利用 NanoBRET 技术检测 p53-MDM2 蛋白相互作用

本文由 美谷分子仪器（上海）有限公司 整理汇编

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• 利用 NanoBRET 技术检测 p53-MDM2 蛋白相互作用

  利用 NanoBRET 技术检测 p53-MDM2 蛋白相互作用[详细]

  2022-03-29 13:47

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  BRET ( 生物发光共振能量转移 ) 是一种测量蛋白 - 蛋白或蛋白 - 配体相互作用的技术，涉及生物发光供体和荧光受体的相互作用。[详细]

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  多肽受体蛋白相互作用和机制高等植物多肽激素CLAVATA3(CLV3)对于植物茎端分生组织干细胞数目的维持起着极其重要的作用。过去几十年来，CLAVATA1/CLAVATA2(CLV1/CLV2)复合体被认为是CLV3多肽在细胞膜上的**受体。然而，新的假设仅仅停留在遗传学上的预测，仍然缺乏进一步的生物化学和细胞学的证据。为了更好地理解这三个可能的受体蛋白之间的相互关系，林金星研究组利用新型的活体下检测蛋白质相互作用的技术萤火虫荧光素酶互补技术(Fireflyluciferasecomplementationimagingassay,LCI)在拟南芥叶肉原生质体(Arabidopsismesophyllprotoplasts)和烟草叶片(Nicotianabenthamianaleaves)两个体系中分析了CLV1,CLV2和CRN三个受体蛋白之间的相互作用。　然而Z近的遗传学分析筛选到了一个新的受体蛋白激酶成员CORYNE(CRN)，并且发现它在CLV3信号途径中起着非常重要的作用。在一系列遗传学分析的基础上，新的CLV3信号转导通路假设被提出：即CLV1同源二聚体与CLV2/CRN异源复合体可能平行独立地介导CLV3信号。　实验结果表明：LCI技术和免疫共沉淀技术(Co-immunoprecipitationassay)都证实了CLV2在没有CLV3多肽刺激的情况下可以直接地与CRN发生相互作用;外源的CLV3多肽处理，并不会明显地影响CLV2-CRN之间的互作强度;进一步的LCI实验发现CLV1不能够与CLV2发生直接的相互作用，但能够与CRN有微弱的相互作用;除此之外，实验人员还发现CRN自身可以形成同源二聚体，而CLV1或CLV2自身不能形成同源二聚体。这些生化和细胞学结果对于新提出的CLV3平行双通路假设提供了直接的证据。Anti-ATP2c1钙离子ATP酶通道蛋白抗体规格：0.2mlAnti-phospho-ATM(Ser1981)磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体规格：0.1mlAnti-ATF6活化转录因子6抗体规格：0.1mlAnti-ATP4B氢钾ATP酶通道蛋白抗体规格：0.1mlAnti-ATP5JATP5J抗体规格：0.1mlAnti-ATP7A铜转运蛋白质α链抗体规格：0.2mlAnti-ATRN吸引素抗体规格：0.2mlAnti-phospho-ATR/ACTR(Ser428)磷酸化ATR抗体规格：0.1mlAnti-ATP7B铜转运蛋白质β链抗体规格：0.1mlAnti-ATP1b2/Na+K+ATPase钠钾ATP酶通道蛋白抗体规格：0.2mlAnti-Phospho-Na,K-ATPasealpha-1(Tyr10)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体规格：0.1mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser16)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体规格：0.2mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser23)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体规格：0.1mlAnti-ATXN1失调症蛋白1抗体规格：0.2mlAnti-phospho-ATPcitratelyase(Ser455)磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体规格：0.1mlAnti-phospho-Ataxin-1(Ser775)磷酸化失调症蛋白1抗体规格：0.1mlAnti-AVEN凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活YZ剂抗体规格：0.2mlAnti-Kir6.2ATP敏感性钾通道亚基kir6.2抗体规格：0.2mlAnti-AVPR2精氨酸加压素受体2抗体规格：0.2mlAnti-Bdkrb2/B2R缓激肽B2受体抗体规格：0.2mlAnti-Axin1轴蛋白1抗体规格：0.2mlAnei-ATX自分泌运动因子抗体规格：0.2mlAnti-AuroraA有丝分裂激酶A抗体规格：0.2mlAnti-AuroraB有丝分裂激酶B抗体规格：0.2mlAnti-AuroraC有丝分裂激酶B抗体规格：0.2ml[详细]

  2018-09-28 10:00

  产品样册

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• 采用FLIM研究细胞内蛋白的相互作用

  采用FLIM研究细胞内蛋白的相互作用[详细]

  2012-01-04 00:00

  专利

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• 人Hedgehog相互作用蛋白elisa试剂盒使用方法

  本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T50ng/L-1600ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）水平。用纯化的人Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Hedgehog相互作用蛋白（HHIP），再与HRP标记的Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）浓度。[详细]

  2018-10-01 10:00

  产品样册

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• 蛋白质相互作用组学分析技术

  蛋白质相互作用组学分析技术[详细]

  2015-04-14 00:00

  安装说明

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  2016-09-13 00:00

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  利用压力循环技术（PCT）从动物微粒体中提取蛋白[详细]

  2008-07-31 00:00

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  今天在制药和临床研究领域中对某种蛋白进行检测是整个流程中重要环节，Western Blot（蛋白免疫印迹技术）也是Z常见的蛋白检测手段，多种技术方法都可以对膜上的蛋白质进行定量检测，包括荧光法和化学发光法。[详细]

  2021-02-24 15:44

  应用文章

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  南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中大鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）水平。用纯化的大鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP），再与HRP标记的硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP）含量。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：360pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为240pg/mL,160pg/mL,80pg/mL,40pg/mL,20pg/mL）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围：15pg/mL-320pg/mL保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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  2024-09-28 12:53

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  2018-10-23 10:30

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  2024-09-28 05:15

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  2006-02-06汽车产品回收利用技术政策[详细]

  2014-07-01 00:00

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  本工作将专注于证明在反应模式SP-ICP-MS下，NexION通用池技术应用于测定纳米粒子。[详细]

  2018-08-17 10:00

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• 利用喷雾干燥技术制备酵母粉剂

  喷雾干燥因其干燥过程中温度高，一般比微生物的Z适生长温度还要高，会对微生物产 生直接破坏作用。但是与冷冻干燥相比喷雾干燥也有其优点，干燥速度快，因此效率高,成本也就降低。[详细]

  2023-09-27 09:54

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