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C-肽ELISA试剂盒
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4C-肽ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1293)1、DRG公司C-肽ELISA试剂盒的临床应用1)接受了胰岛素ZL的糖尿病患者剩余β-细胞的功能评价。2)I型糖尿病患者缓解阶段的检测与监控。3)作为I型糖尿病(胰岛素依赖性)和II型糖尿病(非胰岛素依赖性)鉴别诊断的辅助工具。4)胰岛素引起的假低血糖症的诊断。5)辅助胰岛素瘤的诊断。(胰岛素YZ实验)6)用于检测糖尿病孕妇妊娠成功的预后指数。7)肝病患者胰岛素分泌的评价。8)切除术的监测。2、实验原理DRG公司C-肽ELISA试剂盒是以竞争原理为基础。样品中存在的未知含量的C-肽和已知浓度的C-肽酶联结物相互竞争结合到小鼠抗C-肽抗血清的结合位点。再与包被在检测孔上的抗小鼠抗体结合。没有结合的酶复合物被冲洗下来。加入底物溶液后,样本中的C-肽浓度和测得的光密度成反比例。3、试剂盒组成1)微孔反应板,96(孔),包被孔中包被了抗小鼠抗体。2)酶联结物,14ml。即用型,内含C-肽生物素标记物和稳定缓冲液。3)酶复合物,14ml,即用型,内含辣根过氧化物酶4)标准品系列(0-5),0-16ng/ml(具体浓度请见试剂瓶标签)。冻干粉,6支,用前加蒸馏水0.75mL。5)样品稀释液,3ml,即用型。6)抗血清:小鼠抗C-肽单克隆抗体,1支,7mL。7)底物液,TMB,14ml8)终止液,0.5M的H2SO4,14ml。9)浓缩冼涤液,40倍浓缩,30ml。4、实验所需器材但试剂盒不提供1)酶标仪2)移液器,100;200和1000μl3)标准冰箱4)吸水纸5)去离子水5、贮存条件当贮存在28℃下,未打开的试剂在有效期内均有效。不要使用过期试剂。半标准品配制好后,所有剩余的标准品必须冷藏于28℃的环境下。要更长时间的贮存,可将重新配制好的标准品冻存于-20℃的环境下。C-肽生物素联结物、酶复合物、底物溶液、洗涤液和零标准品必须冷藏于28℃的环境下。微孔反应板也必须冷藏于28℃的环境下。一旦包装袋拆开,必须将它重新密封好。6、样本的采集和准备血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。样本在2~8℃下能存储24小时,如果需要储存更长时间则需要在20℃下冻存,并且只能冻融一次血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。样本在2~8℃下能存储24小时,如果需要储存更长时间则需要在20℃下冻存,并且只能冻融一次尿液:1)24小时内排泄出的尿液总量应收集和混合在单独的容器中。2)记录下尿液的总体积。3)充分混合样品。离心样本至澄清,在2~8℃下能储存36小时;如果要保存更长时间则需要在20℃下冻存,只能冻融一次。4)实验样本用样品稀释液按1:20进行稀释。7、试剂准备标准品:用0.75ml蒸馏水溶解冻干标准品。可以保持不动直至完全融化,然后通过轻轻的倒转充分混匀。重新标配的标准品在2~8℃能保存3天,如果需要保存更长时间则需要放置在20℃下冻存洗涤液:将30ml的浓缩洗涤液用去离子水1170ml稀释至1200ml。稀释后的洗涤液可在室温下稳定存放2周。8、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将100μlC肽标准品,和样本加到相应的检测孔中。3)各孔中加入50μl抗血清。4)各孔中加入100μl酶联结物。5)充分振荡混匀10秒钟。6)室温温育60min。7)弃去孔内反应液。8)用洗涤液洗板3次(每孔400μl)。末次在吸水纸上拍干反应板。9)在每微孔中加入100μl酶复合物。10)室温温育30分钟。11)弃去孔中的反应液。用洗涤液洗板3次(每孔400μl)。末次在吸水纸拍干反应板。12)以相同的时间间隔在每一微孔中加入100μl底物液。13)室温静置20分钟。14)以相同的时间间隔在每一微孔中加入100μl终止液以终止酶反应。15)在加完终止液后10分钟内在450±10nm处测OD值。9、结果计算可以使用任何一个能在450±10nm处测定吸光度值的酶标仪。按下述方法可求得每个样本血清的C肽含量值。1)在线性或半对数坐标纸上,以每个参考标准品的平均吸光度值(Y)对它们相应的浓度值(X,ng/ml)做一标准曲线。我们建议您用四参数作标准曲线。2)利用每个血清样本的平均吸光度值,通过从标准曲线上读取相应的C-肽值,如有必要,还乘上初始样本的稀释倍数,便可得知它们相应的浓度值。利用DRG公司的ELIZAMAT3000和回归程序可以读出数值,并通过使用四参数逻辑功能或立体回归得到计算机辅助的解释。期望值:血清、尿液中C肽的正常范围。建议每个实验室建立起自己的正常人C肽水平范围。用DRG公司的C肽酶联试剂盒检测正常男性和女性所得到的正常范围值罗列如下:样本数平均值±2个标准差空腹12小时后(血清)600.5-3.2ng/ml尿液1-200g/day此外,用6个空腹12个小时后的正常成人做葡萄糖测定。在空腹12小时后,抽取血清。接受测定的人跟着服用50-60克的葡萄糖,在30-45分钟后再抽取血清样本进行检测,结果发现C-肽水平增加了200-600%。本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层邮政编码:518067电话:0755-26814430,26680196传真:0755-26814431免费电话:800-8306296
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C-肽ELISA试剂盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4C-肽ELISA试剂盒(德国DRG:EIA-1293)1、DRG公司C-肽ELISA试剂盒的临床应用1)接受了胰岛素ZL的糖尿病患者剩余β-细胞的功能评价。2)I型糖尿病患者缓解阶段的检测与监控。3)作为I型糖尿病(胰岛素依赖性)和II型糖尿病(非胰岛素依赖性)鉴别诊断的辅助工具。4)胰岛素引起的假低血糖症的诊断。5)辅助胰岛素瘤的诊断。(胰岛素YZ实验)6)用于检测糖尿病孕妇妊娠成功的预后指数。7)肝病患者胰岛素分泌的评价。8)切除术的监测。2、实验原理DRG公司C-肽ELISA试剂盒是以竞争原理为基础。样品中存在的未知含量的C-肽和已知浓度的C-肽酶联结物相互竞争结合到小鼠抗C-肽抗血清的结合位点。再与包被在检测孔上的抗小鼠抗体结合。没有结合的酶复合物被冲洗下来。加入底物溶液后,样本中的C-肽浓度和测得的光密度成反比例。3、试剂盒组成1)微孔反应板,96(孔),包被孔中包被了抗小鼠抗体。2)酶联结物,14ml。即用型,内含C-肽生物素标记物和稳定缓冲液。3)酶复合物,14ml,即用型,内含辣根过氧化物酶4)标准品系列(0-5),0-16ng/ml(具体浓度请见试剂瓶标签)。冻干粉,6支,用前加蒸馏水0.75mL。5)样品稀释液,3ml,即用型。6)抗血清:小鼠抗C-肽单克隆抗体,1支,7mL。7)底物液,TMB,14ml8)终止液,0.5M的H2SO4,14ml。9)浓缩冼涤液,40倍浓缩,30ml。4、实验所需器材但试剂盒不提供1)酶标仪2)移液器,100;200和1000μl3)标准冰箱4)吸水纸5)去离子水5、贮存条件当贮存在28℃下,未打开的试剂在有效期内均有效。不要使用过期试剂。半标准品配制好后,所有剩余的标准品必须冷藏于28℃的环境下。要更长时间的贮存,可将重新配制好的标准品冻存于-20℃的环境下。C-肽生物素联结物、酶复合物、底物溶液、洗涤液和零标准品必须冷藏于28℃的环境下。微孔反应板也必须冷藏于28℃的环境下。一旦包装袋拆开,必须将它重新密封好。6、样本的采集和准备血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。样本在2~8℃下能存储24小时,如果需要储存更长时间则需要在20℃下冻存,并且只能冻融一次血浆:将全血采集到含有抗凝剂的离心管,采集后立即离心分离。样本在2~8℃下能存储24小时,如果需要储存更长时间则需要在20℃下冻存,并且只能冻融一次尿液:1)24小时内排泄出的尿液总量应收集和混合在单独的容器中。2)记录下尿液的总体积。3)充分混合样品。离心样本至澄清,在2~8℃下能储存36小时;如果要保存更长时间则需要在20℃下冻存,只能冻融一次。4)实验样本用样品稀释液按1:20进行稀释。7、试剂准备标准品:用0.75ml蒸馏水溶解冻干标准品。可以保持不动直至完全融化,然后通过轻轻的倒转充分混匀。