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饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒说明书
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本文由 上海抚生实业有限公司 整理汇编
2024-10-05 07:47 226阅读次数
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饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlFⅧ-Ag大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原规格:48T/96TFⅢ大鼠凝血因子Ⅲ规格:48T/96TFⅡ大鼠凝血因子Ⅱ规格:48T/96TTR大鼠凝血酶受体规格:48T/96TTAT大鼠凝血酶抗凝血酶复合物规格:48T/96TGelsolin大鼠凝溶胶蛋白规格:48T/96TCS大鼠柠檬酸合酶规格:48T/96TPLAUR/uPAR大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体规格:48T/96TuPA大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物规格:48T/96TUK大鼠尿激酶规格:48T/96TBDNF大鼠脑源性神经营养因子规格:48T/96TBNP大鼠脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96TNGB大鼠脑红蛋白规格:48T/96TBGP/Gehrelin大鼠脑肠肽规格:48T/96Tvisfatin大鼠内脂素/内脏脂肪素规格:48T/96Tvaspin大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶YZ剂规格:48T/96TGC大鼠内源性糖皮质激素规格:48T/96TEL大鼠内皮脂肪酶规格:48T/96T
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饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒说明书
- 饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlFⅧ-Ag大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原规格:48T/96TFⅢ大鼠凝血因子Ⅲ规格:48T/96TFⅡ大鼠凝血因子Ⅱ规格:48T/96TTR大鼠凝血酶受体规格:48T/96TTAT大鼠凝血酶抗凝血酶复合物规格:48T/96TGelsolin大鼠凝溶胶蛋白规格:48T/96TCS大鼠柠檬酸合酶规格:48T/96TPLAUR/uPAR大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体规格:48T/96TuPA大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物规格:48T/96TUK大鼠尿激酶规格:48T/96TBDNF大鼠脑源性神经营养因子规格:48T/96TBNP大鼠脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96TNGB大鼠脑红蛋白规格:48T/96TBGP/Gehrelin大鼠脑肠肽规格:48T/96Tvisfatin大鼠内脂素/内脏脂肪素规格:48T/96Tvaspin大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶YZ剂规格:48T/96TGC大鼠内源性糖皮质激素规格:48T/96TEL大鼠内皮脂肪酶规格:48T/96T[详细]
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2024-10-05 07:47
产品样册
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猪饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒实验技巧
- 猪饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒实验技巧[详细]
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2024-09-30 09:11
实验操作
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猪去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒
- 猪去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒[详细]
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2015-06-30 00:00
实验操作
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猪去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒
- 猪去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒[详细]
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2015-06-16 00:00
其它
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大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒
- 使用目的:大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮素(ET)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素(ET)水平。用纯化的大鼠内皮素(ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素(ET),再与HRP标记的内皮素(ET)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素(ET)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素(ET)浓度。大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒用途说明
- 使用目的:大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮素(ET)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素(ET)水平。用纯化的大鼠内皮素(ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素(ET),再与HRP标记的内皮素(ET)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素(ET)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素(ET)浓度。大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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人饥饿素 (ghrelin)ELISA试剂盒使用说明书
- 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人饥饿素(ghrelin)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人饥饿素(ghrelin)水平。用纯化的人饥饿素(ghrelin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入饥饿素(ghrelin),再与HRP标记的饥饿素(ghrelin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的饥饿素(ghrelin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人饥饿素(ghrelin)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:3600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为2400ng/L,1600ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:100ng/L-3000ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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人甲状旁腺激素(I-PTH)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人甲状旁腺激素(I-PTH)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人I-PTH单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的I-PTH与单抗结合,加入生物素化的抗人I-PTH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,I-PTH浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中I-PTH浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入2ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应I-PTH含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的I-PTH检测浓度小于16pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人I-PTH。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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鸡甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒说明书
