植物磷脂酶D（Phospholipase D）总水解活性酶

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

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• 植物磷脂酶D（Phospholipase D）总水解活性酶

  主要用途植物磷脂酶D（PhospholipaseD）总水解活性酶连续循环比色法定量检测试剂是一种旨在通过磷脂酶D、脂酶、甘油-3-磷酸氧化酶和过氧化酶酶连续反应系统中产生的红色产物醌亚胺染料，在分光光度仪下峰值的，即采用比色法来测定植物组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解萃取样品中磷脂酶D的总水解活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景磷脂酶（phospholipase），是一种脂质水解酶，催化磷脂的水解，产生脂肪酸和其它亲脂产物，参与磷脂代谢。磷脂酶家属有四种类型亚酶，包括A、B、C和D。磷脂酶A（phospholipaseA；PLA）主要水解磷脂sn-1（磷脂酶A1催化）和sn-2（磷脂酶A2催化）位置上的乙酰基；磷脂酶B（phospholipaseB；PLB）同时水解磷脂的sn-1和sn-2位置上的乙酰基，又称为溶血磷脂酶（lysophospholipase）；磷脂酶C（phospholipaseC；PLC）在磷酸基前水解，释放二酰基甘油（diacylglycerol；DAG）和第二信使分子三磷酸肌醇（inositoltriphosphate）；磷脂酶D（phospholipaseD；PLD；EC3.1.4.4）在磷酸基后水解，释放磷脂酸（phosphatidicacid）。植物磷脂酶D，属于异源性酶（heterogeneousenzyme）家属成员，与哺乳动物磷脂酶D不同，有6个异构体：α、β、γ、δ、ε和ζ：PLDα是磷脂酰肌醇4,5二磷酸（phosphatidylinositol4,5-bisphosphate；PIP2）-非依赖性的Z常见的植物PLD酶，而PLDβ和PLDγ是磷酸磷脂酰肌醇辅因子（polyphosphoinositidecofactor）依赖性；PLDγ在氨基酸序列同源性和生化特性上类似于PLDβ；PLDδ为膜相关性，游离油酸（oleicacid）可以激活。PLD通过催化磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine；PC）、磷脂酰甘油（phosphatidylglycerol；PG）、磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine；PS）和磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine；PE）上磷酸二酯键（phosphodiester）的水解，产生磷脂酸和游离头端基团（freeheadgroup）；磷脂酸作为信号分子，进一步水解为二酰基甘油，与跨膜信号功能、亚细胞结构质膜的降解和重构等有关。同时通过转移磷脂基团到原生醇类的羟基上的磷脂转移活性（transphosphatidylation）。PLD及其催化产物参与了植物组织对于环境应急反应，例如创伤、寒冷、干旱缺水、盐化高渗透压等。基于底物磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺，在磷脂酰肌醇4,5二磷酸和油酸的辅助下，通过磷脂酶D的作用，水解产生为磷脂酸和各种基团后，通过脂酶（lipase）、甘油-3-磷酸氧化酶（glycerol-3-phosphateoxidase）和过氧化酶（peroxidase）系统，测定红色产物醌亚胺染料（quinoneiminedye）的峰值变化（500nm波长），来定量分析磷脂酶D的总水解活性。磷脂酶D连续循环反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 植物磷脂酶D（PLD）ELISA试剂盒使用说明书

  植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物磷脂酶D(PLD)水平。用纯化的植物磷脂酶D(PLD)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入磷脂酶D(PLD)，再与HRP标记的磷脂酶D(PLD)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷脂酶D(PLD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物磷脂酶D(PLD)浓度。植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液40ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液20ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液10ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液5ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。植物磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• D/A采集器

  SAR D/A系列产品实现主机RS-485/232接口信号隔离转换成标准模拟信号，用以控制远程设备。SAR D/A系列产品可应用在 RS-232/RS-485总线工业自动化控制系统，4-20mA，0-5V，0-10V等标准信号输出，用来控制工业现场的执行设备，控制设备以及显示仪表等等。[详细]

  2024-09-13 21:05

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• ASTM D 6272-2008

  ASTMD6272-2002(2008)未增强和增强塑料和电绝缘物料的挠曲性能试验方法四点法ASTMD6272详细描述了强化与强化塑料和电子绝缘材料使用从薄片，平板或铸造剪切下来的方型棒的四点弯矩挠曲特性测试条件。相关仪器设备：上海可程式恒温恒湿试验机厂家价格恒温恒湿试验箱上海恒温恒湿试验箱温湿度交变试验箱[详细]

