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胰岛素ELISA试剂盒
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本文由 深圳市科润达生物工程有限公司 整理汇编
2018-11-14 10:00 391阅读次数
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰岛素ELISA试剂盒(德国DRG:EIA2935)1、前言说明DRG公司的胰岛素酶免试剂盒可用于人血清和血浆中(加入了肝素或柠檬酸的血浆)胰岛素的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。胰岛素是调节葡萄糖代谢的主要激素,它由朗格汉氏小岛的β细胞合成分泌,并以前胰岛素的前体形式存在,前胰岛素可加工形成C肽和胰岛素。这两种激素都以等量形式分泌到门脉循环中。成熟的胰岛素分子由两条多肽链组成,A链和B链(分别21个和30个氨基酸)。这两条链通过键内二硫键而连接到一起。胰岛素的分泌主要受血浆葡萄糖浓度的影响,这种激素有一系列重要的代谢功能。它的主要功能是通过葡萄糖的运送来控制外周组织中葡萄糖的摄取和利用。胰岛素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的异生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,肾上腺素,生长激素和皮质醇)的作用中和掉。在胰岛素依赖性的糖尿病(IDDM)和其它疾病例如垂体机能减退疾病中,胰岛素的浓度会明显降低。在非胰岛素依赖性的糖尿病患者、肥胖患者、胰岛素瘤患者和一些内分泌功能紊乱(如库欣综合症和支端肥大症)患者的体内,其胰岛素的水平会上升。2、实验原理DRG公司的胰岛素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验(ELISA),反应板上的微检测孔包被有能结合胰岛素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性胰岛素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种生物素标记的抗胰岛素抗体。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。在第二次温育时,链亲和素过氧酶复合物结合到生物素化抗胰岛素抗体上,过氧酶复合物的结合量与样品中胰岛素的浓度成正比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中胰岛素的浓度成正比。3、试剂盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰岛素的单克隆抗体。2)零标准品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)标准品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶联物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠单克隆抗体。5)酶复合物:1支,7ml,即用,辣根过氧化物-链亲和素复合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)终止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,请勿接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。8)洗涤液:1瓶,30ml,40倍浓缩,见试剂准备。注意:用样品稀释的零标准品视需要而定。4、实验所需材料(但试剂盒不提供)1)酶标仪2)标准移液器3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂的储存与稳定性所有的未开启的试剂在2-8℃下储存至保质期,不要使用过期的试剂。所有开启的试剂应在2-8℃下储存。一旦打开微孔板的包装,需将其重新密封。6、样品的准备将所有的试剂和所需要的板条在使用前平衡至室温。洗涤液:用1170ml的蒸馏水稀释30ml浓缩的洗涤液,Z终得到的容积为1200ml,稀释好的洗涤液在室温下可稳定存放两个星期。7、样品的收集此ELISA试剂盒可使用血清也可使用(只有肝素或柠檬酸盐抗凝的血浆)血浆作为样品。不能使用明显溶血黄疸和脂血的样品。血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。8、样品的储存:样品盖好盖子后,可在实验前2-8℃下储存5天,要更长时间储存,应在-20℃下冻存。在开始实验前应避免反复冻融样品。9、样品的稀释:在**次实验中,要是样品的浓度高于Z高标准品,则样品应用按实验步骤所描述的10倍或100倍稀释。在计算浓度时需乘以此稀释度。例子:a)按1:10稀释:10μL的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)。b)按1:100释稀:10μL按a)稀释的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)10、实验步骤所有的标准品、质控品和样品都必须做双份检测以确保所有微孔的检测条件都一样。1)将所需数目的板条置于板架上。。2)用一次性吸嘴将标准品质控品和样品分别25μL加入相应的检测孔中。3)每孔加入25μL的酶联物。4)充分混合10秒,在此步骤中充分混合非常重要。5)室温下温育30分钟。6)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)每孔加入50μL的酶复合物。8)在室温下温育30分钟。9)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室温下温育15分钟。12)每孔加入50μL的终止液终止反应。13)在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。11、计算结果:1)计算标准品质控品和病人样品的平均吸光度。2)以吸光率为Y轴,浓度为X轴,按照从标准品中获得的平均吸光率和其相对应的浓度值,绘制一条标准曲线。3)利用样品的平均吸光率,在标准曲线上得出其相应的浓度值,4)自动方法:使用计算机三次方模式四参数模式或双对数函数的计算机程序可得到结果。5)样品的浓度可从标准曲线上直接获取。样品的浓度高于Z高标准品的浓度则需进一步稀释。在计算浓度的时候,要乘以样品的稀释倍数。下面是胰岛素ELISA的标准曲线的典型例子。标准品吸光率(450nm)零标准品(0μIU/ml)0.03标准品1(6.25μIU/ml)0.07标准品2(12.5μIU/ml)0.14标准品3(25μIU/ml)0.35标准品4(50μIU/ml)0.88标准品5(100μIU/ml)2.05参考值:建议各实验室建立自己的正常值与非正常值。在一明显正常成年人的研究中,用DRG公司的胰岛素ELISA试剂盒进行检测得到如下数值:2-25μIU/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431
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胰岛素ELISA试剂盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰岛素ELISA试剂盒(德国DRG:EIA2935)1、前言说明DRG公司的胰岛素酶免试剂盒可用于人血清和血浆中(加入了肝素或柠檬酸的血浆)胰岛素的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。胰岛素是调节葡萄糖代谢的主要激素,它由朗格汉氏小岛的β细胞合成分泌,并以前胰岛素的前体形式存在,前胰岛素可加工形成C肽和胰岛素。这两种激素都以等量形式分泌到门脉循环中。成熟的胰岛素分子由两条多肽链组成,A链和B链(分别21个和30个氨基酸)。这两条链通过键内二硫键而连接到一起。胰岛素的分泌主要受血浆葡萄糖浓度的影响,这种激素有一系列重要的代谢功能。它的主要功能是通过葡萄糖的运送来控制外周组织中葡萄糖的摄取和利用。胰岛素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的异生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,肾上腺素,生长激素和皮质醇)的作用中和掉。在胰岛素依赖性的糖尿病(IDDM)和其它疾病例如垂体机能减退疾病中,胰岛素的浓度会明显降低。在非胰岛素依赖性的糖尿病患者、肥胖患者、胰岛素瘤患者和一些内分泌功能紊乱(如库欣综合症和支端肥大症)患者的体内,其胰岛素的水平会上升。2、实验原理DRG公司的胰岛素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验(ELISA),反应板上的微检测孔包被有能结合胰岛素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性胰岛素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种生物素标记的抗胰岛素抗体。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。在第二次温育时,链亲和素过氧酶复合物结合到生物素化抗胰岛素抗体上,过氧酶复合物的结合量与样品中胰岛素的浓度成正比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中胰岛素的浓度成正比。3、试剂盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰岛素的单克隆抗体。2)零标准品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)标准品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶联物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠单克隆抗体。