Kainos FGF-23 ELISA Kit说明书

本文由 上海起发实验试剂有限公司 整理汇编

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• Kainos FGF-23 ELISA Kit说明书

  KainosLaboratories是日本的生物公司，其生产的FGF-23ELISAKit和ADAMTS13-cleaved广泛应用于各大医药企业，上海起发实验试剂有限公司正式为您带来KainosLaboratories高品质的产品，欢迎来电查询http://www.kainos.co.jpKainosLaboratories代理KainosLaboratoriesZG代理，KainosLaboratories上海代理，KainosLaboratories总代，KainosLaboratories北京代理ThiskitcapturesADAMTS13-cleavedproductsusingasandwichmethodwiththeanti-GSTmousemonoclonalantibodyandtheperoxidase-conjugatedmousemonoclonalanti-N10antibody.First,theanti-GSTmousemonoclonalantibodyimmobilizedontothemicroplatereactswiththeVWF73substrate（GST-VWF73-His）.Thesampleisthenappliedtothemicroplate,onwhichADAMTS13cleavestheVWF73substrate.Byapplyingthemousemonoclonalanti-N10antibodyconjugatedwithhorseradishperoxidase（HRPconjugatedantibody）,thecleavageproductissandwichedbetweenthetwoantibodies.BecausetheamountofthecleavageproductsdependsontheADAMTS13activity,theamountoftheenzyme-labeledantibodiesthatbindtothecleavageproductsalsoreflectthelevelofADAMTS13activity.Therefore,theplasmaADAMTS13activitycanbedeterminedbycolorimetricallymeasuringtheamountofdetachedoxidized（colored）TMBZusingureahydrogenperoxide（H2O2）and3,3’,5,5’-Tetramethyl-benzidine（TMBZ）asthesubstrates.上海起发实验试剂有限公司实验试剂一站式采购服务商1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。2：产品种类齐全，经营超过700多个品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知名药企。6：我们还是Santa,AdvancedBiotechnologiesInc,AthensResearch&Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FDNeurotechnologies,Inc.FormuMaxScientific,Inc,Genebridege,GlycotopeBiotechnologyGmbH;iduron,InnovativeResearchofAmerica,Ludger,neuroprobe,omicronbio,Polysciences,prospecbi,QA-BIO,quickzyme,RESEARCHDIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLinkBioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。7：我们还是invitrogen,qiagen,Tempshield,Inc.am,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批发，欢迎合作。[详细]

  2018-09-29 10:02

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• 大鼠成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）说明书

  www.biokanu.com大鼠成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）水平。用纯化的大鼠成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入成纤维细胞生长因子-23（FGF-23），再与HRP标记的成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：90ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为60ng/L，40ng/L，20ng/L，10ng/L，5ng/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：2ng/L-80ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 人成纤维生长因子-23（FGF-23）ELISA试剂盒说明书

  人成纤维生长因子-23（FGF-23）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人FGF-23单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的FGF-23与单抗结合，加入生物素化的抗人FGF-23，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，FGF-23浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中FGF-23浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成40ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应FGF-23含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的FGF-23检测浓度小于30pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人FGF-23。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 人黑色素ELISA Kit说明书

  人黑色素ELISA Kit说明书[详细]

  2014-08-21 00:00

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• Protein A ELISA Kit 9333-1说明书

