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用安捷伦 Bio-Monolith HPLC 柱快速监测噬菌体生产
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本文由 安捷伦科技（中国）有限公司 整理汇编
2024-09-28 11:20 471阅读次数
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20 世纪初发现的噬菌体是一类侵害细菌的病毒。现在，噬菌体已被作为KJ制剂，用于 噬菌体展示筛选、噬菌体载体开发，作为目标基因ZL的传递系统，以及用于特殊类细 菌分型等。为了在这些应用中使用噬菌体，通常要用液相色谱进行纯化，去除所有杂质。 Z近开发了一种使用离子交换整体柱的纯化和浓缩工艺[1]。宿主细胞增殖和裂解后， 噬菌体从其生长介质中释放出来。其它宿主成分和这些噬菌体一起，也释放到生长介质 中，其中就有会带来问题的宿主基因组 DNA(gDNA)，因为它不久将降解成更小的片段。 用离子交换色谱纯化噬菌体时，至关重要的是包含噬菌体的介质中不能含任何 DNA 片段。 游离 DNA 片段可能干扰体外噬菌体应用，噬菌体展示和细菌分型，可以给ZL噬菌体应 用、载体生产和基因传递带来毒性。安捷伦 Bio-Monolith DEAE 柱（弱阴离子交换）可用 于检测发酵过程，并评价整个纯化工艺中降解 gDNA 的量。
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用安捷伦 Bio-Monolith HPLC 柱快速监测噬菌体生产- 20 世纪初发现的噬菌体是一类侵害细菌的病毒。现在，噬菌体已被作为KJ制剂，用于 噬菌体展示筛选、噬菌体载体开发，作为目标基因ZL的传递系统，以及用于特殊类细 菌分型等。为了在这些应用中使用噬菌体，通常要用液相色谱进行纯化，去除所有杂质。 Z近开发了一种使用离子交换整体柱的纯化和浓缩工艺[1]。宿主细胞增殖和裂解后， 噬菌体从其生长介质中释放出来。其它宿主成分和这些噬菌体一起，也释放到生长介质 中，其中就有会带来问题的宿主基因组 DNA(gDNA)，因为它不久将降解成更小的片段。 用离子交换色谱纯化噬菌体时，至关重要的是包含噬菌体的介质中不能含任何 DNA 片段。 游离 DNA 片段可能干扰体外噬菌体应用，噬菌体展示和细菌分型，可以给ZL噬菌体应 用、载体生产和基因传递带来毒性。安捷伦 Bio-Monolith DEAE 柱（弱阴离子交换）可用 于检测发酵过程，并评价整个纯化工艺中降解 gDNA 的量。[详细]
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- 主要用途噬菌体培养试剂是一种旨在通过噬菌体特殊培养基，使敏感宿主细菌充分吸附具有毒力的P1噬菌体，获得繁殖的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于后续载体DNA萃取、克隆、转导、噬菌体展示技术等技术。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，噬菌体繁殖效价高。技术背景P1噬菌体（P1bacteriophage）是一种温和噬菌体（temperatebacteriophage），属于肌尾噬菌体科（Myoviridae）P1噬菌体属（P1-likeviruses），感染大肠杆菌和志贺氏菌属（Shigella）等肠内细菌（entericbacteria）。P1噬菌体是大肠杆菌噬菌体（coliphage）中Zda的一种。其基因组为闭环的双链DNA，由93601个碱基组成。基因组92%以上的序列可编码蛋白质，共有117个编码基因。原噬菌体（prophage）以自主质粒（autonomousplasmid）形式存在于宿主细胞后，拷贝数很低（1个拷贝/细胞）。P1载体常用于真核细胞DNA的体外包装和克隆，以及Cre-lox系统的基因工程的工具。P1vir，P1的毒力突变株可以进入裂解周期（xx，用于基因通用转导。[详细]