5)酶复合物:1支,7ml,即用,辣根过氧化物-链亲和素复合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)终止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,请勿接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。8)洗涤液:1瓶,30ml,40倍浓缩,见试剂准备。注意:用样品稀释的零标准品视需要而定。4、实验所需材料(但试剂盒不提供)1)酶标仪2)标准移液器3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂的储存与稳定性所有的未开启的试剂在2-8℃下储存至保质期,不要使用过期的试剂。所有开启的试剂应在2-8℃下储存。一旦打开微孔板的包装,需将其重新密封。6、样品的准备将所有的试剂和所需要的板条在使用前平衡至室温。洗涤液:用1170ml的蒸馏水稀释30ml浓缩的洗涤液,Z终得到的容积为1200ml,稀释好的洗涤液在室温下可稳定存放两个星期。7、样品的收集此ELISA试剂盒可使用血清也可使用(只有肝素或柠檬酸盐抗凝的血浆)血浆作为样品。不能使用明显溶血黄疸和脂血的样品。血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。8、样品的储存:样品盖好盖子后,可在实验前2-8℃下储存5天,要更长时间储存,应在-20℃下冻存。在开始实验前应避免反复冻融样品。9、样品的稀释:在**次实验中,要是样品的浓度高于Z高标准品,则样品应用按实验步骤所描述的10倍或100倍稀释。在计算浓度时需乘以此稀释度。例子:a)按1:10稀释:10μL的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)。b)按1:100释稀:10μL按a)稀释的血清+90μL的零标准品(充分摇匀)10、实验步骤所有的标准品、质控品和样品都必须做双份检测以确保所有微孔的检测条件都一样。1)将所需数目的板条置于板架上。。2)用一次性吸嘴将标准品质控品和样品分别25μL加入相应的检测孔中。3)每孔加入25μL的酶联物。4)充分混合10秒,在此步骤中充分混合非常重要。5)室温下温育30分钟。6)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)每孔加入50μL的酶复合物。8)在室温下温育30分钟。9)快速弃去检测孔中的内含物,每孔加入400μL的洗涤液洗板三次,在吸水纸上拍干以除去残余液体。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室温下温育15分钟。12)每孔加入50μL的终止液终止反应。13)在加终止液后10分钟内于450±10nm处读取OD值。11、计算结果:1)计算标准品质控品和病人样品的平均吸光度。2)以吸光率为Y轴,浓度为X轴,按照从标准品中获得的平均吸光率和其相对应的浓度值,绘制一条标准曲线。3)利用样品的平均吸光率,在标准曲线上得出其相应的浓度值,4)自动方法:使用计算机三次方模式四参数模式或双对数函数的计算机程序可得到结果。5)样品的浓度可从标准曲线上直接获取。样品的浓度高于Z高标准品的浓度则需进一步稀释。在计算浓度的时候,要乘以样品的稀释倍数。下面是胰岛素ELISA的标准曲线的典型例子。标准品吸光率(450nm)零标准品(0μIU/ml)0.03标准品1(6.25μIU/ml)0.07标准品2(12.5μIU/ml)0.14标准品3(25μIU/ml)0.35标准品4(50μIU/ml)0.88标准品5(100μIU/ml)2.05参考值:建议各实验室建立自己的正常值与非正常值。在一明显正常成年人的研究中,用DRG公司的胰岛素ELISA试剂盒进行检测得到如下数值:2-25μIU/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
产品样册
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猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒
- 猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-12 00:00
报价单
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胰岛素样生长因子ELISA试剂盒
- 胰岛素样生长因子ELISA试剂盒[详细]
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2016-03-18 00:00
专利
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大鼠胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠Insulin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Insulin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Insulin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Insulin浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Insulin浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Insulin含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Insulin检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Insulin。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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小鼠胰岛素ELISA试剂盒详细资料
- 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)浓度。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-11-15 10:03
产品样册
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猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒
- 猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 18:27
其它
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小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒
- 小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:27
操作手册
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大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒
- 大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 01:11
安装说明
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人胰岛素(INS)ELISA试剂盒
- 人胰岛素(INS)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:30
报价单
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大鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒
- 大鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-10 00:00
安装说明
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大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒
- 大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-10 00:00
操作手册
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小鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒
- 小鼠胰岛素受体(ISR-)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
标准
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人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒
- 人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒[详细]
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2015-03-18 00:00
操作手册