  P/N9333-1RepligenA蛋白ELISA试剂盒ProteinAELISAKitP/N9333-1上海起发实验试剂有限公司ProteinAELISAKitP/N9333-1专业代理，具体产品信息欢迎电询：4006551678。ProteinAELISAKitHighlightsAlargepercentageoftheworld'scommercialsupplyofantibodyreliesonaRepligenmanufacturedproteinAligandforpurificationandRepligen’sELISAkitforproductrelease.2kitsforthemostaccuratedetectionandquantitationofleachedproteinARecombinantProteinAKitMabSelectSuReKitSuperiorinterandintrakitconsistencyforunparalleledreproducibilityPolyclonalchickencaptureantibodyforgreaterProteinAspecificityBiotinylatedrabbitanti-ProteinAdetectionantibodyforgreatersensitivityMatchedstandardsforthegreatestquantitationaccuracyThreesampleprepprotocolsforsuperiormethodoptimization上海起福生物科技有限公司联系人：杨建辉400电话：4006551678办公电话：021-50724187传真：021-50724961*8006手机：15921799099企业QQ:4006551678网址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦东新区绣川路561号1102室[详细]

  2018-09-29 10:02

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• 组胺ELISA Kit使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4组胺ELISAKit使用说明书（德国IBL：RE59221）1、应用范围此试剂盒可用于人血浆和尿液中组胺的体外定量检测。深化此实验可用于细胞培养上清液的研究。2、前言说明组胺（β-咪唑乙胺）是人体中Z重要的介质，它主要存在于过敏反应的起始阶段（速发型过敏）。组胺是由组胺酸经脱氨基作用产生的。组胺几乎存在于机体的所有组织中，主要储存于柱状细胞和嗜碱性粒细胞的异染性颗粒中。组胺通常都是以无活性的复合体性存在，只有当需要的时候才会释放。像其它的介质一样，组胺不仅能调节过敏反应的各种临床症状，也可以调节终止过敏反应的一系列效应。组胺在组织中的生物活性是通过三种受体来完成的，它们分别是H1，H2和H3受体。临床检测组胺的方法有：定量检测各种速发型过敏反应中嗜碱性白细胞释放组胺的量，也可以检测过敏药物ZL后各种体液（血浆，尿液，细胞培养上清）中组胺的量。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。样品中未知量的抗原和一定量的酶标抗原竞争性结合到包被在微孔中的抗体结合位点上。温育后洗板以终止竞争反应。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成反比。样品的实验结果可以从标准曲线上直接获取。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时，试剂在有效期内稳定。5、样品的采集与储存血浆（EDTA，肝素）按照静脉穿刺的常规注意事项采集样品，血液样品自采集到实验时都必须保证其化学完整性。不要使用明显溶血、黄疸和脂血样品。混浊的样品应当在实验开始前离心以除去所有的颗粒性物质。储存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太阳直射，避免反复冻融。稳定性5小时3个月2年尿液实验必须使用自然产生的尿液，也可使用24小时内产生的尿液。收集病人24小时内产生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐剂的容器中。为了计算结果，请确定尿液的总体积。实验开始前请先将样品离心。自然的尿液酸化尿液避免太阳直射，避免反复冻融。储存2-8℃2-8℃≤-20℃稳定性8小时3天6个月细胞培养上清使用细胞培养上清作样品，一般没特殊注意事项细胞培养基内的组胺浓度可能稍微要高些。全血全血中组胺释放量的检测必须用肝素化全血，具体信息请见相应的说明书（RE95000）6、试剂盒成分注意：试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分数量标记成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM组胺抗血清，蓝色，即用，内含：兔抗血清、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶联物，200倍浓缩，内含辣根过氧酶标记的组胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血浆标准品A-G，冻干，用于血浆样品的定标。内含：组胺、人血浆。具体浓度请见试剂瓶标签或质控单。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血浆质控1+2，冻干，内含：组胺、人血清。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/细胞培养标准品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和细胞培养样品的定标。内含：组胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液质控1+2，即用，内含：组胺、人尿液（酸化的）。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。1×2.25mlACYLREAG酰化试剂，即用，内含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC检测缓冲液，5倍浓缩，内含Tris缓冲液、吐温、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗涤液，20倍浓缩，内含磷酸缓冲液、吐温和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示缓冲液，紫色，即用，内含：Tris缓冲液、苯酚（pH＜7.5时颜色会发生改变＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，内含TMB、缓冲液和稳定剂。1×12mlTMBSTOPTMB终止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1）移液器，体积：10;20;50;100;1000ul2）试管（12×75mm）3）试管架4）振荡器5）旋涡混合器（500rpm）6）带储器的8道移液器7）洗涤瓶，自动或半自动洗板机8）酶标仪（参考波长：600-650nm）9）蒸馏水或去离子水10）吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明注意96人份的试剂盒可分成三份分别进行检测，下述体积为检测32人份时所需要的体积。