FluorCam叶绿素荧光成像技术应用于突变体研究

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• FluorCam叶绿素荧光成像技术应用于突变体研究

  叶绿素荧光是植物光合生理检测的重要探针，基于叶绿素荧光测量的FluorCam叶绿素荧光成像技术经过数十年的发展，在植物与藻类研究中应用广泛，已然成为光合生理、育种、环境控制研究、农业生产等众多研究方向公认的有效工具。本次摘选4篇易科泰FluorCam叶绿素荧光成像系统在不同植物基因突变体研究方面的文献分享。[详细]

  2024-09-29 00:18

  应用文章

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• FluorCam多光谱荧光成像技术应用于海洋生态学研究

  FluorCam多光谱荧光成像技术应用于海洋生态学研究[详细]

  2015-06-01 00:00

  其它

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• FluorCam 叶绿素荧光成像技术在国内的应用

  FluorCam叶绿素荧光成像技术应用案例（第四期）FluorCam叶绿素荧光成像技术在国内的应用FluorCam叶绿素荧光成像技术作为Z早实用化的叶绿素荧光成像技术，是目前世界上Zquan威、使用范围Z广、种类Z全面、发表论文Z多的叶绿素荧光成像技术。FluorCam已经发展出十几个型号，涵盖了从叶绿体、单个细胞、微藻到叶片、果实、花朵，乃至整株植物和植物灌层，几乎可以测量所有的植物样品，甚至包括含有叶绿素的微生物和动物。易科泰Ecolab生态实验室总结了FluorCam相关SCI参考文献近500篇，可联系Ecolab生态实验室（eco-lab@eco-tech.com.cn,info@eco-lab.cn）索取文献目录及全文。了解FluorCam叶绿素荧光成像技术详情请点击以下链接：FluorCam叶绿素荧光成像技术FluorCam叶绿素荧光成像技术Z早在21世纪初引进到国内，但一直到2010年后国内的科学家才在国际交流中逐渐发现这项技术的巨大价值，在短短数年中也利用这一技术发表了几十篇高水平SCI文献。本期主要介绍目前FluorCam叶绿素荧光成像技术在国内的应用情况。一、植物光合生理研究叶绿素荧光可以直接反应植物光系统的生理状况，因此从叶绿素荧光技术发明之初，就被用于各种植物光合生理研究。山东农科院使用FluorCam叶绿素荧光成像技术研究了小麦旗叶与外露花梗光合能力的差异[1]。研究中发现在小麦生长前中期，旗叶与外露花梗的Zda光化学效率Fv/Fm和量子产额ΦPSII基本相同。但在生长后期，旗叶的光合能力显著下降，而花梗光合能力的下降幅度要小于旗叶（图1）。这证明了在生长后期的灌浆期，花梗对维持籽粒的生长更为重要。之后，他们又研究了小麦叶片和颖片季节衰老过程中以及颖果发育过程中光合特性的变化[2；3，图2]。图1.不同生长阶段的旗叶（A，C）和外露花梗（B，D）的Fv/Fm（A，B）和ΦPSII（C，D）典型叶绿素荧光成像图图2.不同生长期小麦叶片和颖片的Zda光化学效率Fv/Fm（A）、量子产额ΦPSII（B）和非光化学淬灭NPQ（C）的变化二、植物生物/非生物逆境胁迫与抗逆性研究由于几乎所有种类的生物/非生物逆境胁迫都会影响到植物光合系统的正常生理功能，而叶绿素荧光技术是公认的植物逆境光合功能研究Z灵敏的无损探针。因此通过FluorCam叶绿素荧光成像技术不但能反映植物受胁迫程度和抗逆能力的差异，而且能指明胁迫影响光合系统的具体机理过程。1.养分亏缺山东农业大学使用FluorCam研究了两种玉米在不同施氮条件下光合特性的变化[4]。研究发现，施加氮肥使两个品种的Zda光化学效率Fv/Fm和量子产额ΦPSII都有所升高，而ΦPSII的升高幅度要高于Fv/Fm，表明氮肥对PSII的实际功能活性更有作用。同时玉米品种HZ4荧光参数的升高幅度也要高于Q319，这应该是由于HZ4是一种低N效率的非持绿玉米（图3）。图3.氮对两种玉米品种造成影响的叶绿素荧光成像图2.盐碱胁迫山东农业大学使用FluorCam研究发现S-adenosyl-L-methionine(SAM)基因过表达会显著增加在碱胁迫下的番茄的光合能力[5]（图4）。图4.野生型和转基因番茄叶片在碱胁迫下的Fv/Fm荧光成像图3.水分胁迫山东农科院研究了不同灌溉方式对小麦光合特性的影响[6]。研究发现比起传统的漫灌，沟灌条件下的小麦叶片有更高的Zda光化学效率Fv/Fm、量子产额ΦPSII、光化学淬灭qP和更低的非光化学淬灭NPQ（图5）。这说明沟灌给小麦提供了更好的土壤水分条件，从而使小麦叶片拥有了更强的光化学活性。图5.传统漫灌和沟灌条件下小麦的Fv/Fm、ΦPSII、qP和NPQ荧光成像图国内还有其他院校使用FluorCam开展了热胁迫、病害、重金属毒害、光质影响等多种胁迫研究[7；8；9；10]。