人甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗体ELISA kit说明书

本文由 上海希美化学有限公司 整理汇编

2014-09-02 00:00 675阅读次数

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• 人甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗体ELISA kit说明书

  人甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗体ELISA kit说明书[详细]

  2014-09-02 00:00

  期刊论文

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• 人甲状旁腺激素(PTH)ELISA Kit说明书

  人甲状旁腺激素(PTH)ELISA Kit说明书[详细]

  2014-09-02 00:00

  期刊论文

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• 鸡甲状旁腺激素（PTH）ELISA试剂盒说明书

  检测试剂盒ELISA的应用ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：ELISA试验原理:试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。关键词：ELISA试剂盒天津,北京生化鉴定试剂盒价格,北京酶联免疫试剂盒经销商,北京大鼠ELISA试剂盒,北京绵羊ELISA试剂盒,北京ELISA试剂盒供应商,北京免疫组化试剂盒说明书,ELISA北京,北京ELISA试剂盒价格,北京酶联免疫试剂盒供货商,北京酶联免疫试剂盒经销商,北京酶联免疫试剂盒供应商种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。ELISA的样本实验准备：在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。标本应避免反复冻融。液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。可概括四个方面：1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。[详细]

  2018-09-19 10:00

  产品样册

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• 人甲状旁腺激素（PTH）酶联免疫分析

  人甲状旁腺激素（PTH）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T2.5ng/L-80ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中甲状旁腺激素（PTH）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲状旁腺激素（PTH）水平。用纯化的人甲状旁腺激素（PTH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲状旁腺激素（PTH），再与HRP标记的甲状旁腺激素（PTH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状旁腺激素（PTH）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲状旁腺激素（PTH）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 鸡甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒

  鸡甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-13 00:00

  课件

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• 大鼠甲状旁腺激素(PTH) ELISA试剂盒

  大鼠甲状旁腺激素(PTH) ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-29 04:49

  期刊论文

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• 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA Kit说明书

  人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA Kit说明书[详细]

  2014-09-02 00:00

  实验操作

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• 人甲状旁腺激素（I-PTH）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人甲状旁腺激素（I-PTH）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人I-PTH单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的I-PTH与单抗结合，加入生物素化的抗人I-PTH，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，I-PTH浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中I-PTH浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入2ml蒸馏水混匀，配成20ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应I-PTH含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的I-PTH检测浓度小于16pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人I-PTH。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于12％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 大鼠C端甲状旁腺激素PTH检测试剂盒

  RatPTHELISAKitINTENDEDUSERatPTHELISAKitintendedforresearchuseonlyinthedeterminationofratCTerminalPTHinserum,plasmaorcellculturemedia.RatPTHELISAKitINTRODUCTIONRatintactparathyroidhormone(PTH)isan84aminoacidpolypeptideproducedbytheparathyroidglandwithitsbiologicalactivityresidingintheN-Terminalregionofthepeptide.PTHplaysanimportantroleinmaintainingtheconcentrationofionizedcalciumwithinthelimitsneededtoachievenormalmetabolicfunctions.Whenserumcalciumlevelsaredecreasedtheparathyroidglandincreasessecretionfromskeletalreservesintothecirculation.WhenlevelsofserumcalciumareincreasedthesecretionofPTHisreduced.[详细]

  2024-09-29 11:22

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• 人甲状旁腺激素（I-PTH）ELISA试剂盒简介

  人甲状旁腺激素（I-PTH）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人I-PTH单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的I-PTH与单抗结合，加入生物素化的抗人I-PTH，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，I-PTH浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中I-PTH浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入2ml蒸馏水混匀，配成20ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应I-PTH含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的I-PTH检测浓度小于16pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人I-PTH。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于12％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-02 10:00

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• 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit说明书

  人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit说明书[详细]

  2014-08-25 00:00

  标准

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• 人黑色素浓缩激素(MCH)ELISA kit说明书

  人黑色素浓缩激素(MCH)ELISA kit说明书[详细]

  2014-08-21 00:00

  操作手册

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• 人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒

  人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒[详细]

  2016-01-20 00:00

  期刊论文

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• 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒

  人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 01:24

  标准

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• 人肌联蛋白(TTN)抗体ELISA kit说明书

  人肌联蛋白(TTN)抗体ELISA kit说明书[详细]

