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:中药LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
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:中药LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
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:中药LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
- :中药LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究[详细]
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2014-09-05 00:00
标准
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中药LN 对复合方式所致大鼠脂肪肝的药效学研究
- 目前认为,非酒精性脂肪性肝脏病,包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、脂肪性肝硬化3种类型。随着社会经济发展,非酒精性脂肪性肝脏病患病率越来越高。氧应激和脂质过氧化是非酒精性脂肪性肝炎形成的一个重要发病机制,而且有研究表明是隐源性肝硬化的重要原因[1],已成为人类健康的三大疾病之一,并与失代偿期肝硬化、肝功能衰竭、原发性肝癌的发生密切相关[2]。祛肝脂合剂由大黄、山豆根、山楂、枸杞、蜂蜜等组成,有扶正祛邪、化痰祛湿、HX化瘀、补肾益肝之功。[详细]
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2024-09-18 18:08
应用文章
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大鼠层粘蛋白(LN)说明书
- 大鼠层粘蛋白(LN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,细胞上清及相关液体样本中层粘蛋白(LN)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠层粘连蛋白(LN)水平。用纯化的大鼠层粘连蛋白(LN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入层粘连蛋白(LN),再与HRP标记的LN抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠层粘连蛋白(LN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠层粘连蛋白(LN)的含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:360μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240μg/L,160μg/L,80μg/L,40μg/L,20μg/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:10μg/L-300μg/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月www.biokanu.com[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改进
- 大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改进[详细]
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2014-08-19 00:00
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2024-09-15 08:59
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2024-09-29 09:56
选购指南
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中药注射剂研究的技术要求
- 为了提高中药注射剂的研制水平,加强研制的指导和管理,使其达到安全、有效、可控、稳定的要求,促使研制工作进一步规范化、科学化和标准化,除执行《ZG药典》现行版制剂通则注射剂项下有关规定及《新药审批办法(1999年)》(以下简称《办法》)中有关规定外,针对中药注射剂的特点,特制定本技术要求。一、中药注射剂的研制应根据临床急、重症等用药需要及LX明显优于其它给药途径者为原则。二、中药注射剂在新药审批管理中,属于中药新药**或第二类范围,因此其申报资料项目、相关的技术要求和管理规定等均按相应类别要求进行。注射剂的小水针、粉针剂、大输液互相改变,而不改变给药途径的属四类新药。原剂型上市前未按二类新药技术要求作过临床研究的,该新药临床试验要求同二类新药。原剂型上市前、曾按二类新药技术要求作过临床研究的,新药临床试验先按四类新药要求进行Ⅱ期临床试验,然后申请试生产,试生产期间需进行Ⅳ期临床试验。三、研制中药注射剂的单位必须具备相应的技术力量和设备条件。四、(一)应体现源于中医药,发展中医药的原则。(二)应以中医药理论、文献古籍、临床经验或现代有关研究成果等资料来阐述选题目的与依据。药味宜少而精。(三)中药注射剂的组份可以是有效成分、有效部位、单方或。除中的药材可以是省、自治区、直辖市药品标准外,其它组份必须符合国家药品标准。省、自治区、直辖市药品标准收载的药材,应按《办法》中《新药(中药材)申报资料项目》要求附第2、10、11项资料及省药品监督管理部门的批准件(复印件);如组份未制订标准,则须按相应类别报送有关资料,并随制剂一起上报审五、制备工艺(一)制备工艺的研究应按《中药新药制备工艺研究的技术要求》进行,结合注射给药的特点和要求,通过不同方法的研究比较,选出合理、先进的制备工艺。(二)以有效成分或有效部位为组份的注射液,须详细写明该有效成分或有效部位的制备工艺全过程,列出与质量有关的关键技术条件和试验数据,说明确定该工艺的理由,或提供国家药品标准;以净药材为组份的注射液,应该用半成品配制,并制定其内控质量标准,符合要求方可投料。供配制注射液用的原料(有效成分、有效部位)或半成品,在提取、纯化过程中可能引入有害有机溶剂者,应作有害有机溶剂残留量检查。检查方法按现行版《ZG药典》《有机溶剂残留量测定法》测定。(三)中药注射剂中如确需要加入附加剂,应审慎选择,并应有充分的试验依据。所用的附加剂均应符合YY标准,并遵照《办法》中的有关要求申报。(四)注射剂的溶剂、容器等均应符合YY要求,制备工艺中与药物接触的器具及有关材料,均不得与药物发生反应或产生异物。六、药理和毒理按《中药新药药理毒理研究的技术要求》及本技术要求附件一《有关安全性试验项目及要求》的有关规定进行。七、临床按《中药新药临床研究的技术要求》中的有关规定进行。八、理化性质研究(一)注射剂的理化性质研究系指对中的各组份和Z终成品进行与质量有关的物理性质和化学性质方面的研究,包含文献资料和试验研究二方面的内容。因注射剂给药途径的特殊性,所以必须注意各有关方面的因素,从多个环节全面综合考虑,尤其应对未测定部份进行深入研究,并提供研究资料。(二)为保证临床用药安全有效,要求注射剂的主要成分必须基本清楚,多个主要成分之间的比例应相对稳定。......详细内容请见附件[详细]
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2018-09-13 10:00
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- 不同表面活性剂体系对去血渍复合酶活性的影响研究[详细]
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2014-07-31 00:00
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2024-09-20 13:34
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2013-12-11 00:00
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玻璃化转变对中药喷雾干燥产品质量的影响
- 中药无定形基质的三种力学形态
无定形聚合物随着温度的升高可依次体现玻璃态(Glass State,又称无定形态、非晶态)、
高弹态、粘流态三种力学状态,玻璃态和高弹态间的转变称为玻璃化转变(Glas[详细]
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2024-12-25 09:38
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2010-08-04 00:00
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2018-11-13 15:46
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2015-08-21 00:00
专利
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- 使用针对临床研究的复合模式SPE和亲水作用色谱(HILIC)对[详细]
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2015-07-06 00:00
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QCM-D对高分子材料的研究
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2024-09-15 06:10
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2024-09-24 01:48
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玻璃化转变对中药喷雾干燥制备产品质量的影响
- 玻璃化转变并非高聚物特有的,比如食品中的糖类、脂类、蛋白质等就是常见的无定形基质。[详细]
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2024-09-11 18:03
其它
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现代色谱技术在中药研究中的应用进展
- 现代色谱技术在中药研究中的应用进展[详细]
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2010-04-23 00:00
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