三、植物光合基因组学与分子生物学研究植物光合作用可以说是植物对人类乃至整个生物圈Z重要的功能，一方面为其他生物直接或间接地提供能量和食物，另一方面也在地球碳氧循环中发挥关键性作用。因此，对植物光合作用功能基因的研究，一直是植物基因组学与分子生物学研究的重中之重。而叶绿素荧光能直接反映相关功能基因的表型变化，所以几乎所有与光合基因相关的研究都要用叶绿素荧光技术来进行表型筛选、基因功能验证等方面的工作。1.从光合表型到基因功能ZG科学院植物研究所张立新研究员是Z早将FluorCam叶绿素荧光成像技术引入国内的科学家。中科院植物所光生物学ZD实验室是国内植物光合基因相关研究Z前沿的科研单位。FluorCam叶绿素荧光成像技术引入后就立刻用于了光合相关基因功能与表型研究。2006年，张立新研究团队就使用FluorCam叶绿素荧光成像技术研究了拟南芥ppt1突变体光系统II光化学能力的变化，进而证明了磷酸盐转运蛋白对维持叶片生长后期正常光合作用的重要性[11]（图6）。之后，植物所张立新团队和彭连伟团队都使用FluorCam发表了多篇植物光合基因相关文献[12；13]。彭连伟在研究NADH脱氢酶复合体稳定性时[14]，发现在50molphotons/m.s的光强下，lhca5lhca6pgr5、lhca6pgr5和crr4-2pgr5拟南芥突变体都产生了生长阻滞，并表现出了高叶绿素荧光（图7A，B）。这表明了这些突变体的光合电子传递活性和NDH活性都受到了YZ。进一步分析不同光强下的ΦPSII，野生型、lhca5和lhca6突变体的ΦPSII水平是相近的，这表明Lhca5和Lhca6在光合电子传递中都不是必需的（图7C）。而lhca6pgr5和lhca5lhca6pgr5的ΦPSII水平则显著降低，通过其他结果比对发现这是由于在低光照条件下，这些突变体的PSI就受到了光YZ并出现了氧化应激反应。在后续的研究中，彭连伟团队还使用FluorCam发现了NdhV亚基对NADH脱氢酶复合体稳定性的重要作用[15]。其团队的张琳博士利用FluorCam封闭式荧光成像系统，从T-DNA插入或EMS诱变的拟南芥突变体库中筛选光合电子传递调控的突变体，并ZD研究了bfa3的功能，相关结果于2016年4月发表在国际学术期刊PlantPhysiology[16]。凭借这一科研发现，张琳博士荣获易科泰FluorCam叶绿素荧光成像论文一等奖。图6.ppt1突变体和野生型的表型和叶绿素荧光成像图图7.lhca5lhca6pgr5三突变体叶绿素荧光分析，A.可见表型；B.叶绿素荧光表型；C.ΦPSII测量国内另一个应用FluorCam技术进行光合基因研究较为出色的单位是西北农林科技大学。他们引进仪器技术虽然较晚，但在购置FluorCam开放式叶绿素荧光成像系统后很快就发表了2篇高水平文章，研究了多个关于拟南芥叶绿体发育和叶片颜色相关的基因功能[17；18]（图8）。图8.拟南芥野生型与GTPase家族基因突变株的叶绿素荧光成像图上海生命科学研究院青年研究组长、博士生导师ChanhongKim在苏黎世联邦理工学院、康奈尔大学博伊斯汤普森研究所工作期间就已经使用FluorCam叶绿素荧光成像系统进行了大量的研究工作并在PNAS、PlantCell发表多篇相关文献。2014年，ChanhongKim到上海生命科学研究院工作后立刻购置了一台FluorCam封闭式叶绿素荧光/GFP成像系统。他用这一系统一方面进行GFP表达植株的快速筛选（图9），另一方面进行单线态氧和EXECUTER1介导信号在基粒中发生过程的研究，这一Zxin研究成果发表同样在2016年PNAS上[19]。沈阳农业大学也使用FluorCam技术开展了大白菜生长缓慢、类囊体减少的突变体光和特性的研究[20]。2.从基因功能到光合表型在有的研究中，光合基因功能是通过其他方法基本上确定的。但这个基因表达出的表型是否符合预期，还是必须通过FluorCam叶绿素荧光成像技术进行光合表型方面的验证。ZG农业大学与易科泰生态技术有限公司EcoLab生态实验室合作，从黄瓜中克隆了紫黄质脱环氧化酶基因（CsVDE），再将这一基因的反义片段转基因到拟南芥中[21]。发现在高光胁迫条件下，转基因拟南芥的叶绿素荧光参数非光化学淬灭（NPQ）比野生型显著降低，这证明了CsVDE在叶黄素循环和PSII光YZ敏感性上的重要作用（图10）。图10.野生型与转基因拟南芥在高光条件下的NPQ成像图图9.使用FluorCam获得的GFP成像图，图中发出明亮颜色的拟南芥植株即为表达了GFP的植株，其颜色越偏向红色，则表明其表达的GFP更多，暗蓝色的植株即为没有表达GFP的植株四、国际合作由于FluorCam叶绿素荧光成像技术引进到国内的时间较晚，国内科学家对这一技术的运用程度还低于欧美同行。因此，很多国内的科学家目前是与国际上的知名科研院所开展合作，使用FluorCam进行研究工作并发表文章。