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大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书
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电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠DAO单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的DAO与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠DAO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,DAO浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中DAO浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000U/L的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入2000U/L的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0U/L为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应DAO含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的DAO检测浓度小于2U/L。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠DAO。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
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大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠DAO单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的DAO与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠DAO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,DAO浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中DAO浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000U/L的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入2000U/L的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0U/L为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应DAO含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的DAO检测浓度小于2U/L。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠DAO。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒
- 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-30 14:15
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大鼠二胺氧化酶(DAO)说明书
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2015-04-16 00:00
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大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa试剂盒使用方法
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2024-09-28 17:40
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大鼠二胺氧化酶(DAO)试剂盒使用方法
- 检测范围:96T25IU/L-800IU/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中二胺氧化酶(DAO)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠二胺氧化酶(DAO)水平。用纯化的大鼠二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠二胺氧化酶(DAO),再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠二胺氧化酶(DAO)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
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大鼠二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒
- 大鼠二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:06
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人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书
- 人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人DAO单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的DAO与单抗结合,加入生物素化的抗人DAO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,DAO浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中DAO浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成10U/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10U/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0U/L为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应DAO含量即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的DAO检测浓度小于8U/L。2.特异性:可同时检测重组或天然的人DAO。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于11%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒
- 小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠DAO单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的DAO与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠DAO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,DAO浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中DAO浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成10U/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10U/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0U/L为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应DAO含量即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的DAO检测浓度小于8U/L。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠DAO。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于11%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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猪二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒
- 猪二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 00:01
安装说明
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猪二胺氧化酶(DAO)酶联免疫(Elisa)试剂盒说明书
- 猪二胺氧化酶(DAO)酶联免疫(Elisa)试剂盒说明书[详细]
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2016-09-23 00:00
应用文章
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大鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析
- 大鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析[详细]
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2015-07-02 00:00
操作手册
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大鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠二胺氧化酶(DAO)水平。用纯化的大鼠二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠二胺氧化酶(DAO),再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠二胺氧化酶(DAO)浓度。[详细]
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2018-10-03 10:00
产品样册
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猪二胺氧化酶(DAO)ELISA检测试剂盒
- 猪二胺氧化酶(DAO)ELISA检测试剂盒[详细]
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2015-08-17 00:00
专利
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小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA Kit
- 小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA Kit[详细]
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2015-09-25 00:00
标准
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小鼠二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒
- 小鼠二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒[详细]
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2015-08-05 00:00
专利
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人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒资料下载
- 人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人DAO抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的DAO会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人DAO抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人DAO抗体与结合在包被抗体上的人DAO结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,DAO浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中DAO的浓度。人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒标本收集:血清:全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒实验通用规则
- 二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人DAO抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的DAO会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人DAO抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人DAO抗体与结合在包被抗体上的人DAO结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,DAO浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中DAO的浓度。二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒实验通用规则:1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%.可用水和电子天平进行确定。但**有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。4、实验时,要使底物避光保存。5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。12、底物是光敏感的,要在临用前现配医`学教育网搜集整理。13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。15、待检样品要澄清,否则会影响结果。16、温浴时间应遵守试剂盒规定。17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒标本收集:血清:全血标本于室温放置2小时或4℃夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。如果样本中检测物浓度高于标准品Z高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒实验原理
- 小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒实验原理本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
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2024-09-30 08:07
应用文章
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小鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 小鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.8U/ml-32U/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中二胺氧化酶(DAO)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠二胺氧化酶(DAO)水平。用纯化的小鼠二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入二胺氧化酶(DAO),再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠二胺氧化酶(DAO)浓度。小鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(64U/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。32U/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液16U/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液8U/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液4U/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2U/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。小鼠二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
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小鼠二胺氧化酶Elisa试剂盒实验原理和注意事项
- 小鼠二胺氧化酶Elisa试剂盒实验原理和注意事项小鼠二胺氧化酶Elisa试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠二胺氧化酶(DAO)水平。用纯化的小鼠二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠二胺氧化酶(DAO),再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠二胺氧化酶(DAO)浓度。小鼠二胺氧化酶Elisa试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。8.本试剂不同批号组分不得混用。9.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-09-28 10:00
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