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激素六项之卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书
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2018-11-14 10:00 1342阅读次数
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1288)1、应用范围DRG公司的卵泡刺激素酶免试剂盒可用于血清中FSH(卵泡刺激素)的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。2、前言说明FSH和LH两者密切的控制着性腺组织的生长和的繁殖活动,性腺组织通过负反馈的构效关系合成和分泌雄性激素和雌性激素。FSH是垂体前叶嗜碱细胞分泌的一种糖蛋白。下丘脑产生的促性腺激素释放激素(GnRH)可控制垂体前叶FSH的释放。和其它糖蛋白一样,如:LH、TSH和HCG,FSH由两个亚单位组成,分别为α和β。这种类型的激素其α亚单位在结构上都非常类似,因此每一激素的生物学和免疫学活性主要依赖于其β亚单位的独特性。在女性中,FSH直接作用于粒细胞的受体而刺激卵泡的生长和成熟;从而增加卵泡类固醇激素的分泌和LH的产生。产生的LH之后结合到卵泡膜细胞上并刺激类固醇的分泌。在接近卵泡成熟时,卵巢内雌二醇的水平就开始增加,于是雌二醇的刺激作用可增加FSH受体的活性和FSH卵泡性结合。因此,在女性中,FSH、LH和雌二醇密切相连促进卵巢的发育和成熟。在绝经后、阉割和卵巢早衰的情况下,FSH的水平会表现为提高。通过雌激素的调节(雌激素表现的是一种负反馈机制),FSH的水平可能会变得规范化。FSH和LH、FSH和雌激素之间关系的不正常与神经性食欲缺乏症和多囊卵巢并相关联。当FSH随机抽样的浓度超过10mIU/mL时表明患有卵巢衰竭疾病的这一观点,人们对此存在着明显的异议。男性中,生精小管的发育和精子发生的维持同样会受到FSH的调节。然而和雌激素不一样,雄性激素并不会降低FSH的水平,因此它仅与血清LH之间表现为负反馈的关系。因为对FSH还不是完全了解,但人们发现精子稀少的男性通常FSH水平会提高。如通过放免检测得到的结果:睾丸癌一般会降低血清FSH浓度,而提高LH浓度。因此人们推测:LH浓度的明显增加可能是通过与由睾丸癌分泌的hCG样物质的交叉反应所造成的。在原发性睾丸功能障碍和克氏综合征男性患者中,我们可发现高浓度的FSH水平。FSH浓度的提高同样也出现在饥饿、肾功能衰竭、甲状腺功能亢进和肝硬化的情况下。3、实验原理DRG公司的FSH酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合FSH分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性FSH的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗FSH抗血清。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中FSH的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中FSH的浓度成正比。4、试剂盒成分1)微量反应板,1块(96孔),微孔中包被了抗FSH的单克隆抗体。2)酶联物,1ml,内含抗辣根过氧酶标记的抗FSH抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)标准系列,6支(冻干粉),即:0,5,10,20,50,100mIU/ml,转换系数:1ng/ml=0.34mIU/ml。5)终止液:0.5M的H2SO4,,6ml5、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)标准水箱5)蒸馏水6、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂,酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开,其免疫活性在6周内稳定,但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。7、样品的采集1)静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清,避免溶血。2)必须盖住样本并在实验之前于2-8℃下可贮存48小时。样品需要更长的贮存时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。注意:用于此试剂盒的样品不能含有任何添加剂。8、试剂的准备参考标准:在冻干的标准品中加入1.0ml双蒸水。注意:配制好了的标准品可在2-8℃下稳定存放2个月。想要存放更长时间应当将其冻存于-20℃的环境下。9、一般注意事项1)实验开始前,将所有试剂和样本都平衡至室温,试剂混合时避免起泡。2)实验一旦开始,所有的步骤应完整地进行下去。3)每一样品的取样都得使用新的取样吸头。4)吸光度与温育时间和温度有关,在实验开始后所有的试剂都应准备好,以保证加液时间的一致。5)本试剂盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之间(室温22℃,显色10分钟以内)。如果ZdaOD值高于您酶标仪的上限或低于1.000,则相应的减少或延长显色反应的温育时间。一般情况下,酶免反应的强度与时间和温度成线性,这使得操作者应当适当的调整物理化学环境。10、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将黄体生成素标准系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中,每一样品都得使用新的取样吸头。3)加100μl的抗FSH酶联物于各孔中。4)混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5)室温温育(22℃)30分钟。6)弃去孔内的反应液。7)用蒸馏水洗板5次。8)在吸水纸上把板拍干。9)依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。10)室温(22℃)温育10分钟。11)按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。12)10分钟内在450nm波长读吸光度。11、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值(mIU/ml)进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。根据自己的实际经验或计算机的功能,也可以采用其它的归纳方法进行计算。4)任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。12、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果:样本FSH范围(mIU/ml)男性2.010女性卵泡期2.010循环中期7.020黄体期2.0--10绝经后女性20100-------------------------------------------------------------------------------灵敏度:Z小检测卵泡刺激素浓度,1mIU/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431