重新标配的标准品在2~8℃能保存3天,如果需要保存更长时间则需要放置在20℃下冻存洗涤液:将30ml的浓缩洗涤液用去离子水1170ml稀释至1200ml。稀释后的洗涤液可在室温下稳定存放2周。8、实验步骤1)将所需数目的板条置于板架上。2)将100μlC肽标准品,和样本加到相应的检测孔中。3)各孔中加入50μl抗血清。4)各孔中加入100μl酶联结物。5)充分振荡混匀10秒钟。6)室温温育60min。7)弃去孔内反应液。8)用洗涤液洗板3次(每孔400μl)。末次在吸水纸上拍干反应板。9)在每微孔中加入100μl酶复合物。10)室温温育30分钟。11)弃去孔中的反应液。用洗涤液洗板3次(每孔400μl)。末次在吸水纸拍干反应板。12)以相同的时间间隔在每一微孔中加入100μl底物液。13)室温静置20分钟。14)以相同的时间间隔在每一微孔中加入100μl终止液以终止酶反应。15)在加完终止液后10分钟内在450±10nm处测OD值。9、结果计算可以使用任何一个能在450±10nm处测定吸光度值的酶标仪。按下述方法可求得每个样本血清的C肽含量值。1)在线性或半对数坐标纸上,以每个参考标准品的平均吸光度值(Y)对它们相应的浓度值(X,ng/ml)做一标准曲线。我们建议您用四参数作标准曲线。2)利用每个血清样本的平均吸光度值,通过从标准曲线上读取相应的C-肽值,如有必要,还乘上初始样本的稀释倍数,便可得知它们相应的浓度值。利用DRG公司的ELIZAMAT3000和回归程序可以读出数值,并通过使用四参数逻辑功能或立体回归得到计算机辅助的解释。期望值:血清、尿液中C肽的正常范围。建议每个实验室建立起自己的正常人C肽水平范围。用DRG公司的C肽酶联试剂盒检测正常男性和女性所得到的正常范围值罗列如下:样本数平均值±2个标准差空腹12小时后(血清)600.5-3.2ng/ml尿液1-200g/day此外,用6个空腹12个小时后的正常成人做葡萄糖测定。在空腹12小时后,抽取血清。接受测定的人跟着服用50-60克的葡萄糖,在30-45分钟后再抽取血清样本进行检测,结果发现C-肽水平增加了200-600%。本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10号6层邮政编码:518067电话:0755-26814430,26680196传真:0755-26814431免费电话:800-8306296[详细]
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2018-11-14 10:00
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小鼠C-肽(C-peptide)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠C-肽(C-peptide)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠C-peptide单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的C-peptide与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠C-peptide,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,C-peptide浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中C-peptide浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。标本测定前用标本稀释液作1:5-10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。洗板:同前。每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。洗板:同前。每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。每孔加入100ul终止液混匀。30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断所有OD值都应减除空白值后再行计算。以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。根据样品OD值在该曲线图上查出相应C-peptide含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的C-peptide检测浓度小于30pg/ml。特异性:可同时检测重组或天然的小鼠C-peptide。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。重复性:板内、板见变异系数均小于10.3%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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大鼠C-肽(C-peptide)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠C-肽(C-peptide)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠C-peptide单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的C-peptide与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠C-peptide,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,C-peptide浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中C-peptide浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。所有标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成4000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入4000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应C-peptide含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的C-peptide检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠C-peptide。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.3%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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大鼠C-反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断大鼠C-反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠C-反应蛋白(CRP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品(2400ng/mL)0.6mL0.6mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:2400、1200、600、300、150、75ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。[详细]
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2018-09-22 10:00
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山羊C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒说明书
