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细胞NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

2018-11-18 10:00 763阅读次数

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主要用途细胞NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂是一种旨在使用化学发光分子光泽精受到NADPH氧化酶催化产生的超氧阴离子O2-的还原,然后在其还原过程中释放能量,由此测定样品中特异性氧化还原酶(oxidoreductase)的活性,即采用发光探测仪(Luminometer)测定其相对冷光单位(RLU)的变化,以此进行测算酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞样品(动物或人体)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)的特异活性检测。用于免疫、血液研究、蛋白组学、病理生理学等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景NADPH氧化酶,通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphateoxidase;NADPHoxidase;EC1.6.3.1)或还原型辅酶II氧化酶,是机体防御机制中的重要元素。NADPH氧化酶由6个亚体构成:RhoGTP酶(Rhoguanosinetriphosphatase)和5个phox(吞噬细胞氧化酶;phagocyticoxidase)。其中主要包含细胞膜嵌合蛋白质分子(gp91phox、p22phox、flavocytochromeb558等),以及位在细胞质内的蛋白质分子(p47phox、p67phox、p40phox、Rac1、Rac2等)。其Z特征性的酶活性是超氧化物歧化酶敏感的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶。细胞膜上的NADPH氧化酶被激活,将还原型辅酶Ⅱ(NADPH)转变为氧化型辅酶Ⅱ(NADP),氧分子则获得电子形成超氧阴离子O2-,由O2-又可生成H2O2和OH-。其超氧阴离子产物具有杀死微生物的功能。NADPH氧化酶异常将导致慢性肉芽肿病(ChronicGranulomatousDisease;CGD)。基于底物NADPH,受到NADPH氧化酶的催化作用,产生超氧阴离子O2-,进而超氧阴离子将化学发光分子光泽精(lucigenin)还原,并释放能量,通过发光探测仪(Luminometer;470nm波长)检测,来测定NADPH氧化酶的活性。其反应方式为:

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