比如浙江大学与德国康斯坦茨大学合作发表的使用FKM多光谱荧光动态显微成像系统（此系统应用了FluorCam显微成像技术，康斯坦茨大学Kupper教授和PSI公司合作完善了这一技术，是国际上对这一技术应用Z前沿的学者）研究了铜对海州香薷Elsholtziasplendens光合系统的毒害作用[22]；华中农业大学、江西农业大学与德国洪堡大学等单位合作研究了病毒介导的豌豆基因沉默对四吡咯生物合成、叶绿体发育等造成的影响[23]；内蒙古农业大学与捷克科学院等单位合作研究的芽单胞菌门含有叶绿体的稀有细菌的光合特性和相关基因研究[24；25]；江苏农科院与英国诺丁汉大学合作研究的两种病原菌对不同小麦品系的侵害性[26]等。参考文献：1.KongLA,etal.2010.Thestructuralandphotosyntheticcharacteristicsoftheexposedpeduncleofwheat(TriticumaestivumL.):animportantphotosynthatesourceforgrainfil领.BMCplantbiology10,1412.KongLA,etal.2015.Photochemicalandantioxidativeresponsesoftheglumeandflagleaftoseasonalsenescenceinwheat.FrontiersinPlantScience,6:358.doi:10.3389/fpls.2015.003583.KongLA,etal.2016.Comparisonofthephotosyntheticcharacteristicsinthepericarpandflagleavesduringwheat(TriticumaestivumL.)caryopsisdevelopment.Photosynthetica54(1),40-464.Li,G.etal.2012.Effectsofnitrogenonphotosyntheticcharacteristicsofleavesfromtwodifferentstay-greencorn(ZeamaysL.)varietiesatthegrain-fil领stage.Can.J.PlantSci.92,671-6805.Gong,B.etal.2014.OverexpressionofS-adenosyl-L-methioninesynthetaseincreasedtomatotolerancetoalkalistressthroughpolyaminemetabolism.PlantBiotechnologyJournal,12,6947086.KongLA,etal.2010.Arootzonesoilregimeofwheat:physiologicalandgrowthresponsestofurrowirrigationinraisedbedplantinginNorthernChina.AgronomyJournal102,1541627.FengB.etal.2014.EffectofHeatStressonthePhotosyntheticCharacteristicsinFlagLeavesattheGrainFil领StageofDifferentHeatResistantWinterWheatVarieties.JournalofAgronomyandCropScience200(2),1431558.周锦业，丁国昌，何荆洲，曹光球，李秀玲，卜朝阳.2015.不同光质对金线莲组培苗叶绿素含量及叶绿素荧光参数的影响.农学学报5(5)，67-729.简敏菲，汪斯琛，余厚平，李玲玉，简美锋，余guan军．2016.Cd2+?Cu2+胁迫对黑藻（Hydrillaverticillata）的生长及光合荧光特性的影响.生态学报36(6)10.郑国华,潘东明,牛先前&方树民.2010.冰核细菌对低温胁迫下枇杷光合参数和叶绿素荧光参数的影响.ZG生态农业学报18(6)，1251125511.MaJF,GuoJK,PengLW,ChenCY&ZhangLX,2006.DecreaseofphotosystemiiphotochemistryinArabidopsisppt1mutantisdependentonleafage.Journalofintegrativeplantbiology48,1409141412.SunXW,WangLY&ZhangLX,2007.InvolvementofDEG5andDEG8proteasesintheturnoverofthephotosystemIIreactioncenterD1proteinunderheatstressinArabidopsisthaliana.ChineseScienceBulletin52,1742174513.ChiW,etal.2008.ThepentratricopeptiderepeatproteinDELAYEDGREENING1isinvolvedintheregulationofearlychloroplastdevelopmentandchloroplastgeneexpressioninArabidopsis.Plantphysiology147,57358414.PengL,&Shikanai,T.2011.SupercomplexformationwithphotosystemIisrequiredforthestabilizationofthechloroplastNADHdehydrogenaselikecomplexinArabidopsis.Plantphysiology155,1629163915.FanX,etal.2015.TheNdhVsubunitisrequiredtostabilizethechloroplastNADHdehydrogenase-likecomplexinArabidopsis.ThePlantJournal,82,22123116.ZhangL,etal.2016.BiogenesisFactorRequiredForATPSynthase3FacilitatesAssemblyoftheChloroplastATPSynthaseComplex.PlantPhysiology171,1291-130617.QiY,etal.2016.APutativeChloroplastThylakoidMetalloproteaseVIRESCENT3RegulatesChloroplastDevelopmentinArabidopsisthaliana.TheJournalofBiologicalChemistry291,3319-333218.QiY,etal.2016.MutationsincircularlypermutedGTPasefamilygenesAtNOA1/RIF1/SVR10andBPG2suppressvar2-mediatedleafvariegationinArabidopsisthaliana.PhotosynthesisResearch127(3),355-36719.WangLS,etal.2016.Singletoxygen-andEXECUTER1-mediatedsigna领isinitiatedingranamarginsanddependsontheproteaseFtsH2.PNAS,DOI:10.1073/pnas.160356211320.ZhangL,etal.2016.BiogenesisFactorRequiredForATPSynthase3FacilitatesAssemblyoftheChloroplastATPSynthaseComplex.PlantPhysiology171,1291-130621.LiX,etal.2013.MolecularCloningandCharacterizationofViolaxanthinDeEpoxidase(CsVDE)inCucumber.PLoSONE8(5):1-1122.PengH,etal.2012.DifferencesincopperaccumulationandcopperstressbetweeneightpopulationsofHaumaniastrumkatangense,EnvironmentalandExperimentalBotany,79:58-6523.LuoT.etal.2013.Virus-inducedgenesilencingofpeaCHLIandCHLDaffectstetrapyrrolebiosynthesis,chloroplastdevelopmentandtheprimarymetabolicnetwork.PlantPhysiologyandBiochemistry65,172624.ZengY，etal.2014.Functionaltype2photosyntheticreactioncentersfoundintherarebacterialphylumGemmatimonadetes.PNAS,111(21),7795780025.ZengY,etal.2015.Characterizationofthemicroaerophilic,bacteriochlorophylla-containingbacteriumGemmatimonasphototrophicasp.nov.,andemendeddescriptionsofthegenusGemmatimonasandGemmatimonasaurantiaca.InternationalJournalofSystematicandEvolutionaryMicrobiology,DOI:10.1099/ijs.0.00027226.RenR,etal.2015.ComparativeaggressivenessofMicrodochiumnivaleandM.majusandevaluationofscreeningmethodsforFusariumseed领blightresistanceinwheatcultivars.EurJPlantPathol,141,281294[详细]