8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性20ml检测缓冲液100ml蒸馏水1：52-8℃2周15ml洗涤液300ml蒸馏水1：2018-25℃将晶体溶解掉2-8℃4周血浆标准品0.4ml蒸馏水静置15min,混合时无泡沫-20℃1个月血浆质控品0.4ml蒸馏水静置15min,混合时无泡沫-20℃1个月10ul（*）酶联物2ml检测缓冲液1:200临时配置,只能使用一次18-25℃30分钟（*）在稀释前,确保塞子内无残留液体.8.2样品的稀释样品中组胺浓度高于Z高标准品的样品,应当在酰化前用相应的稀释液稀释,尿液样品用0.1M的HCl,血浆样品用样品稀释液（Cat.no.KEHP711）,试剂盒内未提供。8.3样品的酰化用试管准备样品注意不能血浆标准曲线确定酰化尿液或细胞培养样品中组胺的浓度,也不能用U/C标准曲线确定酰化血浆样品中组胺的浓度.8.3.1血浆1将血浆标准品、血浆质控品和病人样品分别100ul加入到相应的试管中。2在每一试管中加入100ul指示缓冲液，旋涡混合。3在每一试管中加入20ul酰化试剂，加入酰化试剂后立即旋涡混合。4将试管盖好，室温（18-25℃）温育30分钟。5在每一试管中加入750ul已稀释好的检测缓冲液，旋涡混合。8.3.2尿液，细胞培养上清1将U/C标准品、尿液质控品和病人尿液或细胞培养上清分别50ul加入到相应的试管中。2在每一试管中加入50ul指示缓冲液，旋涡混合。如果指示剂变成无色，说明溶液的pH值很低，样品中含有很多酸性物质。在这种情况下，再向试管中加入50ul指示缓冲液直至溶液略带微红。3在每一试管中加入10ul酰化试剂，加入酰化试剂后立即旋涡混合。4将试管盖好，室温（18-25℃）温育30分钟。5在每一试管中加入2000ul已稀释好的检测缓冲液，旋涡混合。注意：酰化处理好的样品可在2-8℃下存放一晚，-20℃环境下可存放2天。9、实验步骤1将酰化处理过的标准品、质控品和病人样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul临时配置好的酶联物。3在每一微孔中加入50ul组胺抗血清。4盖板，振荡器（500rpm）上室温温育3小时。5移去粘性金属板，弃取孔内反应物，每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板4次，吸水纸上拍干以除去残余液体。6如果有条件的话，可以用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液时，每孔的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血浆：振荡器（500rpm）上室温温育40min。尿液/细胞培养上清：振荡器（500rpm）上室温温育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB终止液以终止底物反应。轻轻振板使溶液混合均匀。10加终止液后15min内450nm处读取OD值。（参考波长：600-650nm）10、期望值实验结果不能当作任何ZL结果的**原因，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值（5%-95%），建议每个实验室读确定自己的正常值范围：血浆尿液24小时尿液自然产生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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• 肾上腺素ELISA Kit使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4肾上腺素ELISAKit使用说明书（德国IBL：RE59251）1、应用范围此试剂盒可用于人血清和尿液中肾上腺素的体外定量检测。2、临床意义儿茶酚胺类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织，并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中，儿茶酚胺激素及其代谢产物变肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加，因而这些激素可用于疾病的诊断。所以，这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断，当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤，用户可使用各种动物材料进行实验。所有动物的儿茶酚胺的化学结构相同，因此此试剂盒可用于测大鼠、小鼠或其它动物。3、实验原理此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定，前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品：维生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ剂，还有降血压类药物。血浆（EDTA）注意血液采集后两小时内，将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸的和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6h1个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。将病人24h内的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐剂的试剂瓶中。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6个月6、试剂盒成分注意：试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分数量标志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。1×6×2.5mlCALA-F标准品A-F，即用肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲肾上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）内含[-]肾上腺素，[-]去甲肾上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2质控品1+2即用,内含[-]肾上腺素，[-]去甲肾上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.1×250μLENZCONJCONC酶联物浓缩型（100×）内含：碱性磷酸酶标记的抗体，Tris缓冲液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸亲和凝胶。1×60mlEXTRBUF提取缓冲液粉红色，即用，内含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT冻干粉内含：儿茶酚-氧位-甲基转移酶（猪肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加剂内含：人血浆，稳定剂，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO肾上腺素抗血清紫罗兰色，即用，内含：抗肾上腺素抗体（兔），缓冲液，稳定剂。2×1.25mlCOENZ酶联复合物即用，内含：S-腺苷-L-蛋白酸，稳定剂。