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激素六项之卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1288)1、应用范围DRG公司的卵泡刺激素酶免试剂盒可用于血清中FSH(卵泡刺激素)的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。2、前言说明FSH和LH两者密切的控制着性腺组织的生长和的繁殖活动,性腺组织通过负反馈的构效关系合成和分泌雄性激素和雌性激素。FSH是垂体前叶嗜碱细胞分泌的一种糖蛋白。下丘脑产生的促性腺激素释放激素(GnRH)可控制垂体前叶FSH的释放。和其它糖蛋白一样,如:LH、TSH和HCG,FSH由两个亚单位组成,分别为α和β。这种类型的激素其α亚单位在结构上都非常类似,因此每一激素的生物学和免疫学活性主要依赖于其β亚单位的独特性。在女性中,FSH直接作用于粒细胞的受体而刺激卵泡的生长和成熟;从而增加卵泡类固醇激素的分泌和LH的产生。产生的LH之后结合到卵泡膜细胞上并刺激类固醇的分泌。在接近卵泡成熟时,卵巢内雌二醇的水平就开始增加,于是雌二醇的刺激作用可增加FSH受体的活性和FSH卵泡性结合。因此,在女性中,FSH、LH和雌二醇密切相连促进卵巢的发育和成熟。在绝经后、阉割和卵巢早衰的情况下,FSH的水平会表现为提高。通过雌激素的调节(雌激素表现的是一种负反馈机制),FSH的水平可能会变得规范化。FSH和LH、FSH和雌激素之间关系的不正常与神经性食欲缺乏症和多囊卵巢并相关联。当FSH随机抽样的浓度超过10mIU/mL时表明患有卵巢衰竭疾病的这一观点,人们对此存在着明显的异议。男性中,生精小管的发育和精子发生的维持同样会受到FSH的调节。然而和雌激素不一样,雄性激素并不会降低FSH的水平,因此它仅与血清LH之间表现为负反馈的关系。因为对FSH还不是完全了解,但人们发现精子稀少的男性通常FSH水平会提高。如通过放免检测得到的结果:睾丸癌一般会降低血清FSH浓度,而提高LH浓度。因此人们推测:LH浓度的明显增加可能是通过与由睾丸癌分泌的hCG样物质的交叉反应所造成的。在原发性睾丸功能障碍和克氏综合征男性患者中,我们可发现高浓度的FSH水平。FSH浓度的提高同样也出现在饥饿、肾功能衰竭、甲状腺功能亢进和肝硬化的情况下。3、实验原理DRG公司的FSH酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合FSH分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性FSH的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗FSH抗血清。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中FSH的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中FSH的浓度成正比。4、试剂盒成分1)微量反应板,1块(96孔),微孔中包被了抗FSH的单克隆抗体。2)酶联物,1ml,内含抗辣根过氧酶标记的抗FSH抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)标准系列,6支(冻干粉),即:0,5,10,20,50,100mIU/ml,转换系数:1ng/ml=0.34mIU/ml。5)终止液:0.5M的H2SO4,,6ml5、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)标准水箱5)蒸馏水6、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂,酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开,其免疫活性在6周内稳定,但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。7、样品的采集1)静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清,避免溶血。2)必须盖住样本并在实验之前于2-8℃下可贮存48小时。样品需要更长的贮存时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。注意:用于此试剂盒的样品不能含有任何添加剂。8、试剂的准备参考标准:在冻干的标准品中加入1.0ml双蒸水。注意:配制好了的标准品可在2-8℃下稳定存放2个月。想要存放更长时间应当将其冻存于-20℃的环境下。9、一般注意事项1)实验开始前,将所有试剂和样本都平衡至室温,试剂混合时避免起泡。2)实验一旦开始,所有的步骤应完整地进行下去。3)每一样品的取样都得使用新的取样吸头。4)吸光度与温育时间和温度有关,在实验开始后所有的试剂都应准备好,以保证加液时间的一致。5)本试剂盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之间(室温22℃,显色10分钟以内)。如果ZdaOD值高于您酶标仪的上限或低于1.000,则相应的减少或延长显色反应的温育时间。一般情况下,酶免反应的强度与时间和温度成线性,这使得操作者应当适当的调整物理化学环境。10、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将黄体生成素标准系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中,每一样品都得使用新的取样吸头。3)加100μl的抗FSH酶联物于各孔中。4)混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5)室温温育(22℃)30分钟。6)弃去孔内的反应液。7)用蒸馏水洗板5次。8)在吸水纸上把板拍干。9)依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。10)室温(22℃)温育10分钟。11)按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。12)10分钟内在450nm波长读吸光度。11、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值(mIU/ml)进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。根据自己的实际经验或计算机的功能,也可以采用其它的归纳方法进行计算。4)任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。12、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果:样本FSH范围(mIU/ml)男性2.010女性卵泡期2.010循环中期7.020黄体期2.0--10绝经后女性20100-------------------------------------------------------------------------------灵敏度:Z小检测卵泡刺激素浓度,1mIU/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之孕酮(PRG)ELISA 试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮(PRG)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1561)1、前言孕酮是一种类固醇激素,含21个碳原子,在C-3上连有酮基,在C-4与在C-5之间为双键连接。