- 山羊C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定山羊血清,血浆及相关液体样本中人C-反应蛋白(CRP)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中山羊C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的山羊C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中山羊C-反应蛋白(CRP)的含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:2250μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1500μg/L,1000μg/L,500μg/L,250μg/L,125μg/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:60μg/L-1800μg/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书
- 鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的鸡C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡C-反应蛋白(CRP)浓度。鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(1600μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。鸡C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2024-10-02 19:02
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人-内肽(-EP)ELISA试剂盒
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2013-12-06 00:00
实验操作
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小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒
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2013-12-09 00:00
实验操作
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人螺旋肽(THP)ELISA试剂盒
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2013-12-09 00:00
安装说明
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人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒
- 人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-05 00:00
操作手册
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人C肽elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C肽(C-Peptide)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C肽(C-Peptide)水平。用纯化的人C肽(C-Peptide)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C肽(C-Peptide),再与HRP标记的C肽(C-Peptide)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的C肽(C-Peptide)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C肽(C-Peptide)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
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小鼠C肽ELISA试剂盒说明书
- 小鼠C肽(C-Peptide)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中C肽(C-Peptide)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠C肽(C-Peptide)水平。用纯化的小鼠C肽(C-Peptide)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C肽(C-Peptide),再与HRP标记的C肽(C-Peptide)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的C肽(C-Peptide)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠C肽(C-Peptide)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-15 10:03
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人-内肽(-EP)ELISA试剂盒
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大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒
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ELISA试剂盒分析测试方法:大鼠(Rat)C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书
- 检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被C-反应蛋白(CRP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,Z终结果乘以5才是样本实际浓度。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、150、300、600、1200、2400ng/mL试剂的准备试剂的准备试剂的准备试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于10ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。[详细]
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2018-11-15 10:00
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小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒
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2013-12-09 00:00
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人型胶原螺旋肽(HELIX-)ELISA试剂盒
- 人型胶原螺旋肽(HELIX-)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
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人内肽-2(EM-2)ELISA试剂盒
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2013-12-06 00:00
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2013-12-09 00:00
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