1×3mlENZBUF酶缓冲液即用，内含：Tris缓冲液，HCl，稳定剂。1×17mlRELEASEBUFRelease缓冲液黄色，即用，内含：0.1M的HCl，指示剂。1×3mlACYLREAG酰化试剂即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗涤液浓缩型（10×）内含：Tris缓冲液，HCl，吐温，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片内含：对硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP终止液即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材（但试剂盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）轨道摇床（200-900rpm）3）旋涡混合器4）带储器的8通道移液器5）洗涤瓶，自动或半自动包被板清洗系统6）酶标仪7）双蒸水或去离子水8）吸水纸，取样吸头，计时器8、实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。，下列所述体积为做48人份时所需要的量。8.1样品的稀释如果样品中肾上腺素浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释：样品待稀释稀释液备注血浆肾上腺素浓度高于Z高标准品中肾上腺素的浓度双蒸水提取步骤前尿液肾上腺素浓度高于Z高标准品中肾上腺素的浓度0.1N的HCl提取步骤前8.2样品、标准品和质控品的提取（提取板）1）将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各20μL和500μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外，在所有的微孔中加入500μL双蒸水以消除体积差别。2）在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3）盖板。在轨道摇床（600-900rpm）上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中，液体的表面应该会浸湿粘性金属板，但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。5）每孔加入2ml双蒸水6）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。8）每孔加入150μL提取缓冲液，再向每孔中加入50μL酰化试剂，立即混合均匀。9）在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下提取20min。（无需盖板）10）快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。11）每孔加入2ml双蒸水。12）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。14）每孔加入300μLRelease缓冲液。15）在轨道摇床（400-500rpm）上18-25℃的环境下振荡30min。（无需盖板）已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话，您可将提取板用粘性金属板盖好，在2-8℃的环境下可存放一夜。9、实验步骤9.1COMT酶溶液的准备注意：COMT酶溶液应在使用前直接临时配置。在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶联溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*，COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合，但要避免气泡产生，配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液，则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。9.2样品、标准品和质控品的酶分化注意如果要检测肾上腺素和去甲肾上腺素，我们建议您先检测肾上腺素。如果使用自动置换型衣液器加样，请将取样吸头内的残余液体加入到提取板的相应微孔内，否则剩余的提取液不够去甲肾上腺素检测用。将提取板放到有一定坡度的位置上。实验开始前，确定好肾上腺素和去甲肾上腺素的检测孔并标记好。9.3尿液与血浆中的甲肾上腺素1在每一微孔内加入25ul临时配制的COMT酶溶液，轻轻振板以使溶液混合均匀。2将提取好的标准品、质控品和样品分别25ul加入到相应的微孔内。在此步骤中，我们可以将取样吸头直接深入到COMT溶液里。加样后，溶液颜色变成粉色，轻轻振板以使溶液混合均匀。3向每一微孔中加入50ul甲肾上腺素抗血清（绿色）。4盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育120min。8.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性20ml洗涤液180ml双蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶联物6ml洗涤缓冲液（已稀释好）1：101临时配置，仅能使用一次，混合时避免气泡产生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物缓冲液临时配置，仅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA实验步骤1）移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干以除去残余液体。2）在每一微孔中加入100ul临时配置好的酶联物。3）盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育60min。4）移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干一除去残余液体。5）如果可以的话，使用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同，使用自动置换型移液器并避免气泡产生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育60min。8）在每一微孔内加入50ulPNPP终止液以终止酶反应。轻轻振板以使溶液混合均匀。9）加终止液后60min内405nm处读取OD值。10、期望值实验结果不能当作判断任何ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值（5%-95%），建议每个实验室读确定自己的正常值范围：尿液血浆μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲肾上腺素＜20＜110＜125＜0.68本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲肾上腺素ELISAKit使用说明书（德国IBL：RE59261）1、应用范围此试剂盒可用于人血清和尿液中去甲肾上腺素的体外定量检测。