人胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）ELISA试剂盒说明书

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

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• 人胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）ELISA试剂盒说明书

  人胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人IGF-1R单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IGF-1R与单抗结合，加入生物素化的抗人IGF-1R，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，IGF-1R浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IGF-1R浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：400ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成400ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入400ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-1R含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IGF-1R检测浓度小于0.3ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人IGF-1R。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)检测试剂盒

  大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)检测试剂盒[详细]

  2014-09-29 00:00

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• 人胰岛素样生长因子-1（IGF-1）ELISA试剂盒说明书

  人胰岛素样生长因子-1（IGF-1）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人IGF-1单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IGF-1与单抗结合，加入生物素化的抗人IGF-1，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，IGF-1浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IGF-1浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：200ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1：10-20稀释（取10ul，加标本稀释液190ul,稀释20倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成400ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入400ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-1含量，再乘上稀释倍数即可。4.根据以前实验室所做统计正常测定范围在4-60ng/ml之间。建议每个实验室自己建立正常测定范围。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IGF-1检测浓度小于0.3ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人IGF-1。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-05 00:00

  选购指南

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• 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-18 18:09

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• 人胰岛素样生长因子-1（IGF-1）说明书

  人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)说明书本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的含量。实验原理：本试剂盒应用夹心法测定标本中人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平。用纯化的人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)抗体包被微孔板，往微孔中依次加入胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)，再与HRP标记的胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)抗体结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)抗原浓度。人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)说明书样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)说明书试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围：10μg/L-200μg/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)说明书[详细]

  2018-10-23 10:30

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• 人胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGF-BP1）ELISA试剂盒说明书

  人胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGF-BP1）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人IGF-BP1单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IGF-BP1与单抗结合，加入生物素化的抗人IGF-BP1，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，IGF-BP1浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IGF-BP1浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：2.4ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。腹水1：10000倍稀释。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1：5倍稀释。血清、血浆至少做1：20倍稀释。2.标准品液配制：使用前加入0.3ml蒸馏水混匀，配成8000pg/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-BP1含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IGF-BP1检测浓度小于30pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人IGF-BP1。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

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• 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)检测试剂盒

  人胰岛素样生长因子1(IGF-1)检测试剂盒[详细]

  2024-09-22 23:59

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• 人胰岛素样生长因子-Ⅰelisa试剂盒操作方法

  人胰岛素样生长因子-Ⅰelisa试剂盒操作方法[详细]

  2015-05-14 00:00

  标准

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• 人胰岛素样生长因子Ⅰelisa试剂盒操作方法

  试剂盒组成120倍浓缩洗涤液30ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（240μg/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行实验。2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3．可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。[详细]

  2018-10-08 10:01

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• 鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-13 00:00

  应用文章

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• 猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-12 00:00

  操作手册

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• 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-08 00:00

  标准

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• 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  实验操作

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• 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

  小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒[详细]

  2013-11-15 00:00

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• 大鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）ELISA试剂盒

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com大鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠IGF-1单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IGF-1与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠IGF-1，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，IGF-1浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IGF-1浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：500ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1：10稀释（取20ul，加标本稀释液180ul,稀释10倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成1000ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-1含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IGF-1检测浓度小于1ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠IGF-1。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 胰岛素样生长因子ELISA试剂盒

  胰岛素样生长因子ELISA试剂盒[详细]

  2016-03-18 00:00

  专利

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• 人胰岛素样生长因子-2（IGF-2）ELISA试剂盒说明书

  人胰岛素样生长因子-2（IGF-2）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人IGF-2单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IGF-2与单抗结合，加入生物素化的抗人IGF-2，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，IGF-2浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IGF-2浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：2.4ug/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1：20稀释（取10ul，加标本稀释液190ul,稀释20倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.3ml蒸馏水混匀，配成8000ng/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入8000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-2含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IGF-2检测浓度小于30ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人IGF-2。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

  产品样册

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• 猪胰岛素样生长因子1（IGF-1）elisa试剂盒使用说明书

  猪胰岛素样生长因子1（IGF-1）elisa试剂盒使用说明书[详细]

  2014-02-27 00:00

  实验操作

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• 鸡胰岛素样生长因子1（IGF-1）ELISA试剂盒使用说明书

  鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平。用纯化的鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素样生长因子1(IGF-1)，再与HRP标记的胰岛素样生长因子1(IGF-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子1(IGF-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)浓度。鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（48μg/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液12μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-22 10:00

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