该类固醇激素是一种女性性激素,与雌激素共同在月经周期中调节附属的器官,它对于胚细胞着床前的子宫内膜增生状态和维持孕期是特别重要的。在非孕期妇女怀孕的胎盘成为主要来源。极少数来源于两性的肾上腺皮质。孕酮在循环血中主要与皮质类固醇结合蛋白(CBG),性激素结合蛋白(SHBG)和白蛋白结合,仅有循环总浓度的2-10%是游离激素。根据月经循环周期血孕酮浓度范围很宽,在卵泡期可以低于1ng/ml(3.2nmol/L),在黄体期达到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天达到Z高水平保持4-6天,在月经开始前24小时降至排卵前的水平,因为孕酮的升高和降低与卵巢卵泡和黄体的活动相对应,因此血浆孕酮的测定在临床上常用来证明排卵和非孕妇女的黄体功能正常。假如排卵没有发生,黄体则没有生成进而孕酮升高的循环也不能见到,异常的孕酮分泌与经前期紧张子宫内膜异位症痛经和黄体不全有关。孕酮浓度不仅个体之间有差异,而且同一个人每天甚至每个小时都会不同,一般的在妇科内分泌紊乱或异常妊娠为了恰当的解释病因连续测定比单个测定更有意义。在孕期孕酮更多的由胎盘产生,血浆水平在这个时期稳定在200ng/ml的水平。2、实验原理DRG公司的孕酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合孕酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性孕酮的病人样本与辣根过氧酶标记的孕酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中孕酮的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中孕酮的浓度成反比。3、试剂盒成分1)预包被反应板,12条X8孔,96孔,微孔中包被了单克隆的抗孕酮抗体。2)标准品系列,7支,1ml,浓度:0;0.3;1.25;2.5;5;15;40ng/ml,转换系数:1ng/ml=3.18nmol/ml,内含0.3%的Proclin防腐剂,3)酶联结物,1支,25ml,辣根过氧酶标记的孕酮,内含0.3%的Proclin防腐剂。4)底物液,1支,25ml,TMB5)终止液,1支,14ml,内含0.5M的H2SO46)浓缩洗涤液(40X),1支,30ml.注:用于样品稀释的零标准品应视需要而定。4、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前,将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液:在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释,稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备此实验中要使用到血清或血浆(EDTA-,肝素血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含叠氮钠的样品不能用于此实验中。7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放24个小时。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、实验步骤:1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)室温温育5分钟。4)在每一微孔中加入200μL酶联物。5)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。6)室温孵育60分种。7)快速弃去孔内反应物,每孔用400μL蒸馏水洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。8)在每一微孔中加入200μl底物液。9)室温孵育15分种。10)加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。11)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中孕酮浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的孕酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:正常女性:卵泡期0.2-1.4ng/ml黄体期425ng/ml绝经期0.11ng/ml正常男性:0.11ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之 泌乳素(PRL) ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4泌乳素(PRL)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA1291)1、实验原理DRG公司的泌乳素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合泌乳素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性泌乳素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗泌乳素抗血清。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中泌乳素的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中泌乳素的浓度成正比。2、试剂盒成分1)微量反应板,1块(96孔),微孔中包被了抗泌乳素的单克隆抗体。2)酶联物,11ml,辣根过氧酶标记的泌乳素抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)标准系列,6支(冻干粉),浓度:0;5;20;50;100;200ng/ml转换系数(1ng/ml=21.1mUI/mL)5)终止液,0.5M的H2SO4,6ml3、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)标准水箱5)蒸馏水6)计时器4、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂,酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开,其免疫活性在2个月内稳定,但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。5、样品的采集1)静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清,避免溶血。注意:此试剂盒只能使用没用任何添加剂的样品。2)必须盖住样本并在实验之前于2-8℃下可贮存48小时。样品需要更长的贮存时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。注意:用于此试剂盒的样品不能含有任何添加剂。