2、临床意义儿茶酚胺类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织，并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中，儿茶酚胺激素及其代谢产物变肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加，因而这些激素可用于疾病的诊断。所以，这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断，当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤，用户可使用各种动物材料进行实验。所有动物的儿茶酚胺的化学结构相同，因此此试剂盒可用于测大鼠、小鼠或其它动物。3、实验原理此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定，前提是将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品：维生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ剂，还有降血压类药物。血浆（EDTA）注意血液采集后两小时内，将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸的和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6h1个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。将病人24h内的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐剂的试剂瓶中。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6个月6、试剂盒成分注意：试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分数量标志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。1×6×2.5mlCALA-F标准品A-F，即用肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲肾上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）内含[-]肾上腺素，[-]去甲肾上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2质控品1+2即用,含:[-]肾上腺素，[-]去甲肾上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.1×250μLENZCONJCONC酶联物浓缩型（100×）内含：碱性磷酸酶标记的抗体，Tris缓冲液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸亲和凝胶。1×60mlEXTRBUF提取缓冲液粉红色，即用，内含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT冻干粉内含：儿茶酚-氧位-甲基转移酶（猪肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加剂内含：人血浆，稳定剂，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲肾上腺素抗血清紫罗兰色，即用，内含：抗去甲肾上腺素抗体（兔），缓冲液，稳定剂。2×1.25mlCOENZ酶联复合物即用，内含：S-腺苷-L-蛋白酸，稳定剂。1×3mlENZBUF酶缓冲液即用，内含：Tris缓冲液，HCl，稳定剂。1×17mlRELEASEBUFRelease缓冲液黄色，即用，内含：0.1M的HCl，指示剂。1×3mlACYLREAG酰化试剂即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗涤液浓缩型（10×）内含：Tris缓冲液，HCl，吐温，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片内含：对硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP终止液即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材（但试剂盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）轨道摇床（200-900rpm）3）旋涡混合器4）带储器的8通道移液器5）洗涤瓶，自动或半自动包被板清洗系统6）酶标仪7）双蒸水或去离子水8）吸水纸，取样吸头，计时器8、实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。，下列所述体积为做48人份时所需要的量。8.1样品的稀释如果样品中去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释：样品待稀释稀释液备注血浆去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品中去甲肾上腺素的浓度双蒸水提取步骤前尿液去甲肾上腺素浓度高于Z高标准品中去甲肾上腺素的浓度0.1N的HCl提取步骤前8.2样品、标准品和质控品的提取（提取板，手动操作版）1）将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各20μL和500μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外，在所有的微孔中加入500μL双蒸水以消除体积差别。2）在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3）盖板。在轨道摇床（600-900rpm）上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中，液体的表面应该会浸湿粘性金属板，但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。5）每孔加入2ml双蒸水6）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。8）每孔加入150μL提取缓冲液，再向每孔中加入50μL酰化试剂，立即混合均匀。9）在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下提取20min。（无需盖板）10）快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。11）每孔加入2ml双蒸水。12）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。14）每孔加入300μLRelease缓冲液。15）在轨道摇床（400-500rpm）上18-25℃的环境下振荡30min。（无需盖板）已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话，您可将提取板用粘性金属板盖好，在2-8℃的环境下可存放一夜。9、实验步骤9.1COMT酶溶液的准备注意：COMT酶溶液应在使用前直接临时配置。