黄曲霉毒素M1ELISA检测试剂盒操作

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• 黄曲霉毒素M1ELISA检测试剂盒操作

  黄曲霉毒素M1ELISA检测试剂盒操作检测步骤测定前须知：1.使用之前将所有试剂和所需板条回温（20～25℃）。2.使用之后立即将所有试剂及剩余的板条放置2～8℃。3.ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA操作中的要点。4.在所有的恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。操作步骤：1.将所需试剂从微孔板中取出，放置室温（20～25℃）30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。2.取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，保存于2～8℃。不要冷冻。3.洗涤工作液在使用前也需回温。4.将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。5.加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。6.小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤300ml/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。7.加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。8.加终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读每孔OD值。注意事项1.室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2.在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3.每种试剂使用前均需摇匀。4.反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。5.不要使用过了有效期的试剂盒；也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6.储存条件：试剂盒保存于2～8℃，不要冷冻，将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避光保存。7.试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8.加入显色液后，一般显色时间为15～30min。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。9.该试剂盒**反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。[详细]

  2018-10-03 10:00

  产品样册

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• 黄曲霉毒素M1检测试剂盒

  黄曲霉毒素M1检测试剂盒[详细]

  2012-08-24 00:00

  期刊论文

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• 黄曲霉毒素B1检测试剂盒

  黄曲霉毒素B1检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 01:07

  标准

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• 黄曲霉毒素B1检测试剂盒说明书

  深圳市芬析仪器制造有限公司黄曲霉毒素B1检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测谷物、饲料等样品中的黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1，AFB1），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的黄曲霉毒素B1和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗黄曲霉毒素B1抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含黄曲霉毒素B1含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中黄曲霉毒素B1的残留量。[详细]

  2018-11-03 10:00

  产品样册

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• 营养奶粉黄曲霉毒素检测

  营养奶粉黄曲霉毒素检测[详细]

  2012-11-12 00:00

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• 黄曲霉毒素M1检测卡

  黄曲霉毒素M1检测卡[详细]

  2012-08-24 00:00

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• 黄曲霉毒素检测整体解决方案书

  恒信仪器 黄曲霉毒素检测整体解决方案书[详细]

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• HELICA黄曲霉毒素M1竞争性ELISA检测试剂盒

  HELICA黄曲霉毒素M1竞争性ELISA检测试剂盒[详细]

  2011-11-24 00:00

  安装说明

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  Aflatoxins 黄曲霉毒素[详细]

  2016-07-21 00:00

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• 黄曲霉毒素解决方案

  黄曲霉毒素解决方案[详细]

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• 黄曲霉毒素B1

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  2024-09-11 17:48

  实验操作

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  黄曲霉毒素检测方案HPLC法[详细]

  2013-07-17 00:00

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  GX液相色谱法检测黄曲霉毒素残留[详细]

  2013-03-07 00:00

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• 黄曲霉毒素HPLC检测的解决方案

  黄曲霉毒素HPLC检测的解决方案[详细]

  2011-12-29 00:00

  安装说明

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• 黄曲霉毒素B1检测试纸说明书

  【简介】黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1简写为AFB1）是目前已知的化学物质中致癌性Z强的一种。黄曲霉毒素B1对人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。本品的检测灵敏度为5ng/ml。【测定原理】本品采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合AFB1-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB1的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1单克隆抗体。[详细]

  2018-08-19 10:00

  产品样册

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• 人（Human） 黄曲霉毒素（Aflatoxin）ELISA 检测试剂盒说明书

  人（Human）黄曲霉毒素（Aflatoxin）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：Aflatoxin试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Aflatoxin浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Aflatoxin和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Aflatoxin的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：40ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Aflatoxin抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：40ng/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。20ng/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液10ng/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0ng/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5ng/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液1.25ng/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（ng/ml）A4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F1.251.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的Aflatoxin标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的Aflatoxin含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-40ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml[详细]

  2018-09-14 10:01

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• 强致癌物质黄曲霉毒素M1检测方案

  强致癌物质黄曲霉毒素M1检测方案[详细]

  2011-12-30 00:00

  课件

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• HPLC法检测黄曲霉毒素M1方案

  HPLC法检测黄曲霉毒素M1方案[详细]

  2024-09-28 21:04

  专利

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• 黄曲霉毒素B1快速检测试纸卡

  黄曲霉毒素B1快速检测试纸卡[详细]

  2024-09-11 18:03

  应用文章

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• 黄曲霉毒素B1&M1整体解决方案

  黄曲霉毒素B1&M1整体解决方案[详细]

  2013-05-24 00:00

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