6、试剂的准备参考标准:在冻干的标准品中加入1.0ml双蒸水。注:配制好了的标准品可在2-8℃下稳定存放2个月。想要存放更长时间应当将其冻存于-20℃的环境下。7、一般注意事项1)实验开始前,将所有试剂和样本都平衡至室温,试剂混合时避免起泡。2)实验一旦开始,所有的步骤应完整地进行下去。3)每一样品的取样都得使用新的取样吸头。4)吸光度与温育时间和温度有关,在实验开始后所有的试剂都应准备好,以保证加液时间的一致。5)本试剂盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之间(室温22℃,显色10分钟以内)。如果ZdaOD值高于您酶标仪的上限或低于1.000,则相应的减少或延长显色反应的温育时间。一般情况下,酶免反应的强度与时间和温度成线性,这使得操作者应当适当的调整物理化学环境。8、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将黄体生成素标准系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中,每一样品都得使用新的取样吸头。3)加100μl的抗泌乳素酶联物于各孔中。4)混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5)室温温育(22℃)30分钟。6)弃去孔内的反应液。7)用蒸馏水洗板5次。8)在吸水纸上把板拍干。9)依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。10)室温(22℃)温育10分钟。11)按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。12)10分钟内在450±10nm波长读吸光度。9、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值(mIU/ml)进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。根据自己的实际经验或计算机的功能,也可以采用其它的归纳方法进行计算。4)如果样本的浓度高于Z高浓度的标准品的浓度或者浓度>200ng/ml,则需要进行稀释,任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果:性别平均值(ng/ml)S.D.(ng/ml)5%(ng/ml)95%(ng/ml)男性6.445.500.9420.94女性14.275.882.3925.15灵敏度:Z小检测出的泌乳素浓度为0.35ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之睾酮(TES)ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睾酮(TES)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1559)1、前言DRG公司的睾酮酶免试剂盒可用于人血清和血浆中睾酮的定量检测。此试剂盒仅供体外诊断用。睾酮(17β-羟基-4-雄烯-3-烷)是一种19C的类固醇激素,它在C-4和C-5间含一个不饱和键,C-3位置有一个酮基,C-17的β位上有一个羟基。此类固醇激素的分子量为288.47。睾酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中,睾酮主要由睾丸的间质细胞分泌;在女性中,处于循环中的睾酮50%来源于外周雄烯二酮的转换,25%来源于卵巢,25%来源于肾上腺。睾酮负责男性第二性征的形成,检测睾酮浓度有助于评价性腺机能减退的状态。在女性中,在很多疾病中睾酮的浓度都很高,如:多毛症,女子男性化,多囊卵巢症,卵巢癌,肾上腺癌和肾上腺增生。而在男性中,高水平的睾酮通常与下丘脑垂体疾病、睾丸癌、先天性肾上腺增生和前列腺癌有关。在患下列疾病的病人体内,通常可发现睾酮水平很低:垂体机能减退症、克氏综合征、睾丸女性化综合征、睾丸切除术、隐睾病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、实验原理DRG公司的睾酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合睾酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性睾酮的病人样本与辣根过氧酶标记的睾酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中睾酮的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中睾酮的浓度成反比。3、试剂盒成份1)预包被反应板,12×8孔,包被板上包被了单克隆的鼠抗睾酮抗体。2)标准品系列,共7支,1.0ml/支,浓度:0;0.2;0.5;1;2;6;16ng/ml。转换系数:1ng/ml=3.467nmol/l。3)酶联结物,1支,25ml,内含辣根过氧酶标记的睾酮。4)底物/显色剂,1支,25ml,内含TMB。5)终止液,1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。6)浓缩洗涤液(40X),1支,30ml。注意:用于样品稀释的零标准品因视需要而定。4、实验所需材料(但试剂盒不提供)1)标准移液器2)酶标仪3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂盒的储存与稳定性未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备洗涤液的准备吸取40×浓度的洗涤液30mL用1170mL的蒸馏水混合定容至1200mL,稀释好的洗涤液在室温能保存2周7、样品在此实验中将用到血清或血浆(EDTA-,肝素-或柠檬酸血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含有叠氮化钠的样本不能使用7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、一般注意事项1)所有试剂和样本在使用之前必须平衡至室温。所有试剂必须摇匀但不能起泡沫。2)一旦检测开始,所有的操作步骤必须进行到底不能中断。3)为了避免交叉放映,每一标准品、质控品和样品的取样都必须使用新的取样吸头。4)吸光度值是由孵育的时间和温度所决定的。在实验开始之前,建议准备好所有的药剂旋开盖子。5)将所需检测的微孔板条固定在板架上等。这些准备工作将确保每次的加液步骤所需时间相同,没有中断。按一般的规律,酶免反应的强度与时间和温度成线性比例。9、实验步骤:1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶联物。4)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。5)室温孵育60分种。6)快速弃取孔内反应物,每孔用400μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)在每一微孔中加入200μl底物液。8)室温孵育15分种。9)加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。10、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。