血清中25-羟基维生素D半自动SPE高通量分析方法

本文由 沃特世科技（上海）有限公司(Waters) 整理汇编

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• 血清中25-羟基维生素D半自动SPE高通量分析方法

  血清中25-羟基维生素D半自动SPE高通量分析方法[详细]

  2014-02-19 00:00

  其它

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• 一种适用于高通量分析血清中25-羟基维生素D的新型半自动

  一种适用于高通量分析血清中25-羟基维生素D的新型半自动[详细]

  2015-03-31 00:00

  应用文章

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• 25-羟基维生素D3(HVD3)ELISA试剂盒

  25-羟基维生素D3(HVD3)ELISA试剂盒[详细]

  2016-08-01 00:00

  安装说明

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• 大鼠25-羟基维生素 D3（25（OH）D3）酶联免疫分析（ELISA）

  大鼠25-羟基维生素D3（25（OH）D3）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中25-羟基维生素D3（25（OH）D3）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠25-羟基维生素D3（25（OH）D3）水平。用纯化的大鼠25（OH）D3抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入25（OH）D3，再与HRP标记的25（OH）D3抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的25-羟基维生素D3（25（OH）D3）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠25-羟基维生素D3（25（OH）D3）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：27μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为18μg/L，12μg/L，6μg/L，3μg/L，1.5μg/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1μg/L20μg/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月www.biokanu.com[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 特价大鼠25-羟基维生素D3酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  本试剂盒仅供研究使用。大鼠25-羟基维生素D3酶联免疫分析试剂盒检测范围：96T0.8μg/L-24μg/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中25-羟基维生素D3(25(OH)D3)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠25-羟基维生素D3(25(OH)D3)水平。用纯化的大鼠25-羟基维生素D3(25(OH)D3)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入25-羟基维生素D3(25(OH)D3)，再与HRP标记的25-羟基维生素D3(25(OH)D3)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的25-羟基维生素D3(25(OH)D3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠25-羟基维生素D3(25(OH)D3)浓度。试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。大鼠25-羟基维生素D3酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。大鼠25-羟基维生素D3酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 25羟基维生素D ELISA试剂盒说明书

  【产品名称】通用名称：25羟基维生素D检测试剂盒英文名称：25-HydroxyVitaminDELISAKit【包装规格】96人份/盒【预期用途】仅供体外诊断使用。25羟基维生素D检测试剂盒（酶联免疫法）是一种酶联免疫测定，用于定量测定人血清或血浆中的25羟基维生素D和其他羟基化代谢物。结果应与其他临床和实验室数据相结合，以辅助临床医师对成人维生素D缺乏的评估。【概要说明】1.维生素D是一个常用于与脂溶性类固醇衍生物紧密相关的家族的总称。在阳光照射下，位于表皮中生长活跃层深处的7-脱氢胆固醇经“B”链的光裂解生成维生素D3前体，即维生素D3异构体。维生素D3和维生素D2也可通过饮食补充获得且来自于有限的食物数量。维生素D2与维生素D3的代谢方式类似。2.维生素D存在于脂肪组织当中，与维生素D结合蛋白（VDBP）和白蛋白结合进入循环系统。在肝脏中，维生素D羟化为25羟基维生素D，仍与VDBP结合进行循环。一小部分25-OHD在甲状旁腺激素和核钙离子水平的直接调节下在肾脏中进一步羟化，形成有生物活性的钙调节素1,25双羟基维生素D。维生素D进一步羟化和代谢产生水溶性和易分泌的复合物。3.肝脏维生素D25羟化酶活性未能紧密调节，且皮肤中维生素D3的改变或维生素D（D3或D2）的摄取将取决于25-OHD循环水平的改变（1）。4.血清25羟基维生素D浓度被认为是测定全面维生素D状态的Z可靠的指标，因而可用于测定患者是否出现维生素D缺乏（2）。维生素D状态的评估可用于确定导致患者血清钙浓度异常的原因。[详细]

  2024-09-29 12:22

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• 维生素D的测定方法

  维生素D的测定方法[详细]

  2013-12-21 00:00

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• SPE和HPLC方法检测血清中的类药物

  SPE和HPLC方法检测血清中的类药物[详细]

  2024-09-29 07:31

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• SPE和HPLC方法检测血清中的三环抗抑郁药

  SPE和HPLC方法检测血清中的三环抗抑郁药[详细]

  2012-12-21 00:00

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• SPE和HPLC方法检测血清中的抗惊厥药药物

  SPE和HPLC方法检测血清中的抗惊厥药药物[详细]

  2012-12-21 00:00

  标准

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• SPE和HPLC方法检测血清中的抗生素(磺胺类药物)

  SPE和HPLC方法检测血清中的抗生素(磺胺类药物)[详细]

  2024-09-22 19:40

  课件

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• SPE和HPLC方法检测血清中的非甾体KY药

  SPE和HPLC方法检测血清中的非甾体KY药[详细]

  2024-09-29 09:37

  安装说明

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• SPE和HPLC方法检测血清中的抗惊厥抗焦虑药物

  SPE和HPLC方法检测血清中的抗惊厥抗焦虑药物[详细]

  2024-09-30 00:03

  专利

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• SPE和HPLC方法检测血清中的抗溃疡药

  SPE和HPLC方法检测血清中的抗溃疡药[详细]

  2024-09-23 22:47

  其它

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• 食品中维生素 D 含量检测的固相萃取方法（Copure® Silica）

  食品中维生素 D 含量检测的固相萃取方法（Copure® Silica）[详细]

  2021-12-13 14:11

  应用文章

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• SPE和HPLC方法检测血清中的抗生素(头孢菌素类)药物

  SPE和HPLC方法检测血清中的抗生素(头孢菌素类)药物[详细]

  2024-09-28 10:05

  标准

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• SPE和反相LC-MS方法检测血清样品中的西米替丁雷尼替丁

  SPE和反相LC-MS方法检测血清样品中的西米替丁雷尼替丁[详细]

  2024-09-28 13:34

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• SPE和HPLC方法检测血清中的支气管扩张药(代谢物)

  SPE和HPLC方法检测血清中的支气管扩张药(代谢物)[详细]

  2024-09-23 21:10

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• 婴幼儿乳品中维生素 A、D、E 的测定

  婴幼儿乳品中维生素 A、D、E 的测定[详细]

  2016-09-13 00:00

  专利

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• GB5009.82-2016食品中维生素A、D、E的测定

  本标准规定了食品中维生素A、维生素E和维生素D的测定方法。本标准**法适用于食品中维生素A和维生素E的测定。本标准第二法适用于食用油、坚果、豆类和辣椒粉等食物中维生素E的测定。本标准第三法适用于食品中维生素D2和维生素D3的测定。本标准第四法适用于配方食品中维生素D2或维生素D3的测定。新光智源AIC80基于液相色谱法，采用目前国际先进的专用荧光检测器，可准确检测粮油、食品、酒水、油脂等产品中B1,B2，G1，G2，M1含量，具有准确、可靠、快速、易操作等优点。[详细]

  2018-08-17 10:00

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