  2014-08-21 00:00

  安装说明

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• 人破伤风(Tetanus)抗体ELISA kit说明书

  人破伤风(Tetanus)抗体ELISA kit说明书[详细]

  2024-09-29 09:52

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• 人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒试剂盒

  人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒试剂盒试验原理：PTHrP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PTHrP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PTHrP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PTHrP的浓度呈比例关系。人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒试剂盒内容及其配制自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒试剂盒试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的PTHrP标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的PTHrP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400nmol/L4、敏感度：1.0nmol/L[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 人（Human）甲状旁腺激素相关蛋白ELISA 检测试剂盒

  试验原理：PTHrP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PTHrP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PTHrP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PTHrP的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400nmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗PTHrP抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型人(Human)甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人(Human)甲状旁腺激素相关蛋白ELISA检测试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：400nmol/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200nmol/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100nmol/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50nmol/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25nmol/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5nmol/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0nmol/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（nmol/L）A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的PTHrP标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的PTHrP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400nmol/L4、敏感度：1.0nmol/L[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 人脊髓灰质炎病毒(PV)抗体(IgG)ELISA Kit说明书

  人脊髓灰质炎病毒(PV)抗体(IgG)ELISA Kit说明书[详细]

  2014-09-02 00:00

  专利

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• 褪黑激素ELISA Kit使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用说明书（德国IBL：RE54021）1、应用范围此试剂盒可用于人血清和血浆中褪黑激素的体外定量检测。2、前言说明松果体因其在光周期现象中的重要作用，已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到Z高。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息，如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用，它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道，褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致，如：失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素，之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。生物素和非生物素标记的抗原竞争性结合包被板上有限的抗体结合位点。生物素抗原结合到抗体上的量与样品中抗原的量成反比。系统达到平衡后，洗板除去游离的生物素抗原，结合到抗体上的生物素抗原可以用抗生物素碱性磷酸酶标记物和对硝基苯磷酸底物检测出来。用已知的标准品数据做一条标准曲线，将未知样品的酶活性与标准曲线进行比较就可以定量出未知样品的量。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述,如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它样品的提取或储存于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用4次。5、样品的采集与储存血清，血浆（EDTA，肝素）按照静脉穿刺的常规注意事项采集样品，血液样品自采集到实验时都必须保证其化学完整性。不要使用明显溶血、黄疸和脂血样品。混浊的样品应当在实验开始前离心以除去所有的颗粒性物质。储存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太阳直射，避免反复冻融。稳定性24小时3个月1年6、试剂盒成分数量标记成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素，冻干，内含稳定剂。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸盐抗血清，冻干粉，内含抗血清（兔，多克隆）和稳定剂。1×250ulENZCONJCONC酶联物，80倍浓缩，内含碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体（羊）、Tris缓冲液和稳定剂。1×6×2mlCALA-FLYO标准品A-F，冻干粉，内含稳定剂，提取浓度请见试剂瓶标签或QC质控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO质控品1+2，冻干粉，内含稳定剂，浓度/可接受范围请见试剂瓶标签。