- 检测试剂盒ELISA的应用ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:ELISA试验原理:试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。关键词:ELISA试剂盒天津,北京生化鉴定试剂盒价格,北京酶联免疫试剂盒经销商,北京大鼠ELISA试剂盒,北京绵羊ELISA试剂盒,北京ELISA试剂盒供应商,北京免疫组化试剂盒说明书,ELISA北京,北京ELISA试剂盒价格,北京酶联免疫试剂盒供货商,北京酶联免疫试剂盒经销商,北京酶联免疫试剂盒供应商种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。ELISA的样本实验准备:在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。标本应避免反复冻融。液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。可概括四个方面:1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。[详细]
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2018-09-19 10:00
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人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人SHBG单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的SHBG与单抗结合,加入生物素化的抗人SHBG,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,SHBG浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中SHBG浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2.4nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成8000nmol/L的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入8000nmol/L的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0nmol/L为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应SHBG含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的SHBG检测浓度小于30nmol/L。2.特异性:可同时检测重组或天然的人SHBG。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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人激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒说明书
- 人激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人HSL单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的HSL与单抗结合,加入生物素化的抗人HSL,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,HSL浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中HSL浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应HSL含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的HSL检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人HSL。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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小鼠抗利尿激素(AVP)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠抗利尿激素(AVP)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠AVP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的AVP与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠AVP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,AVP浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中AVP浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):5ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成5ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入5ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应AVP含量,再乘上稀释倍数。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的AVP检测浓度小于4pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠AVP。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于9.7%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒说明书
- 产品名称:大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒别名:大鼠TSH试剂盒;大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA检测试剂盒;大鼠促甲状腺激素(TSH)酶免试剂盒;RatTSHELISAKIT大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被促甲状腺激素(TSH)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的促甲状腺激素(TSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。4.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品(4800μIU/L)0.5mL0.5mL无标准品稀释液6mL3mL无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品用标准品稀释液倍比稀释为:4800、2400、1200、600、300、150μIU/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒说明书操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔。标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;待测样本孔先加样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。3.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。4.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。5.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。6.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0μIU/L。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月[详细]
