肝星状细胞结蛋白阳性，而人体静止型为阴性；5）分离培养的肝星状细胞结蛋白呈阳性；6）肝星状细胞转分化（transdifferentiation）成肌成纤维细胞（myofibroblast）过程中，结蛋白阳性；7）α-SMA和GFAP也是肝星状细胞的标记蛋白。通过抗结蛋白多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗（Peroxidaseconjugatedantibody）反应，进而使用染料二氨基联苯胺染色显示结蛋白阳性肝星状细胞为棕褐色。[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 人α谷胱甘肽S转移酶（α-GST）ELISA试剂盒

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  2018-10-23 10:30

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