11、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一次明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的睾酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之 雌二醇 (E2) ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4雌二醇(E2)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA2693)1、前言说明E2是一种含一个酚A环的18C类固醇激素。此类固醇激素的分子量为272.4,它是人体中Z有效的雌激素,主要由女性卵巢的格拉芬卵泡和胎盘产生,少量由肾上腺和男性睾丸产生。E2(雌二醇)被分泌到血液中,在血液中有98%的雌二醇会结合到性激素结合蛋白上,有的还会结合到其它血清蛋白上(如血清白蛋白),只有很少一部分以游离形式存在。雌激素的活性会受到雌二醇受体符合物的影响,此符合物可在靶位并在核酸水平上引发相应的反应。这些靶位包括:卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、下丘脑、垂体和敏感稍低的肝脏与皮肤。在月经周期正常的未怀孕女性体内,雌二醇的分泌遵循着一种循环模式,在排卵前有两个明显的高峰期。高浓度的雌二醇可在垂体水平发挥正反馈作用,它会影响垂体促性腺激素的分泌,如卵泡刺激素和黄体生成素,前者是卵泡成熟所必要的,后者是排卵形成所必要的。排卵后,雌二醇水平迅速下降直到黄体细胞被激活,结果雌二醇水平出现第二次高峰,并在黄体阶段达到一平衡述评。在怀孕期间,母体血清雌二醇的水平会极度的增加,并且会超过排卵前的峰值,而且在整个孕期维持在高水平上。血清雌二醇的检测是评价各种月经功能障碍的一个有效指标,例如女性早熟和晚熟,原发性、续发性闭经和绝经症。据报道,女性化综合征、男子女性型乳房和睾丸癌患者的血清雌二醇水平会升高。在不孕患者体内,血清雌二醇的检测有利于监测药物ZL(如克罗米酚柠檬酸盐、促黄体生成素释放激素或外源性促性腺激素)后排卵的感应情况。在因为体外受精而引起的卵巢过度刺激综合征患者中,每天监测血清雌二醇浓度以便为hCG的管理和卵母细胞的采集提供**时间。2、检测原理:DRG公司的雌二醇酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合雌二醇分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性雌二醇的病人样本与辣根过氧酶标记的雌二醇竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中雌二醇的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中雌二醇的浓度成反比。3、试剂盒成分:1)包被板,12×8(可拆),96孔,微孔中包被了抗雌二醇的兔单克隆抗体。2)标准品:7支1.0ml/支。分别含量为:0;25;100;250;500;1000;2000pg/ml。(1pg/ml=3.67pmol/L)3)酶联结物:1支,25ml,内含辣根过氧化物酶标记的雌二醇。4)底物液:1支,内含,14ml,内含TMB5)终止液:1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接触终止液,以免造成刺激皮肤和着烧皮肤。6)洗涤液(40×),1支,30ml注:用于样品稀释的零标准品视需要而定。4、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)微量移液器和吸嘴25μl、100μl、200μl。3)坐标纸。4)去离子水。5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前,将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液:在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释,稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、实验步骤:所有的标准品、样品和质控品都做双份检测以保证所有的检测条件都相同。1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶联物。4)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。5)室温孵育120分种。6)快速弃去孔内反应物,每孔用400μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)在每一微孔中加入100μl底物液。8)室温孵育15分种。9)加50μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算:1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的雌二醇ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:人群5-95%男性10-36pg/ml女性绝经期前绝经期后13-191pg/ml11-65pg/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之黄体生成素(LH)ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1289)1、应用范围DRG公司的LH酶联免疫吸附试剂盒可用于血清中黄体生成素(LH)的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。2、前言说明在受到下丘脑释放的黄体生成素释放激素(LH-RH或者Gn-RH)的影响下,男性和女性的垂体前叶都可以产生LH(黄体生成素)。在男性中,LH也叫做促间质细胞激素(ICSH),它是一种分子量大约为30000道尔顿的糖蛋白。它是由两条不同的氨基酸链通过非共价键结合形成的复合物,一条α链,一条β链。α链与在人促甲状腺激素(TSH)、卵泡刺激素(FSH)和人绒毛膜促性腺激素中找到的α链糖蛋白类似。这些激素的不同主要是由于他们β链的氨基酸组成不同所造成的,这也使它们产生了不同的免疫学功能。男性中LH的分泌是间歇性的,它的基本功能是刺激间质细胞(莱迪希细胞)分泌睾酮。妇女体内LH浓度的变化会受到正常月经复杂排卵循环的影响,这也依赖于沿性腺-下丘脑-垂体轴的一系列激素活动。排卵前孕酮和雌二醇水平的降低启动了每一个月经周期。随着激素水平的降低,下丘脑就增加促性腺激素释放激素(GnRF)的分泌,它可依次刺激垂体增加FSH的生产和分泌。增加的FSH水平在卵泡阶段可刺激一些卵泡的成熟,其中的一个卵泡就会成熟为含卵子的卵泡。随着卵泡的发育,雌二醇就开始分泌,刚开始时很慢,但经过12或13天的正常循环后它就开始迅速增加。因为垂体的直接刺激和增加的GnRF和FSH水平,雌二醇的就开始迅速增加,随之LH就开始释放了。而这些事件正好组成了排卵前期。在LH达到Z高水平后,排卵作用大约会持续12到18个小时。排卵后就会形成可分泌孕酮和雌激素(这两种激素是LH的两个反馈调节物)的黄体。黄体期迅速的紧随排卵期而来,黄体期明显表现为高孕酮水平,雌二醇第二增加,低LH和FSH水平。低LH和FSH水平是沿下丘脑-垂体轴雌二醇和孕酮负反馈反应的结果。受孕后,胚胎的发育可产生hCG,hCG使得黄体继续产生孕酮和雌二醇。如果没有受孕,黄体就会退化,相应的孕酮和雌二醇水平就会降低,从而导致了月经的形成。