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2018-09-19 10:00
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Human GC 糖皮激素试剂盒说明书elisa
- 品牌:Bio-Swamp货号:HM11003规格:96T/48T单位:盒价格:2400/1600反应时间:1.5~2h检测波长:450nm样本体积:50ul检测范围:见说明书检测样本:血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本使用之前请认真阅读产品说明书[详细]
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2018-12-15 10:00
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人饥饿素 (ghrelin)说明书
- 人饥饿素(ghrelin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T50ng/L-1600ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中饥饿素(ghrelin)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人饥饿素(ghrelin)水平。用纯化的人饥饿素(ghrelin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入饥饿素(ghrelin),再与HRP标记的饥饿素(ghrelin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的饥饿素(ghrelin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人饥饿素(ghrelin)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(3200ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。1600ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液800ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液400ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月HumanghrelinFORRESEARCHUSEONLYAssayrange:50ng/L-1600ng/L96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofghrelinconcentrationsinHumanserum,cellculturesupernatesandotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayHumanghrelinlevelinthesample,usePurifiedHumanghrelinantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddghrelintowells,CombinedghrelinantibodywhichWithHRPlabeledgoatanti-Humanbecomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofHumanghrelininthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.Materialsprovidedwiththekit1washsolution20ml×1bottle7StoppSolution6ml×1bottle2HRP-Conjugatereagent6ml×1bottle8Standard(3200ng/L)0.5ml×1bottle3Microelisastripplate12well×8strips9Standarddiluent1.5ml×1bottle4Samplediluent6ml×1bottle10Instruction15ChromogenSolutionA6ml×1bottle11Closureplatemembrane26ChromogenSolutionB6ml×1bottle12Sealedbags1SpecimenrequirementsRD1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:1600ng/L5Standard150μlOriginaldensityStandard+150μlStandarddiluent800ng/L4Standard150μl5Standard+150μlStandarddiluent400ng/L3Standard150μl4Standard+150μlStandarddiluent200ng/L2Standard150μl3Standard+150μlStandarddiluent100ng/L1Standard150μl2Standard+150μlStandarddiluent2.addsample:Setblankwellsseparately(blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame).testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl(samplefinaldilutionis5-fold),addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme:AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate:Operationwith3.8.washing:Operationwith5.9.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).11.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.StepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,incubatefor30minat37℃.Wash5time,AddHRP-Conjugatereagent,incubatefor30minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor30minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateCalculateTakethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher(ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell),pleasediluteSample(n-fold),Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.(×n×5).5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Storageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths[详细]
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2018-11-15 10:03
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供应鱼促性腺激素释放激素ELISA试剂盒使用说明书
- 供应鱼促性腺激素释放激素ELISA试剂盒使用说明书[详细]
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2015-04-15 00:00
