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人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒使用说明书
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2018-11-23 10:00 239阅读次数
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人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人11-酮基睾酮(11kT)水平。用纯化的人11-酮基睾酮(11kT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入11-酮基睾酮(11kT),再与HRP标记的11-酮基睾酮(11kT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的11-酮基睾酮(11kT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人11-酮基睾酮(11kT)浓度。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(640ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液160ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液80ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液40ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液20ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月
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人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒使用说明书
- 人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人11-酮基睾酮(11kT)水平。用纯化的人11-酮基睾酮(11kT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入11-酮基睾酮(11kT),再与HRP标记的11-酮基睾酮(11kT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的11-酮基睾酮(11kT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人11-酮基睾酮(11kT)浓度。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(640ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液160ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液80ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液40ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液20ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。人11-酮基睾酮(11kT)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-23 10:00
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人11-酮基睾酮elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T10ng/L350ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中11-酮基睾酮(11kT)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人11-酮基睾酮(11kT)水平。用纯化的人11-酮基睾酮(11kT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入11-酮基睾酮(11kT),再与HRP标记的11-酮基睾酮(11kT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的11-酮基睾酮(11kT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人11-酮基睾酮(11kT)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
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鱼11-酮睾酮(KT)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
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2015-05-12 00:00
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- 鱼11-酮睾酮(KT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T2ng/L-80ng/L使用目的:本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中11-酮睾酮(KT)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼11-酮睾酮(KT)水平。用纯化的鱼11-酮睾酮(KT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入11-酮睾酮(KT),再与HRP标记的11-酮睾酮(KT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的11-酮睾酮(KT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼11-酮睾酮(KT)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液40ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液20ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液10ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液5ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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人 睾酮ELISA检测试剂盒说明书
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人游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒说明书
- 人游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆及相关液体样本中人游离睾酮(F-TESTO)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人游离睾酮(F-TESTO)。用纯化的人游离睾酮(F-TESTO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中游离睾酮(F-TESTO)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的游离睾酮(F-TESTO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人游离睾酮(F-TESTO)的存在与否。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为人游离睾酮(F-TESTO)阴性阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为人游离睾酮(F-TESTO)阳性注意事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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2013-12-06 00:00
标准
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人 (Human) 睾酮 (TESTO) ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)睾酮(TESTO)ELISA检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:TESTO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TESTO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TESTO和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TESTO的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TESTO抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A8.08.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4.04.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2.02.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1.01.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E0.50.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F0.250.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TESTO标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TESTO含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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人转酮醇酶(TKT)ELISA试剂盒使用说明书
- 人转酮醇酶(TKT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中转酮醇酶(TKT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转酮醇酶(TKT)水平。用纯化的人转酮醇酶(TKT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转酮醇酶(TKT),再与HRP标记的转酮醇酶(TKT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的转酮醇酶(TKT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人转酮醇酶(TKT)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:81U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为54U/L,36U/L,18U/L,9U/L,4.5U/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:2.2U/L-75U/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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人皮质酮(Corticosterone)ELISA试剂盒说明书
- 人皮质酮(Corticosterone)ELISA试剂盒原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Corticosterone单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Corticosterone与单抗结合,加入生物素化的抗人Corticosterone,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Corticosterone浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Corticosterone浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):12ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成40000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入40000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)标本激活方法1.将450ul标本稀释液加入到一支1.5ml进口聚丙烯管中,再加10ul血清或血浆标本。2.加20ul1NHCI,盖紧,上下混匀。2-8℃放置60±2分钟。3.加20ul1NNaOH,盖紧,上下混匀。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。计算结果时乘以稀释倍数50。(注意:不同的标本Corticosterone的水平可能有较大差异,请根据实际情况灵活掌握稀释度)5.细胞培养上清或组织匀浆10倍稀释(410ul的标本稀释液+50ul样本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品(已激活)100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20000、10000、5000、2500、1250、625、312、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Corticosterone含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Corticosterone检测浓度小于150pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Corticosterone。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于9.6%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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人游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒
- 人游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
应用文章
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人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒
- 人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
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人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒
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2015-01-13 00:00
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人睾酮 (TESTO) ELISA 检测试剂盒
- 人睾酮(TESTO)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:TESTO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TESTO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TESTO和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TESTO的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗TESTO抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A8.08.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4.04.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2.02.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1.01.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E0.50.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F0.250.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的TESTO标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的TESTO含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ng/ml4、敏感度:0.01ng/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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人 (Human) 游离睾酮(FT)ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)游离睾酮(FT)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:FT试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知FT浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将FT和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中FT的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:40pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗FT抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:40pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。20pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液10pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液1.25pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F1.251.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的FT标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的FT含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-40pg/ml4、敏感度:0.1pg/ml[详细]
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2018-09-14 10:01
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激素六项之睾酮(TES)ELISA试剂盒使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睾酮(TES)ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1559)1、前言DRG公司的睾酮酶免试剂盒可用于人血清和血浆中睾酮的定量检测。此试剂盒仅供体外诊断用。睾酮(17β-羟基-4-雄烯-3-烷)是一种19C的类固醇激素,它在C-4和C-5间含一个不饱和键,C-3位置有一个酮基,C-17的β位上有一个羟基。此类固醇激素的分子量为288.47。睾酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中,睾酮主要由睾丸的间质细胞分泌;在女性中,处于循环中的睾酮50%来源于外周雄烯二酮的转换,25%来源于卵巢,25%来源于肾上腺。睾酮负责男性第二性征的形成,检测睾酮浓度有助于评价性腺机能减退的状态。在女性中,在很多疾病中睾酮的浓度都很高,如:多毛症,女子男性化,多囊卵巢症,卵巢癌,肾上腺癌和肾上腺增生。而在男性中,高水平的睾酮通常与下丘脑垂体疾病、睾丸癌、先天性肾上腺增生和前列腺癌有关。在患下列疾病的病人体内,通常可发现睾酮水平很低:垂体机能减退症、克氏综合征、睾丸女性化综合征、睾丸切除术、隐睾病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、实验原理DRG公司的睾酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。反应板上的微检测孔包被有能结合睾酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性睾酮的病人样本与辣根过氧酶标记的睾酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后,未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中睾酮的浓度成反比。加入底物液后,所显示的颜色强度与病人样品中睾酮的浓度成反比。3、试剂盒成份1)预包被反应板,12×8孔,包被板上包被了单克隆的鼠抗睾酮抗体。2)标准品系列,共7支,1.0ml/支,浓度:0;0.2;0.5;1;2;6;16ng/ml。转换系数:1ng/ml=3.467nmol/l。3)酶联结物,1支,25ml,内含辣根过氧酶标记的睾酮。4)底物/显色剂,1支,25ml,内含TMB。5)终止液,1支,0.5M的H2SO4,14ml,避免接触终止液,以免刺激或着烧皮肤。6)浓缩洗涤液(40X),1支,30ml。注意:用于样品稀释的零标准品因视需要而定。4、实验所需材料(但试剂盒不提供)1)标准移液器2)酶标仪3)吸水纸4)蒸馏水5、试剂盒的储存与稳定性未开启的试剂在28℃下贮存时,其活性在有效期内稳定,不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下,微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。6、试剂准备洗涤液的准备吸取40×浓度的洗涤液30mL用1170mL的蒸馏水混合定容至1200mL,稀释好的洗涤液在室温能保存2周7、样品在此实验中将用到血清或血浆(EDTA-,肝素-或柠檬酸血浆),不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意:含有叠氮化钠的样本不能使用7.1样品的采集血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时,如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如:a)按1:10的比例稀释:10μl的血清+90μl零标准品(充分混合)b)按1:100的比例稀释:10μl已稀释好的a)+90μl零标准品(充分混合)8、一般注意事项1)所有试剂和样本在使用之前必须平衡至室温。所有试剂必须摇匀但不能起泡沫。2)一旦检测开始,所有的操作步骤必须进行到底不能中断。3)为了避免交叉放映,每一标准品、质控品和样品的取样都必须使用新的取样吸头。4)吸光度值是由孵育的时间和温度所决定的。在实验开始之前,建议准备好所有的药剂旋开盖子。5)将所需检测的微孔板条固定在板架上等。这些准备工作将确保每次的加液步骤所需时间相同,没有中断。按一般的规律,酶免反应的强度与时间和温度成线性比例。9、实验步骤:1)将所需数量的板条固定到板架上。2)将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3)在每一微孔中加入200μL酶联物。4)充分混匀10秒,在这个步骤完全混匀很重要。5)室温孵育60分种。6)快速弃取孔内反应物,每孔用400μL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7)在每一微孔中加入200μl底物液。8)室温孵育15分种。9)加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10)加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD值。10、结果计算1)计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2)用吸光度值作为纵坐标(y),浓度值作为横坐标(x),以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘,作一条标准曲线。3)用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4)自动计算方法:在IFU上,它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5)样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。11、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一次明显正常人群的研究中,我们使用DRG公司的睾酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果:人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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大鼠(Rat)睾酮ELISA试剂盒说明书
- 大鼠(Rat)睾酮ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清一、试剂组成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶标偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、标准品Standard 5x1.0ml4、呈色剂A、SubstrateA6.0ml5、呈色剂B、SubstrateB6.0ml6、终止液StopSolution6.0ml7、浓缩洗涤液(1:20)RinsingBuffer60.0ml8、5倍样品稀释液dilution15.0m二、注意事项此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。保存于2-8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟三、操作步骤每孔分别加入已稀释的样品血清、标准品各100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。每孔加入酶标偶合液100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒温箱反应15分钟。8.每孔加终止液50ul,于450nm波长读O.D.值。四、结果判断仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。检测值范围:016ng/ml敏感度:0.1ng/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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鲟鱼睾酮(T)ELISA试剂盒说明书
- 鲟鱼睾酮(T)ELISA试剂盒实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鲟鱼睾酮(T)水平。用纯化的鲟鱼睾酮(T)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入睾酮(T),再与HRP标记的睾酮(T)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的睾酮(T)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鲟鱼睾酮(T)浓度。鲟鱼睾酮(T)ELISA试剂盒样本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鲟鱼睾酮(T)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。鲟鱼睾酮(T)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2019-01-02 10:00
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人6-酮-前列环素(6-K-PG)ELISA试剂盒说明书
- 人6-酮-前列环素(6-K-PG)ELISA试剂盒本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中6-酮-前列环素(6-K-PG)的含量。购买本试剂盒可享受免费代测服务![详细]
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2018-09-04 10:00
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人ELISA试剂盒使用说明书
- 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人cd105。用纯化的人cd105抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入cd105,再与HRP标记的cd105抗体合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的cd105呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人cd105浓度。人ELISA试剂盒使用说明书试剂盒组成2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用人ELISA试剂盒使用说明书配液:将30倍浓洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静重复5次,拍干。30秒后弃去,如此加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人cd105试剂盒使用说明书操作程序总:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。人cd105试剂盒使用说明书注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未人ELISA试剂盒使用说明书用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验。8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。人cd105试剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
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