  2018-09-19 10:00

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• FluorCam多光谱荧光成像技术（Multi-color FluorCam）

  FluorCam多光谱荧光成像技术（Multi-color FluorCam）[详细]

  2024-09-29 11:00

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• FluorCam叶绿素荧光成像在果蔬研究方面的应用

  叶绿素荧光是植物光合生理检测的重要探针，基于叶绿素荧光测量的FluorCam叶绿素荧光成像技术经过数十年的发展，在植物与藻类研究中应用广泛，已然成为光合生理、育种、环境控制研究、农业生产等众多研究方向公认的有效工具。本次摘选5篇FluorCam叶绿素荧光成像系统在果蔬研究方面的文献分享。[详细]

  2024-09-11 17:49

  应用文章

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• 叶绿素荧光技术FluorCam叶绿素荧光成像系统

  FC00-C/1010GFP封闭式多光谱植物荧光成像系统是一个高度创新的，世界范围内广泛应用的多光谱动力学荧光成像系统。这个系统高度紧凑且可以实现测量样品的暗适应。[详细]

  2018-09-19 10:00

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• FluorCam荧光成像快讯

  FluorCam荧光成像快讯[详细]

  2024-09-15 04:11

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• Multiplex 植物多参数荧光技术与FluorCam叶绿素荧光技术

  Multiplex 植物多参数荧光技术与FluorCam叶绿素荧光技术[详细]

  2024-09-23 21:06

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• 植物表型组学研究技术（二 ） 叶绿素荧光成像与 与 B RGB

  植物表型组学研究技术（二 ） 叶绿素荧光成像与 与 B RGB[详细]

  2016-01-06 00:00

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• 植物表型组学研究技术（二） 叶绿素荧光成像与RGB彩色成像

  植物表型组学研究技术（二） 叶绿素荧光成像与RGB彩色成像[详细]

  2015-07-29 00:00

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• 福建农林 FluorCam开放式叶绿素荧光成像系统

  福建农林大学创办于1936年，是农业部、国家林业局与福建省政府共建大学，福建省ZD建设的三所高水平大学之一。其下属林学院开设的林学学科为国家林业局ZD学科、福建省首批ZD学科和福建省特色ZD学科，以杉木研究为代表特色。2016年11月18日，该学院购买的FluorCam开放式叶绿素荧光成像系统，由北京易科泰生态技术有限公司工程师安装调试、培训完毕，正式投入使用，将应用于杉木育种及抗性筛选。[详细]

  2018-09-19 10:00

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• NE900系列荧光显微镜应用于FISH 荧光成像

  荧光原位杂交技术（FISH）是病理检测分子检测技术当中的佼佼者。通过荧光显微镜观察核酸序列的方法，能够对形态和基因组结构进行非常精确的空间解析。该技术快速、易于实施，并提供出色的探针稳定性。根据所使用的探针不同，可以鉴定出特定物种的基因组、整个染色体、染色体特异性区域或单拷贝独特序列。[详细]