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激素六项之孕酮(PRG)ELISA 试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮(PRG)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1561)1、前言孕酮是一种类固醇激素,含21个碳原子,在C-3上连有酮基,在C-4与在C-5之间为双键连接。该类固醇激素是一种女性性激素,与雌激素共同在月经周期中调节附属的器官,它对于胚细胞着床前的子宫内膜增生状态和维持孕期是特别重要的。在非孕期妇女怀孕的胎盘成为主要来源。极少数来源于两性的肾上腺皮质。孕酮在循环血中主要与皮质类固醇结合蛋白(CBG),性激素结合蛋白(SHBG)和白蛋白结合,仅有循环总浓度的2-10%是游离激素。根据月经循环周期血孕酮浓度范围很宽,在卵泡期可以低于1ng/ml(3.2nmol/L),在黄体期达到10-20ng/ml(32-64nmol/L)。在排卵后4-7天达到Z高水平保持4-6天,在月经开始前24小时降至排卵前的水平,因为孕酮的升高和降低与卵巢卵泡和黄体的活动相对应,因此血浆孕酮的测定在临床上常用来证明排卵和非孕妇女的黄体功能正常。假如排卵没有发生,黄体则没有生成进而孕酮升高的循环也不能见到,异常的孕酮分泌与经前期紧张子宫内膜异位症痛经和黄体不全有关。孕酮浓度不仅个体之间有差异,而且同一个人每天甚至每个小时都会不同,一般的在妇科内分泌紊乱或异常妊娠为了恰当的解释病因连续测定比单个测定更有意义。在孕期孕酮更多的由胎盘产生,血浆水平在这个时期稳定在200ng/ml的水平。2、实验原理DRG公司的孕酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合孕酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性孕酮的病人样本与辣根过氧酶标记的孕酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中孕酮的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中孕酮的浓度成反比。3、试剂盒成分1)预包被反应板,12条X8孔,96孔,微孔中包被了单克隆的抗孕酮抗体。2)标准品系列,7支,1ml,浓度:0;0.3;1.25;2.5;5;15;40ng/ml,转换系数:1ng/ml=3.18nmol/ml,内含0.3%的Proclin防腐剂,3)酶联结物,1支,25ml,辣根过氧酶标记的孕酮,内含0.3%的Proclin防腐剂。4)底物液,1支,25ml,TMB5)终止液,1支,14ml,内含0.5M的H2SO46)浓缩洗涤液(40X),1支,30ml.注:用于样品稀释的零标准品应视需要而定。4、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前,将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液:在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释,稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备此实验中要使用到血清或血浆(EDTA-,肝素血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含叠氮钠的样品不能用于此实验中。7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放24个小时。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、实验步骤:1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)室温温育5分钟。4)在每一微孔中加入200μL酶联物。5)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。6)室温孵育60分种。7)快速弃去孔内反应物,每孔用400μL蒸馏水洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。8)在每一微孔中加入200μl底物液。9)室温孵育15分种。10)加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。11)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中孕酮浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的孕酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:正常女性:卵泡期0.2-1.4ng/ml黄体期425ng/ml绝经期0.11ng/ml正常男性:0.11ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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激素六项之 泌乳素(PRL) ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4泌乳素(PRL)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA1291)1、实验原理DRG公司的泌乳素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合泌乳素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性泌乳素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗泌乳素抗血清。孵育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中泌乳素的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中泌乳素的浓度成正比。2、试剂盒成分1)微量反应板,1块(96孔),微孔中包被了抗泌乳素的单克隆抗体。2)酶联物,11ml,辣根过氧酶标记的泌乳素抗血清。3)底物液,11ml(TMB)4)标准系列,6支(冻干粉),浓度:0;5;20;50;100;200ng/ml转换系数(1ng/ml=21.1mUI/mL)5)终止液,0.5M的H2SO4,6ml3、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)移液器3)吸水纸4)标准水箱5)蒸馏水6)计时器4、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂,酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开,其免疫活性在2个月内稳定,但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。5、样品的采集1)静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清,避免溶血。注意:此试剂盒只能使用没用任何添加剂的样品。2)必须盖住样本并在实验之前于2-8℃下可贮存48小时。样品需要更长的贮存时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。注意:用于此试剂盒的样品不能含有任何添加剂。6、试剂的准备参考标准:在冻干的标准品中加入1.0ml双蒸水。注:配制好了的标准品可在2-8℃下稳定存放2个月。想要存放更长时间应当将其冻存于-20℃的环境下。7、一般注意事项1)实验开始前,将所有试剂和样本都平衡至室温,试剂混合时避免起泡。2)实验一旦开始,所有的步骤应完整地进行下去。3)每一样品的取样都得使用新的取样吸头。4)吸光度与温育时间和温度有关,在实验开始后所有的试剂都应准备好,以保证加液时间的一致。5)本试剂盒Zda吸光度(OD)在1.200-2.000之间(室温22℃,显色10分钟以内)。如果ZdaOD值高于您酶标仪的上限或低于1.000,则相应的减少或延长显色反应的温育时间。一般情况下,酶免反应的强度与时间和温度成线性,这使得操作者应当适当的调整物理化学环境。8、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将黄体生成素标准系列(0;5;20;50;100;200ng/ml)、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中,每一样品都得使用新的取样吸头。3)加100μl的抗泌乳素酶联物于各孔中。4)混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5)室温温育(22℃)30分钟。6)弃去孔内的反应液。7)用蒸馏水洗板5次。8)在吸水纸上把板拍干。9)依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。10)室温(22℃)温育10分钟。11)按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。12)10分钟内在450±10nm波长读吸光度。9、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值(mIU/ml)进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。根据自己的实际经验或计算机的功能,也可以采用其它的归纳方法进行计算。4)如果样本的浓度高于Z高浓度的标准品的浓度或者浓度>200ng/ml,则需要进行稀释,任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果:性别平均值(ng/ml)S.D.(ng/ml)5%(ng/ml)95%(ng/ml)男性6.445.500.9420.94女性14.275.882.3925.15灵敏度:Z小检测出的泌乳素浓度为0.35ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之睾酮(TES)ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睾酮(TES)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1559)1、前言DRG公司的睾酮酶免试剂盒可用于人血清和血浆中睾酮的定量检测。此试剂盒仅供体外诊断用。睾酮(17β-羟基-4-雄烯-3-烷)是一种19C的类固醇激素,它在C-4和C-5间含一个不饱和键,C-3位置有一个酮基,C-17的β位上有一个羟基。