随着这些激素低激素水平的形成,下丘脑就又再次开始一月经周期患性腺机能退减的病人,其血清LH的浓度会增加。由于卵巢的发育不成熟、原发性的卵巢功能衰竭、多囊卵巢疾病或绝经等原因,女性体内类固醇激素的分泌会减少,而且在这些情况下,LH的分泌没有受到调节。在男性中,但睾丸发育不正常或存在无睾畸形时,也同样会失去调节激素。在原发性睾丸衰竭和克氏综合征患者中,尽管在雄性激素持续分泌的情况下LH浓度没有必要提高,但我们也可发现其体内存在着高浓度的LH。在肾衰竭、肝硬化、甲状腺功能亢进和严重饥饿的情况下,LH的浓度也可出现提高。垂体前叶激素的分泌不足也可能导致低LH水平。正如人们所预测的,低LH水平可能导致男性和女性不育。虽然LH的低水平在垂体前叶对GnTH刺激反应失效的情况下也会出现,但由于下丘脑GnRH分泌的降低,LH的水平就有可能降低。因此低LH水平可表明垂体或下丘脑存在功能障碍,但具体的问题根源必须通过其它实验确定。在下丘脑、垂体或性腺功能障碍的鉴别诊断中,LH浓度的检测常与FSH一起进行检测(以为两者的功能紧密相连)。此外,激素的水平也可用来确定是否绝经、计算排卵时间和监测内分泌治LX果。3、实验原理DRG公司的LH酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合LH分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性LH的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗LH抗血清。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。辣根过氧化物酶符合物的总量与样本中LH的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中LH的浓度成正比。4、试剂盒组成:1)微量反应板,1块(96孔),包被了抗LH的单克隆抗体。2)标准系列:6支,冻干,1ml,浓度:0,10,20,40,100,200mIU/ml3)酶联物,1支,11ml,辣根过氧酶标记的抗LH抗血清,0.3%的Proclin作为防腐剂。4)底物液,14ml(TMB)5)终止液:1支,0.5MH2SO4,14ml,避免接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。用于样品稀释的零标准品应视需要而定。5、实验所需器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪2)极ng确移液器,25;50;100μl.3)蒸馏水4)吸水纸5)计时器6)半对数纸6、储存条件未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂,酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开,其免疫活性在6周内稳定,但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。7、试剂准备实验开始前,将所有试剂和所需数目的板条都平衡至室温。标准品:在每支冻干粉的标准品中加入1.0ml蒸馏水重新配置标准品。注意:配制好的标准品在2-8℃的环境下可稳定存放2个月,要想存放更长的时间则应冻存于-20℃的环境下。8、样品此实验将用到血清,请不要使用易溶血、黄疸血和脂血样品,注意:含叠氮钠的样品不可用于此实验。8.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝固,室温离心分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人可能需要更长的凝血时间。8.2样品储存实验开始前应用盖子将样品密封好,2-8℃下可存放48小时。如果将样品冻存于-20℃的环境下则可将其存放更长时间(只可冻融1次)。解冻的样本在实验之前必须要上下倒置几次。8.3样品的稀释:在**次实验中,样本浓度高于Z高标准品的样品应当在实验前用零缓冲液进行稀释。在计算浓度时,应当把此稀释因子考虑进去。例子:a)按1:10稀释:10μL的血清+90μL的零缓冲液(充分混合)。b)按1:100稀释:10ul稀释好的a)+90μL的零缓冲液(充分混合)。9、实验步骤所有的标准品、样品和质控品都必须做双份检测以保证它们的检测条件都一样。每次检测都必须有一条标准曲线。1)将所需数目的板条置于板架上。2)将标准品、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中,每次都得使用新的取样吸头。3)加100μl的抗LH酶联物于各孔中。4)混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5)室温温育(22℃)30分钟。6)弃去孔内的反应液。用蒸馏水洗板5次(每孔400ul),在吸水纸上把板拍干以除去残余液体。注意:洗板步骤是否正确会明显影响实验的灵敏度和精密度。7)依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。8)室温(22℃)温育10分钟。9)按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。10)加终止液后10分钟内在450nm波长读吸光度。10、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值(mIU/ml)进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:说明书上的结果是用四参数计算得到的,其它的归纳方法可能会给出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中LH浓度高于Z高标准品的必须进行进一步的稀释,任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。11、正常值强烈建议每个实验室都确定自己的正常值范围和不正常值范围。用DRG公司的LHELISA试剂盒对明显健康人群进行一研究,得到如下结果:人群LH(mIU/ml)成年女性卵泡和黄体期≤20黄体生成素峰20-200女性绝经后20-100男性3-12本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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促卵泡生成激素(FSH)放免试剂盒说明书