在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶联溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*，COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合，但要避免气泡产生，配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液，则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。9.2样品、标准品和质控品的酶分化注意如果要检测肾上腺素和去甲肾上腺素，我们建议您先检测肾上腺素。如果使用自动置换型衣液器加样，请将取样吸头内的残余液体加入到提取板的相应微孔内，否则剩余的提取液不够去甲肾上腺素检测用。将提取板放到有一定坡度的位置上。实验开始前，确定好肾上腺素和去甲肾上腺素的检测孔并标记好。9.3尿液与血浆中的去甲肾上腺素1在每一微孔内加入25ul临时配制的COMT酶溶液，轻轻振板以使溶液混合均匀。2将提取好的标准品、质控品和样品分别25ul加入到相应的微孔内。在此步骤中，我们可以将取样吸头直接深入到COMT溶液里。加样后，溶液颜色变成粉色，轻轻振板以使溶液混合均匀。3向每一微孔中加入50ul去甲肾上腺素抗血清（蓝色）。4盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育120min。8.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性20ml洗涤液180ml双蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶联物6ml洗涤缓冲液（已稀释好）1：101临时配置，仅能使用一次，混合时避免气泡产生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物缓冲液临时配置，仅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA实验步骤1）移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干以除去残余液体。2）在每一微孔中加入100ul临时配置好的酶联物。3）盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育60min。4）移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300ul稀释好的洗涤液洗板4次。Z后在吸水纸上拍干一除去残余液体。5）如果可以的话，使用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同，使用自动置换型移液器并避免气泡产生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要盖板，在轨道摇床上（400-600rpm）18-25℃的环境下孵育60min。8）在每一微孔内加入50ulPNPP终止液以终止酶反应。轻轻振板以使溶液混合均匀。9）加终止液后60min内405nm处读取OD值。10、期望值实验结果不能当作判断任何ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值（5%-95%），建议每个实验室读确定自己的正常值范围：尿液血浆μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲肾上腺素＜90＜535＜600＜3.55本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

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• 多巴胺ELISA Kit使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用说明书（德国IBL：RE59161）1、应用范围此试剂盒可用于人血浆和尿液中多巴胺的体外定量检测，可手动操作，也可自动操作。进一步的研究表明：此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究。2、前言说明儿茶酚氨类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织，并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中，儿茶酚氨激素及其代谢产物间甲肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加，因而这些激素可用于疾病的诊断。所以，这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断，当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤，所以用户可使用各种各样的动物材料进行实验。如果用此试剂盒测大鼠、小鼠或其它动物，则儿茶酚氨的化学结构与动物的相同。3、实验原理此固相酶联免疫吸附实验利用的是ELISA的夹心法。微孔中包被了羊抗兔抗体。在温育时间之内，加入的溶液抗在体可直接与抗原分子上的一个表位结合。样品中的抗原与酶标二抗（可与抗原分子上的不同表位结合）在包被孔中温育。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接用标准曲线确定。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定，前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品：维生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ剂，还有降血压类药物。血浆（EDTA）注意血液采集后两小时内，将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸血和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6h1个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h内的所有尿液，之后将其加入到10-15ml6N的HCl防腐剂中。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。稳定性6个月6、试剂盒成分注意试剂盒所提供的试剂足够做96孔单孔检测或48孔双份检测。注意此包被板也可用于检测肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。数量标志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。1×6×2.5mlCALA-F标准品A-F肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲肾上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,内含:肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2质控品1+2即用,含:肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.1×250μLENZCONJCONC酶联物浓缩型（100×）内含：碱性磷酸酶标记的抗体，Tris缓冲液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸亲和凝胶。