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大鼠胰岛素原(Proinsulin)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠胰岛素原(Proinsulin)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠Proinsulin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Proinsulin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Proinsulin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Proinsulin浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Proinsulin浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Proinsulin含量,再乘上稀释倍数。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Proinsulin检测浓度小于14pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Proinsulin。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于9.7%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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胰岛素原(PI)ELISA试剂盒说明书
- 胰岛素原(PI)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液胰岛素原(PI)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。胰岛素原(PI)ELISA试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签胰岛素原(PI)ELISA试剂盒储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照胰岛素原(PI)ELISA试剂盒中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。胰岛素原(PI)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlFT4大鼠游离甲状腺素规格:48T/96TF-TESTO大鼠游离睾酮规格:48T/96Tf-βCG大鼠游离β绒毛膜促性腺激素规格:48T/96THp-IgG大鼠幽门螺旋菌IgG规格:48T/96TINHBP大鼠YZ素结合蛋白规格:48T/96TINH-B大鼠YZ素B规格:48T/96TOSM大鼠抑瘤素M规格:48T/96TAChE大鼠乙酰胆碱酯酶规格:48T/96TAChRab大鼠乙酰胆碱受体抗体规格:48T/96TAch大鼠乙酰胆碱规格:48T/96TALDH大鼠乙醛脱氢酶规格:48T/96TADH大鼠乙醇脱氢酶规格:48T/96TGlp-1大鼠胰高血糖素样肽1规格:48T/96TAmylin大鼠胰淀素规格:48T/96TICA大鼠胰岛细胞抗体规格:48T/96TIAA大鼠胰岛素自身抗体规格:48T/96TPI大鼠胰岛素原规格:48T/96TIGFBP-4大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4规格:48T/96TIGFBP-3大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3规格:48T/96TIGFBP-2大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2规格:48T/96TIGFBP-1大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1规格:48T/96T[详细]
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2018-10-09 10:00
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猪胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒说明书
- 猪胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:3mIU/L-80mIU/L使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪胰岛素(Insulin)水平。用纯化的猪胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪胰岛素(Insulin)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160mIU/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80mIU/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40mIU/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20mIU/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10mIU/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5mIU/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-15 10:03
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人胰岛素(Ins)ELISA试剂盒说明
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Ins)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛素(Ins)水平。用纯化的人胰岛素(Ins)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Ins),再与HRP标记的人胰岛素(Ins)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素(Ins)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胰岛素(Ins)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40mIU/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20mIU/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10mIU/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5mIU/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5mIU/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。8.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-16 10:02
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大鼠胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒操作方法
- 大鼠胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒操作方法使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的大鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠胰岛素(Insulin)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(40mU/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-12-30 10:00
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人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒
- 人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 00:12
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小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒说明书
- l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠胰岛素(INS)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠胰岛素(INS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。[详细]
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2024-09-28 00:00
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