  2018-09-04 10:00

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• ASTM D 5083-2010

  ASTMD5083-2010使用等截面试样测定增强热固塑料拉抻特性的试验方法请保留以下网址：www.xycxie.comwww.xycxie.cnwww.xycxie.net内有更多相关行业试验标准，均提供供免费下载学习和应用，并在不断更新中！相关仪器设备：上海恒温恒湿试验箱厂家价格上海冷热冲击试验机厂家温度冲击试验箱价格上海换气式老化试验箱厂家价格[详细]

  2018-09-04 10:00

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• D 143-94 介绍

  ASTMD143-94---------免费下载!公司主营产品：冲击试验机,电子wan能试验机,薄膜冲击,塑料球压痕硬度计,材料试验机,电子拉力试验机,液压wan能试验机,电压击穿试验仪,维卡热变形温度测定仪,熔体流动速率测定仪（指数仪）,落镖（落锤；落球）冲击,泡沫落球回弹仪,液晶冲击,压力,剪切剥离试验机,硬度计,熔融指数仪,耐电压试验仪,简支梁冲击,摆锤冲击,拉力试验机,悬臂梁冲击,冲片机,缺口制样机,哑铃制样机,wan能制样机,泡沫压线硬度测定仪,纸箱压力试验机,安全帽冲击,泡沫拉伸试验机,马丁耐热,塑料滑动摩擦,薄膜摩擦系数,非标试验机吉林华洋仪器产品网上展览华洋试验机产品网：http://www.huayangyq.com华洋仪器展览网：http://www.huayangyq.net华洋仪器化工网：http://www.huayangyq.cn华洋仪器百业网：http://www.jlhyyq.cn华洋产品尽在网上展相关产品说明请浏览。[详细]

  2018-09-16 10:00

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• C\D\E

  HAAKE产品C\D\E系列详细介绍[详细]

  2024-09-28 00:31

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• 酶水解酪素,91079-40-2

  酶水解酪素,91079-40-2英文名称：CaseinEnzymaticHydrolysate说明：可用于各类培养基的配制。别名：N-Z-AmineACAS#：91079-40-2外观：浅黄色粉末特性：生物来源：牛奶氮分析：约为6.5%氨基，约为13.1%总含氮量溶解性：溶于水，参考浓度100mg/ml。储存条件：室温干燥保存酶水解酪素,91079-40-2C8210-100100g酶水解酪素,91079-40-2C8210-250250g[详细]

  2019-01-02 10:00

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• 真菌酵母β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒

  真菌/酵母细胞β1，3-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途真菌/酵母细胞β1，3-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂是一种旨在通过β1，3-D-葡聚糖合成酶反应系统中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖，与荧光染料结合产生荧光峰值的变化，来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌或酵母细胞株裂解悬液中β1，3-D-葡聚糖合成酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，具有高通量特点。技术背景真菌/酵母细胞壁结构具有丰富的糖蛋白外层和碳水化合物内层，包括（1,3）-β-D，（1,6）-β-D和（1,3）-α-D-葡聚糖（glucan）。其中（1,3）-β-D为主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶（1,3-β-D-glucansynthase；GS；EC.2.4.1.34），又称为尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖：1,3-β-葡萄糖基转移酶（UDP-glucose：1,3-β-glucosyltransferase），催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖（UDP-glucose）为底物，通过1,3-β链接聚合为葡聚糖的反应，构成真菌/酵母细胞壁结构中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖，为细胞生长所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有两种结构体：1个调节亚体，GTPaseRho1p和4个催化亚体，Bgs1p－4p或Fksp。（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶成为抗真菌药物，例如卡泊芬净（caspofungi）等的靶标。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下，聚合成（1,3）-β-D－葡聚糖产物，与苯胺蓝（Anilineblue；4,4-（carbonyl-bis（benzene-4,1-diyl）-bis-（imino）-bis-benzenesulfonicacid）反应产生复合物，呈现荧光峰值的变化（激发波长400nm，散发波长460nm），由此定量测定β1，3-D-葡聚糖合成酶的活性。产品内容裂解液（ReagentA）毫升强化液（ReagentB）毫升缓冲液（ReagentC）毫升底物液（ReagentD）微升终止液（ReagentE）微升反应液（ReagentF）毫升稀释液（ReagentG）微升标准液（ReagentH）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里；反应液（ReagentF）避免光照；终止液（ReagentE）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月1[详细]

  2018-11-08 10:00

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• KR-COD(D)-2操作手册

  日本Kyoritsu KR-COD(D)-2型COD(低浓度)水质简易测定器[经济包] 操作手册[详细]

  2018-06-29 23:14

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• 样本 D系列培养箱

  D系列生化培养箱外壳采用冷轧薄钢板喷塑，内胆采用优质不锈钢板，保温材料采用聚苯乙烯泡沫板及玻璃棉。D系列光照培养箱外壳采用冷轧钢板，内胆采用不锈钢板，保温材料采用聚苯乙烯泡沫板及玻璃棉。[详细]