2×60mlEXTRBUF提取缓冲液粉红色，即用，内含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT冻干粉内含：儿茶酚-氧位-甲基转移酶（猪肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加剂内含：人血浆，稳定剂，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫罗兰色，即用，内含：抗多巴胺抗体（兔），缓冲液，稳定剂。2×1.25mlCOENZ酶联复合物即用，内含：S-腺苷-L-蛋白酸，稳定剂。1×3mlENZBUF酶缓冲液即用，内含：Tris缓冲液，HCl，稳定剂。4×13mlRELEASEBUFRelease缓冲液黄色，即用，内含：0.1M的HCl，指示剂。2×3mlACYLREAG酰化试剂即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗涤液浓缩型（10×）内含：Tris缓冲液，HCl，吐温，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片内含：对硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP终止液即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，内含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材（但试剂盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）轨道摇床（200-900rpm）3）旋涡混合器4）带储器的8通道移液器5）洗涤瓶，自动或半自动包被板清洗系统6）酶标仪7）双蒸水或去离子水8）吸水纸，取样吸头，计时器9）样品稀释用试管。8、手动操作8.1实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。下列所述体积为做48人份时所需要的量。注意试剂盒中的质控品和所有尿液样品在使用前都必须在试管中用0.1M的HCl按1：5的比例进行稀释（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。标准品无需稀释。8.2样品的稀释如果样品中多巴胺浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释：样品待稀释稀释液备注血浆多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度双蒸水提取步骤前尿液多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度0.1N的HCl提取步骤前8.3样品、标准品和质控品的提取（提取板）1）将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各20μL和500μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外，在所有的微孔中加入500μL双蒸水以消除体积差别。2）在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3）盖板。在轨道摇床（600-900rpm）上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中，液体的表面应该会浸湿粘性金属板，但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。5）每孔加入2ml双蒸水6）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。8）每孔加入150μL提取缓冲液，再向每孔中加入50μL酰化试剂，立即混合均匀。9）在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下提取20min。（无需盖板）10）快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。11）每孔加入2ml双蒸水。12）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。14）每孔加入300μLRelease缓冲液。15）在轨道摇床（400-500rpm）上18-25℃的环境下振荡30min。（无需盖板）已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话，您可将提取板用粘性金属板盖好，在2-8℃的环境下可存放一夜。8.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性25ml洗涤液225ml双蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶联物6ml洗涤缓冲液（已稀释好）1：101临时配置，仅能使用一次，混合时避免气泡产生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液临时配置，仅能使用一次18-25℃5h9、实验步骤（手动操作）9.1COMT酶溶液的准备注意：COMT酶溶液应在使用前直接临时配置在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶联溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*，COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合，但要避免气泡产生，配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液，则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。9.2样品、标准品和质控品的酶化注意如果使用自动置换型移液器，请将取样吸头内的残余液体加回到提取板相应的微孔内。将提取板置于一斜坡位置比较适当。科研用组织匀浆和细胞培养上清可按如下建议处理：细胞培养上清必须根据其培养基及其相应浓度进行处理：根据尿液样品的操作说明（至少提取20ul上清液），未稀释样品的灵敏度大概为1.0ng/ml。如果基质内添加了血清（FCS），血浆（至少提取500ul上清）操作的灵敏度可以是5pg/ml。无高氯酸的组织匀浆可用做匀浆样品，具体信息请咨询IBL汉堡公司。9.3检测尿液和血浆中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL刚配置好的COMT酶溶液，轻轻振荡。2在尿液样品、标准品和质控品的微孔中加入90μLRelease缓冲液（血浆样品孔除外）。将已提取好的标准品、质控品和尿液样品分别10μL加入到相应的微孔中。将100ul提取好的血浆样品加入到相应的微孔中。在此加样步骤中，可直接将取样吸头伸入到COMT溶液中。溶液颜色变成粉色，轻轻振荡。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4盖板，在振荡器（400-600rpm）上室温（18-25℃）温育120min5移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。吸水纸上拍干以除去残余液体。6在每一微孔中加入100ul临时配置好的酶联物。