- 核准和修改日期:2007年08月20日碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析药盒说明书碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析药盒说明书【药品名称】通用名:碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析药盒英文名:Iodine[125I]HumanFollicleStimulatingHormoneRadioimmunoassayKit汉语拼音:Dian[125I]Renculuanpaoshengcheng极suFangshemianyifenxiYaohe【成分】规格成分100管50管制品状态1)FSH标准品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液体2)125I-FSH(红色)1瓶1瓶冻干品3)兔抗-FSH抗体(蓝色)1瓶1瓶冻干品4)驴抗兔免疫分离剂1瓶(50ml)1瓶(25ml)液体5)FSH质控血清2瓶(每瓶1ml)2瓶(每瓶1ml)液体【性状】液体组分(免疫分离剂除外)应澄清,无沉淀或絮状物;冻干组分应呈疏松状,复溶后应无沉淀或絮状物。【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I],其物理半衰期(T1/2)为60天。【临床意义】促卵泡生成激素(FollicleStimulatingHormone,FSH)是由垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种糖蛋白激素,其蛋白部分由204个氨基酸构成α和β两个亚基,α亚基与LH、TSH和HCG相同,只有β亚基具有特异的结构,两者通过非共价键连接,分子量为32KD。FSH在卵泡发育过程中的作用包括:促进内膜细胞的分化;促进颗粒细胞增生;促进卵泡液分泌,使卵泡及其内腔增大,同时伴有整个卵巢的增大。实验表明:卵泡发育的以上几个阶段都须有FSH的参与,而且只有当FSH与LH共同作用时,成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。对男性来说,FSH的作用是促进生精上皮细胞的发育和精子的成熟。本药盒用于血清中FSH含量的测定,对诊断男、女不孕症、性功能减退、青春期延迟、性早熟、子宫内膜异位等疾病有非常重要的意义。对作用于下丘脑-垂体-性腺轴的女性避yun药的临床药理研究也有很大价值。【测定原理】应用均相竞争原理,标准或样品中的FSH和加入的125I-FSH共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫结合反应。125I-FSH与抗体的结合量与标准或样品中FSH的含量呈一定的函数关系。用免疫分离试剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,并计算相应结合率B/B0。用已知FSH标准含量与对应结合率作图,即得标准曲线。从标准YZ曲线上查知对应结合率的待测样品中FSH的含量。【适用仪器】适用于各类γ-放射免疫分析仪。【样本要求】取静脉血分离血清,待测;如不立即测量,可将样本密封后,置于2~8℃或-20℃储存备测,2~8℃保存不应超过48小时,-20℃保存不超过1个月。【用法用量】1试剂配制、使用方法和保存FSH标准品:液体,直接使用,标准浓度分别为0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。标准2~8℃保存,42天内稳定;未开盖的标准品2~8℃保存,标识的有效期内稳定。125I-FSH:冻干品,用蒸馏水溶解,100管10ml溶解,50管5ml溶解。如一次加样超过100管,两瓶混合后使用。标记物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃保存,标识的有效期内稳定。兔抗-FSH抗体:冻干品,用蒸馏水溶解,溶解方法见封底。同次实验抗体加样超过100管时,两瓶溶解后混合使用。抗体溶解后2~8℃保存可稳定42天,冻干品-20℃保存有效期内稳定。驴抗兔免疫分离剂:液体,直接使用,但加样前必须摇匀!2~8℃保存,有效期内稳定。开封后Z多稳定45天。若加样超过100管,两瓶混合后摇匀。FSH质控血清:使用方法,保存条件,有效期及附值,详见质控血清使用说明书。2测定步骤取圆底聚苯乙烯试管若干,用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0-S6和待测样品管等,然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂(尤其分离剂!)包括待测样品要摇匀,并且**平衡到室温。操作程序表单位:μl管别试剂NSB管S0~S6管待测样品管质控管FSH标准品300(S0)200待测样品200FSH质控血清200125I-FSH100100100100兔抗-FSH抗体100100100混匀,任取三管测总T,36-38℃温育16~24小时驴抗兔免疫分离剂500500500500充分摇匀后,室温放置15分钟,3500转/分钟离心15分钟,吸弃上清,测各沉淀管的放射性计数(cpm)。3数据处理联机处理:由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,处理软件也不一样,用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用log-logit或四参数数据处理模式。手工作图或计算器处理:百分结合率计算:设S0管计数为B0,各标准管或样品管计数为B,非特异管计数为NSB,则百分结合率计算公式为B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式为logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作图:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标,对应的B/B0为纵坐标在log-logit坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意:如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是Z后的浓度值。3.2.4计算器处理:使用有线性拟合功能的计算器,可以比较方便地计算出样品浓度值,具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。3.3标准曲线举例(仅供参考,不得用于实际计算)。浓度单位mIU/ml项目NSB02.55102550100百分结合率(%)B/TB/B02.24584.877.762.536.421.911.4Log-logit数据处理模式主要曲线参数A=2.82B=-2.41R=-0.9995ED75=5.21=14.8ED25=42.3【参考正常值】正常人血清参考值:男性:2.012mIU/ml(n=60)女性:2.515mIU/ml(n=98)滤泡早期:3.510.0mIU/ml黄体期:3.09.0mIU/ml绝经期:14120mIU/ml(n=17)由于地区及使用仪器不同,所测的正常值会存在一定的差异,所以本说明书提供的正常值仅作参考。各实验室**能建立符合本实验室要求的正常值范围。【产品性能指标】标准范围:2.5100mIU/ml灵敏度:<1.0mIU/ml精密度:批内变异系数(CV)<10%;批间变异系数(CV)<15%。使用期限:见产品外包装。【禁忌】本品仅供体外诊断用!【注意事项】收到试剂盒后,尽快存放在2~8℃。实验前全部试剂应放置室温下平衡。吸弃上清液时,注意不得损失沉淀物,否则将明显影响测定结果。不同试剂盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用。药盒请在有效期内使用。临床标本均应视为有潜在传染性,请按传染病实验室规程操作。使用本药盒应注意放射防护,放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。使用本品的操作人员应经过专业技术培训。【贮藏】2~8℃保存。【有效期】1个月。【执行标准】国家食品药品监督管理局《国家药品标准》,国家药典委员会编2005年5月,WS1-(R-64)-2004Z。抗体溶解方法:兔抗-FSH抗体:用蒸馏水溶解,100管产品每瓶抗体加ml,50管产品抗体每瓶加ml(如不填写,50管药盒用5ml溶解,100管药盒用10ml溶解,若为液体抗体请直接使用)。[详细]