1×50mlASSAYBUFCONC检测缓冲液，10倍浓缩，内含磷酸缓冲液、吐温和稳定剂。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于铝铂金属袋中，内含对硝基苯硫酸盐。1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液，即用，内含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP终止液，即用，内含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱，即用，C18RP，1m3/100mg。另需提取柱可从IBL定够（编号：KEME761）3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1）移液器，体积：50;500ul2）试管（12×75mm）3）轨道振荡器（400-600rpm）4）旋涡混合器5）带储器的8道移液器6）洗涤瓶，自动或半自动洗板机7）离心机（冷冻离心机更适宜）：200-500×g，也可选用多头抽真空装置（例如：Mallinekrodt-Baker或Waters）。8）甲醇（HPLC级）9）蒸发离心机10）可在405nm处读数的酶标仪（参考波长600-650nm）11）蒸馏水或去离子水12）吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成3次进行。下列所述体积为检测32人份时所需要的量。8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性15ml检测缓冲液150ml双蒸水1：102-8℃4周标准品和质控品2.0ml双蒸水静置15min，混合时避免气泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸馏水静置15min，混合时避免气泡临时配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸馏水静置15min，混合时避免气泡70ul酶联物5.6ml已稀释的检测缓冲液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物缓冲液10ml未稀释甲醇100ml蒸馏水10%（v/v）如果溶液的需要量比较大,应该将试管内的溶液混合.避免反复冻融。8.2样品的稀释如果怀疑样品中的褪黑激素浓度比Z高标准品的高，必须将样品在提取步骤前用检测缓冲液进行进一步的稀释。8.3样品、标准品和质控品的提取（提取柱）按照此步骤进行提取，提取量大约为90-1**%。为了避免柱子堵塞，提取样品前将样品过滤或离心一下。注意每份样品、标准品和质控品都必须提取，提取必须提前进行。干燥的提取物（甲醇蒸发后）可在2-8℃或-20℃下储存24个小时。用甲醇洗提后，提取柱就可以用于下一份样品的提取或是存放到2-8℃的环境下。提取柱可以反复使用4次。如果是重复使用，在再次从A.1开始（柱的调制）。A、标准版本：离心与蒸发离心步骤1.柱的调制1将提取柱放到聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇（未稀释的），200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸馏水，200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。4为了避免柱子变干，请立即提取样品。2.样品提取5将提取柱放到相应的标记聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）。6向提取柱中加入0.5ml标准品、质控品和样品，200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。3、洗涤7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇（蒸馏水稀释），500g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。4、提取物的洗脱8将提取柱放到新的标记聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）9向提取柱中加入1ml未稀释的甲醇，200g离心1min使溶剂通过提取柱。10将提取柱从试管中移出，避免液滴还停留在柱子中。将柱子用于下一份样品的提取或存放于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用四次。5.提取物的蒸发和重新配置11用蒸发离心机将甲醇蒸发掉。12用0.15ml的蒸馏水重新稀释配置样品13旋涡混和1分钟，并立即检测样品。B、选择性版本：用多头抽真空装置代替离心机提取步骤仍然按照A1-5进行，柱子不变。用真空和≤5ml/min的流速使溶剂通过柱子。样品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸发离心机或氮气蒸发干燥溶剂。9、实验步骤1将提取好的标准品、质控品和样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔内加入50ul褪黑激素抗血清。4盖板，轻轻震板，2-8℃下温育14-20小时。5移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次，吸水纸上拍干以除出残余液体。6在每一微孔中加入150ul临时配置好的酶联物。7盖板，室温（18-25℃）轨道振荡器上（500rpm）温育120min。8大约在温育结束10分钟前准备好PNPP底物液。9移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次，吸水纸上拍干以除出残余液体。10如果有8道移液器，请用8道移液器加底物液和终止液，加底物液和终止液的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。11在每一微孔中加入200ul临时配置好的PNPP底物液。12室温（18-25℃）轨道振荡器上（500rpm）温育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP终止液，轻轻震板以使溶液混合均匀。14加终止液后60min内在405nm处读取OD值。（参考波长：600-650nm）10、结果计算在半对数坐标纸上或自动计算的方法，以标准品的OD值（Y轴，线性）对其浓度（X轴，对数）做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时，应当充分利用好每一个标准品数值（明显逸出的数值应当被忽略，再使用更加合理的数值代替它）。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于Z高标准品的样品，应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释，并重新检测。转换系数：褪黑激素（pg/ml）×4.30=pmol/l典型标准曲线（例子：不能用来定量）标准品褪黑激素（pg/ml）平均OD值OD/ODmax（%）A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值实验结果不能当作确定ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。对明显健康的一组人群进行研究发现，人体内的褪黑激素水平有着明显的生理周期变化，褪黑激素白天的水平很低，而晚上的水平则很高，而且个体之间的差异也很大。此外，褪黑激素的水平也与年龄有关系，其Z高浓度是在婴儿（3岁）样品中发现的。对6个明显健康献血者的褪黑激素生理周期进行研究。褪黑激素大概在白天下午四点Zdi，其平均值是4.6pg/ml；早晨4点达到**，平均值为77.5pg/ml。健康个体之间的褪黑激素Z高值差异很大，建议每个实验室都确定自己实验室的正常值范围。本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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