此类固醇激素的分子量为288.47。睾酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中,睾酮主要由睾丸的间质细胞分泌;在女性中,处于循环中的睾酮50%来源于外周雄烯二酮的转换,25%来源于卵巢,25%来源于肾上腺。睾酮负责男性第二性征的形成,检测睾酮浓度有助于评价性腺机能减退的状态。在女性中,在很多疾病中睾酮的浓度都很高,如:多毛症,女子男性化,多囊卵巢症,卵巢癌,肾上腺癌和肾上腺增生。而在男性中,高水平的睾酮通常与下丘脑垂体疾病、睾丸癌、先天性肾上腺增生和前列腺癌有关。在患下列疾病的病人体内,通常可发现睾酮水平很低:垂体机能减退症、克氏综合征、睾丸女性化综合征、睾丸切除术、隐睾病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、实验原理DRG公司的睾酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合睾酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性睾酮的病人样本与辣根过氧酶标记的睾酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中睾酮的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中睾酮的浓度成反比。3、试剂盒成份1)预包被反应板,12×8孔,包被板上包被了单克隆的鼠抗睾酮抗体。2)标准品系列,共7支,1.0ml/支,浓度:0;0.2;0.5;1;2;6;16ng/ml。转换系数:1ng/ml=3.467nmol/l。3)酶联结物,1支,25ml,内含辣根过氧酶标记的睾酮。4)底物/显色剂,1支,25ml,内含TMB。5)终止液,1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。6)浓缩洗涤液(40X),1支,30ml。注意:用于样品稀释的零标准品因视需要而定。4、实验所需材料(但试剂盒不提供)1)标准移液器2)酶标仪3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂盒的储存与稳定性未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备洗涤液的准备吸取40×浓度的洗涤液30mL用1170mL的蒸馏水混合定容至1200mL,稀释好的洗涤液在室温能保存2周7、样品在此实验中将用到血清或血浆(EDTA-,肝素-或柠檬酸血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含有叠氮化钠的样本不能使用7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、一般注意事项1)所有试剂和样本在使用之前必须平衡至室温。所有试剂必须摇匀但不能起泡沫。2)一旦检测开始,所有的操作步骤必须进行到底不能中断。3)为了避免交叉放映,每一标准品、质控品和样品的取样都必须使用新的取样吸头。4)吸光度值是由孵育的时间和温度所决定的。在实验开始之前,建议准备好所有的药剂旋开盖子。5)将所需检测的微孔板条固定在板架上等。这些准备工作将确保每次的加液步骤所需时间相同,没有中断。按一般的规律,酶免反应的强度与时间和温度成线性比例。9、实验步骤:1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶联物。4)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。5)室温孵育60分种。6)快速弃取孔内反应物,每孔用400μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)在每一微孔中加入200μl底物液。8)室温孵育15分种。9)加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。10、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。11、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一次明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的睾酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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激素六项之 雌二醇 (E2) ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4雌二醇(E2)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA2693)1、前言说明E2是一种含一个酚A环的18C类固醇激素。此类固醇激素的分子量为272.4,它是人体中Z有效的雌激素,主要由女性卵巢的格拉芬卵泡和胎盘产生,少量由肾上腺和男性睾丸产生。E2(雌二醇)被分泌到血液中,在血液中有98%的雌二醇会结合到性激素结合蛋白上,有的还会结合到其它血清蛋白上(如血清白蛋白),只有很少一部分以游离形式存在。雌激素的活性会受到雌二醇受体符合物的影响,此符合物可在靶位并在核酸水平上引发相应的反应。这些靶位包括:卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、下丘脑、垂体和敏感稍低的肝脏与皮肤。在月经周期正常的未怀孕女性体内,雌二醇的分泌遵循着一种循环模式,在排卵前有两个明显的高峰期。高浓度的雌二醇可在垂体水平发挥正反馈作用,它会影响垂体促性腺激素的分泌,如卵泡刺激素和黄体生成素,前者是卵泡成熟所必要的,后者是排卵形成所必要的。排卵后,雌二醇水平迅速下降直到黄体细胞被激活,结果雌二醇水平出现第二次高峰,并在黄体阶段达到一平衡述评。在怀孕期间,母体血清雌二醇的水平会极度的增加,并且会超过排卵前的峰值,而且在整个孕期维持在高水平上。血清雌二醇的检测是评价各种月经功能障碍的一个有效指标,例如女性早熟和晚熟,原发性、续发性闭经和绝经症。据报道,女性化综合征、男子女性型乳房和睾丸癌患者的血清雌二醇水平会升高。在不孕患者体内,血清雌二醇的检测有利于监测药物ZL(如克罗米酚柠檬酸盐、促黄体生成素释放激素或外源性促性腺激素)后排卵的感应情况。在因为体外受精而引起的卵巢过度刺激综合征患者中,每天监测血清雌二醇浓度以便为hCG的管理和卵母细胞的采集提供**时间。2、检测原理:DRG公司的雌二醇酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合雌二醇分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性雌二醇的病人样本与辣根过氧酶标记的雌二醇竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中雌二醇的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中雌二醇的浓度成反比。3、试剂盒成分:1)包被板,12×8(可拆),96孔,微孔中包被了抗雌二醇的兔单克隆抗体。2)标准品:7支1.0ml/支。分别含量为:0;25;100;250;500;1000;2000pg/ml。(1pg/ml=3.67pmol/L)3)酶联结物:1支,25ml,内含辣根过氧化物酶标记的雌二醇。4)底物液:1支,内含,14ml,内含TMB5)终止液:1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接触终止液,以免造成刺激皮肤和着烧皮肤。6)洗涤液(40×),1支,30ml注:用于样品稀释的零标准品视需要而定。4、实验需要器材(但试剂盒不提供)1)酶标仪(450±10nm)。2)微量移液器和吸嘴25μl、100μl、200μl。3)坐标纸。4)去离子水。5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前,将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液:在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释,稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、实验步骤:所有的标准品、样品和质控品都做双份检测以保证所有的检测条件都相同。1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶联物。4)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。5)室温孵育120分种。6)快速弃去孔内反应物,每孔用400μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)在每一微孔中加入100μl底物液。8)室温孵育15分种。9)加50μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算:1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的雌二醇ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:人群5-95%男性10-36pg/ml女性绝经期前绝经期后13-191pg/ml11-65pg/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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