  2018-09-01 10:00

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• EX-BN 20-01Z-3G/D技术参数

  EX-BN20-01Z-3G/D带电缆铝外壳长寿命104mmx52mmx47mm非接触工作原理1干簧管根据操动磁铁和型号，操动距离Zda到50mm螺丝连接EX认证[详细]

  2018-11-14 10:00

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• D系列SMC磁性开关

  我公司代理日本SMC全系列产品，欢迎广大新老客户来电咨询订购！D系列SMC磁性开关SMC磁性开关日本SMCSMC代理SMC报价为了能尽快准确的给您提供服务，请发传真至021-33518515同时注明张小姐收，谢谢合作、[详细]

  2018-11-14 10:01

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• SQUARE D接触器8910DPA63V14

  SQUARED接触器8910DPA63V14特价直销直销天水交流接触器cjx4-d接触器_品质优_型号全接触器（Contactor）狭义上是指能频繁关合、承载和开断正常电流及规定的过载电流的开断和关合装置。它应用于电力、配电与用电。接触器广义上是指工业电中利用线圈流过电流产生磁场，使触头闭合，以达到控制负载的电器。接触器由电磁系统（铁心，静铁心，电磁线圈）触头系统（常开触头和常闭触头）和灭弧装置组成。在电工学上，因为可快速切断交流与直流主回路和可频繁地接通与大电流控制（某些型别可达800安培）电路的装置，所以经常运用于电动机做为控制对象也可用作控制工厂设备电热器工作母机和各样电力机组等电力负载，接触器不仅能接通和切断电路，而且还具有低电压释放保护作用。接触器控制容量大，适用于频繁操作和远距离控制。是自动控制系统中的重要元件之一。　　在工业电气中，接触器的型号很多，电流在-1000A的不等，其用处相当广泛。产品技术参数：1、额定电压（1）接触器铭牌额定电压是指主触点上的额定电压。通常用的电压等级为：直流接触器：110V，220V，440V，660V等档次。交流接触器：127V，220V，380V，500V等档次。如某负载是380V的三相感应电动机，则应选380V的交流接触器。（2）额定工作电压额定工作电压是与额定工作电流共同决定接触器使用条件的电压值，接触器的接通与分断能力、工作制种类以及使用类别等技术参数都与额定电压有关。对于多相电路来说，额定电压是指电源相间电压(即线电压)。另外，接触器可以根据不同的工作制和使用类别规定许多组额定工作电压和额定电流的数值。例如：CJ10-40型交流接触器，额定电压为220V时可控制电动机为11kW，额定电压为380V时可控制电动机为20kW。（3）额定绝缘电压额定绝缘电压是与介电性能试验、电气间隙和爬电距离有关的一个名义电压值，除非另有规定，额定绝缘电压是接触器的Zda额定工作电压。在任何情况下，额定工作电压不得超过额定绝缘电压。2、额定工作电流（1）主触头额定工作电流根据额定工作电压、额定功率、额定工作制、使用类别以及外壳防护型式等所决定的保证接触器正常工作的电流值。（2）辅助触头额定工作电流辅助触头额定工作电流是考虑到额定工作电压、额定操作频率、使用类别以及电寿命而规定的辅助触头的电流值，一般不大于。（3）使用类别使用类别是根据接触器的不同控制对象在运行过程中各自不同的特点而规定的。不同使用类别的接触器对接通、分断能力以及电寿命的要求是不一样的。SQUARED接触器展示产品详细介绍如下：主要信息隐藏产品类型DefinitePurposeContactor额定电流[In]60A电机功率5hp115VAC1相10hp230VAC1相30hp460VAC3相30hp575VAC3相25hp230VAC3相极数3P回路触点类型3NO控制回路电压24VAC50/60Hz补充信息隐藏产品认证CECSA经UL认证Lockedrotorratedcurrent360A277VAC300A460VAC240A575VAC额定工作电压[Ue]600VAC相数3相电气连接Quickconnectterminals产品系列DPA[详细]

  2024-09-15 20:17

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• WAK-COD(D)-2操作手册

  日本Kyoritsu WAK-COD(D)-2型COD(低浓度)水质简易测定器 操作手册[详细]

  2024-09-17 03:42

  操作手册

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• Combination of click chemistry and sulfonamides to d

  Combination of click chemistry and sulfonamides to d[详细]

  2015-02-13 00:00

  操作手册

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• ASTM D 1781-1998产品样册

  ASTM D 1781-1998产品样册[详细]

  2016-10-20 09:59

  期刊论文

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• D系列PH计使用说明

  D系列PH计使用说明[详细]

  2014-01-14 00:00

  课件

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• 维生素D的测定方法

  维生素D的测定方法[详细]

  2013-12-21 00:00

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