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2018-11-24 10:00
产品样册
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鸽子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书
- 鸽子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书[详细]
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2015-03-12 00:00
实验操作
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犬促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书
- 犬促卵泡素(FSH)试剂盒(ELISA)使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中犬促卵泡素(FSH)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被犬促卵泡素(FSH)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的犬促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0mIU/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:0.25mIU/mL8mIU/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1mIU/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2018-11-16 10:01
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人促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒使用说明书
- 人促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒使用说明书仅供研究使用。检测范围:0.5U/L-16U/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中促卵泡素(FSH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人促卵泡素(FSH)。用纯化的人促卵泡素(FSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再与HRP标记的促卵泡素(FSH)抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人促卵泡素(FSH)浓度。1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过(HRP)活性。人促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用配液:将30倍浓洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静重复5次,拍干。30秒后弃去,如此加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒使用说明书计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验。8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。人促卵泡素(FSH)Elisa试剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2024-09-29 07:33
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猴子促卵泡素(FSH)elisa试剂盒使用说明书
- 猴子促卵泡素(FSH)elisa试剂盒使用说明书[详细]
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2024-10-08 05:24
标准
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猪促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒说明书
- 猪促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中猪促卵泡素(FSH)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪促卵泡素(FSH)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:24、12、6、3、1.5、0.75mIU/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。[详细]
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2024-09-15 14:31
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羊促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒说明书
- 检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被促卵泡素(FSH)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。[详细]
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2018-09-03 10:00
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鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒说明书
- 鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡促卵泡素(FSH)水平。用纯化的鸡促卵泡素(FSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再与HRP标记的促卵泡素(FSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡促卵泡素(FSH)浓度。鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶2酶标试剂3ml×1瓶8标准品(16U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2019-01-02 10:00
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