  2024-09-12 15:59

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• 叶绿素荧光技术

  叶绿素荧光技术[详细]

  2013-06-21 00:00

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• 一文看懂如何选配适用的叶绿素荧光成像仪器

  叶绿素荧光成像技术已成为研究植物光合生理、表型分析等的必备仪器技术，如今市面上有很多自称可以进行叶绿素荧光成像的设备，既有进口的，也有国产的，其中不乏存在一些忽悠、故弄玄虚、产品不成熟甚至存在严重缺陷并不被学术界认可（没有权威的参考文献做支撑甚至根本没有参考文献）等问题，宣传彩页或者含糊其辞、或者乱加引用其它仪器技术的参考文献图片、甚至作假图片等。如果购买了这样的仪器设备，实验成果很可能存在错误或漏洞和误导、很难在国际学术期刊上发表等问题。本文主要针对叶绿素荧光动态成像技术，就如何选配叶绿素荧光成像仪器设备问题做一简单介绍，所介绍的仪器设备都是国际上学术界普遍采用的、每年都借以发表大量文献、被学术界广泛认可的技术产品。[详细]

  2024-09-11 17:56

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• 多光谱荧光成像技术（Multi -colorFluorCam）

  多光谱荧光成像技术（Multi -colorFluorCam）[详细]

  2014-04-10 00:00

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• FluorPen 手持式叶绿素荧光仪 叶绿素荧光技术尽在掌握

  FluorPen 手持式叶绿素荧光仪 叶绿素荧光技术尽在掌握[详细]

  2015-07-29 00:00

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• 叶绿素荧光检测技术在浮游植物营养盐限制研究中的应用

  叶绿素荧光检测技术在浮游植物营养盐限制研究中的应用[详细]

  2015-01-14 00:00

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• 荧光成像

  便携式叶绿素荧光成像系统一种无损、迅速、有效的研究植物、藻类、地衣的光合作用的方法。典型样品测量原理荧光与光合作用息息相关，当光合作用状态改变时，荧光的强度也随之改变，因此，系统配备了一套LED光源板，用于改变植物光合状态和一个特殊的检测器，可迅速检测到植物发出的荧光，并在软件中赋以假彩色，Z终以图片的形式直观地展现出来。●藻类如海带、马尾藻、浒苔等●地衣、苔藓、结皮等●整株小植物如拟南芥等●植物冠层，叶片或者果实如草莓、黄瓜、小番茄、柠檬、瓜类等应用领域植物光合特性和代谢紊乱筛选生物和非生物胁迫的检测植物抗胁迫能力或者易感性研究转基因植株筛选代谢紊乱研究长势与产量评估植物微生物交互作用研究◆实验室、野外均可使用◆小巧、便携◆可自己编程参数◆带暗适应罩子、叶夹◆对样品无损伤◆高灵敏度，拍[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 叶绿素荧光测量技术产品概览

  叶绿素荧光不仅能反映光能吸收、激发能传递和光化学反应等光合作用的原初反应过程，而且与电子传递、质子梯度的建立及ATP合成和CO2固定等过程有关。是研究光合作用的探针。通过叶绿素荧光测量技术，可以快速、灵敏、准确地获得众多叶绿素荧光参数，这些参数反映植物、藻类等测量目标的光合效率。而叶绿素荧光成像则将叶绿素荧光测量代入二维成像时代。该技术已经大量应用于植物、藻类研究的各个领域，包括表型组学、遗传育种、病虫害、胁迫检测、光合生理研究、基因功能鉴定、突变体筛选、园艺研究等。 易科泰拥有一系列不同型号的叶绿素荧光测量设备，所有型号均具备完备的自动测量程序，获得上百个荧光参数及对应的荧光动力学曲线，同时具备高分辨率CCD相机的成像系统还可输出每个参数的成像图，支持测量程序自定义，满足各种用户需求。[详细]

  2024-09-12 00:37

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• FluorCam模块式植物表型成像技术方案

  FluorCam模块式植物表型成像技术方案[详细]

  2024-09-14 01:13

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