7盖板，在振荡器（400-600rpm）上室温（18-25℃）温育60min8移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。吸水纸上拍干以除去残余液体。9如果可以的话，使用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同，使用自动置换型移液器并避免气泡产生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振荡器（400-600rpm）上室温（18-25℃）温育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP终止液，轻轻振板以使溶液混合均匀。13加终止液后60min内405nm处读取OD值。（参考波长：620-650nm）10、自动操作步骤10.1实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。下列所述体积为做48人份时所需要的量。注意试剂盒中的质控品和所有尿液样品在使用前都必须在试管中用0.1M的HCl按1：5的比例进行稀释（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。标准品无需稀释。10.2样品的稀释如果样品中多巴胺浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释：样品待稀释稀释液备注血浆多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度双蒸水提取步骤前尿液多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度0.1N的HCl提取步骤前10.3样品、标准品和质控品的提取（提取板）1）将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各30μL和750μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外，在所有的微孔中加入750μL双蒸水以消除体积差别。2）在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3）盖板。在轨道摇床（600-900rpm）上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中，液体的表面应该会浸湿粘性金属板，但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。5）每孔加入2ml双蒸水6）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。8）每孔加入150μL提取缓冲液，再向每孔中加入50μL酰化试剂，立即混合均匀。9）在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下提取20min。（无需盖板）10）快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。11）每孔加入2ml双蒸水。12）用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上（600-900rpm）18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13）移去粘性金属板，快速弃取孔内反应液，在吸水纸上拍干。14）每孔加入450μLRelease缓冲液。15）在轨道摇床（400-500rpm）上18-25℃的环境下振荡30min。（无需盖板）已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话，您可将提取板用粘性金属板盖好，在2-8℃的环境下可存放一夜。10.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性25ml洗涤液450ml双蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶联物15ml洗涤缓冲液（已稀释好）1：101临时配置，仅能使用一次，混合时避免气泡产生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液临时配置，仅能使用一次18-25℃5h11、实验步骤（自动操作）11.1COMT酶溶液的准备注意：COMT酶溶液应在使用前直接临时配置在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶联溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*，COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合，但要避免气泡产生，配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液，则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。11.2实验步骤在使用自动方法做实验时，我们建议按1：10的比例预先稀释提取好的标准品、质控品和尿液样品（如果是手动操作则用Release缓冲液进行稀释）。如果稀释了，第二个步骤可简化为：将已提取好的血浆样品、已提取好的标准品（按1：10的比例预先稀释）、质控品和尿液样品各100μL加入到微孔中。在进行预稀释时，应当考虑到自动操作的死容积。1）在包被板的每一微孔中加入75μL刚配置好的COMT酶溶液，轻轻振荡。2）在尿液样品、标准品和质控品的微孔中加入90μLRelease缓冲液（血浆样品孔除外）。将已提取好的标准品、质控品和尿液样品分别10μL加入到相应的微孔中。在此加样步骤中，可直接将取样吸头伸入到COMT溶液中。溶液颜色变成粉色，轻轻振荡。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）盖板。在振荡器（400-600rpm）上18-25℃的环境下温育120min5）弃取孔内反应液，每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。6）每孔加入100μL酶联物7）盖板。在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下温育60min8）弃取孔内反应液，用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。9）加底物液和终止液时，其时间间隔应相同10）每孔加入200μL底物液11）在轨道摇床（400-600rpm）上18-25℃的环境下温育40min。如果自动操作时的温度超过25℃时，则应相应的将温育时间缩短至30min。12）每孔加入50μLPNPP终止液以终止底物反应，轻轻振荡包被板以充分混合试剂成分。13）加终止液后60min之内405nm处读取OD值。（参考波长：620-650nm）12、期望值实验结果不能当作判断任何ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值（5%-95%），建议每个实验室读确定自己的正常值范围：尿液血浆μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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