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生产用磁力搅拌反应釜使用说明书- 一、生产用磁力搅拌反应釜用途本装置系气液、液液、液固或气液固三相化工物料进行化学反应的化工单元操作设备之一，可使釜内介质在较高的压力和温度下使这些物料充分搅拌，以强化传质和传热过程。本釜的主要特点是以静密封取替了传统的填料密封和机械密封，从而实现整台反应釜在密封状态下工作。因此，更适合于各种有毒、易燃、易爆以及其它渗透力极强的化学介质进行搅拌反应，是石油化工、有机合成、制药、食品等工艺中进行硫化、氟化、氢化、氧化等反应Z理想设备。本设备按物料腐蚀性能，选择不同金属或非金属做防腐蚀材料，以防反应物料对釜体的腐蚀。在材质方面可加工纯不锈钢、碳钢、纯钛、纯镍、哈氏合金、锆、钽等贵重有色金属或喷涂四氟、特氟隆等。二、生产用磁力搅拌反应釜结构简介1、反应釜主要由釜体与釜盖两大部件组成：釜体用高强度的合金钢板或复合钢板卷制而成，其内侧一般衬以能承受介质腐蚀材料，其中以0Gr18Ni9、1Gr18Ni9Ti或00Gr17Ni14MO2等材料占多数，在内衬与釜体之间填充铅锑合金，以使导热和受力，也有直接用0Gr18Ni9Ti等材料单层制成。釜盖为平板或凸形封头，它也有高强度的合金钢或复合钢板制成，釜盖上开有进气口、加料口、测压口、安全防爆口等等不同口径的接管。釜体与釜盖之间装有密封垫片，通过主螺栓及主螺母使其密封成一体.2、磁力搅拌器：是由电机减速机驱动外磁钢体转动，外磁钢体通过磁力线带动密封罩体的内磁钢体转动，从而带动搅拌轴及搅拌桨叶转动，达到搅拌的目的。为了保证磁力搅拌器的正常运行，磁力搅拌器设有冷却水套，当使用时需在冷却水套之间通入冷却水来降低温度，确保磁力搅拌器的磁性材料不退磁。根据不同的反应介质选择不同的搅拌桨叶，达到充分搅拌釜内物料的作用。磁力搅拌器装置用高压法兰、螺钉与釜盖联接一体，中间由金属密封垫片或非金属垫片实现与釜盖静密封。传动装置用的电机或电机带减速机安装的两种形式：电机和磁力搅拌器用三角皮带联接侧面传动，另一种为电机带减速机直接驱动，结构简图参照网页。3、加热方式：可根据用户的要求选择不同的加热方式，如蒸汽加热、水浴循环加热、导热油循环或导热油电加热及远红外加热等。主要通过在釜体外焊接夹套，通入蒸汽、水循环、油循环，或在夹套中直接插入电加热管直接加热。或直接用远红外电加热等。4、安全与保护装置：A、磁力搅拌反应釜选用YB系列隔爆型三相异步电动机，以保护电机在易燃易爆工况下安全运转。B、釜盖上根据用户的需要，可以设置安全阀或安全爆破装置，当釜内压力超过规定压力时，安全阀会自动打开或爆破片爆破，自行降压，以保证设备的安全，应注意安全阀未经校准禁止使用，校正后加铅封。如用爆破片，必须有生产合格证才能使用。C、釜盖与釜体法兰上均备有衬里夹层排气小孔，如有渗漏，首先在此处查找，并及时采取措施。三、生产用磁力搅拌反应釜的安装及使用：1、釜体在运输和安装就位时，应避免碰坏釜盖上部的磁力搅拌器。反应釜操作间要求通风良好，且符合防爆要求。将设备安装于支架上，在四个支座上用斜铁找平，保持设备与地面的垂直。对反应介质易燃易爆的设备应安装防静电的接地装置，消除静电隐患。2、依据反应釜介质、设计压力和设计温度选用相匹配的密封垫片。釜体与釜盖、磁力搅拌器与釜盖、各管法兰间应装入密封垫片，并将螺栓重新上紧。上紧螺栓时应按对角分布原则，均匀地上紧螺栓，且应分2~3次拧紧，以防止螺栓上偏，损坏密封垫片影响密封效果。3、减速机的油箱加13号压缩机油或11号汽缸油，油位应加到规定的标记处，并应定期更换润滑油。4、如果是高温、高速磁力搅拌器，使用前要在轴承注油口加入润滑油，在以后的使用过程中应定期从注油孔加入润滑油。5、设备开机之前，在磁力搅拌器的外水套内通入冷却水，下端为进水口，上端为出水口，应使用单独的冷却水系统，不允许冷却水经釜内冷却盘管再进入磁力搅拌器的冷却水套。6、设备配套控制柜及变频调速器应放置于干燥、通风良好的单独设置的电气控制车间。7、点动电动机，观察釜内搅拌轴的正反转，如为反转重新调整电机的接线或调整变频调速器。8、设备搅拌转速大于80r/min时，电机不可直接在工作转速下启动，要通过变频器缓慢的将搅拌转速提高。否则搅拌器阻力过大，导致磁力搅拌器过载造成搅拌损坏或烧坏电机。9、上述工作完成后，按工作压力进行密封性试验，通入隋性气体保压15~30分钟，检查整体设备有无泄漏，如无泄漏方可投料生产。10、所有阀门在使用时，关闭不宜太猛，以免损坏密封面。11、投料后，压力上升须缓慢进行。同理，釜内降压时也应逐步减压。12、因反应釜的工作环境恶劣，会严重影响轴承、轴套的使用寿命，设备在正常运转时如发生异常磨擦声或振动声，说明轴承或轴套磨擦间隙过大，需马上更换。四、检修要领1、拆卸以前，首先应排尽釜内反应物料，并用对人体无害的气液介质清洗干净，以免釜内物料对拆卸人员造成人身伤害。2、定期检查下搅拌轴的摆动量，如果发现摆动量较大应马上拆开按照结构图更换轴承及轴套。磁力搅拌器所采用复合轴套或石墨轴套设计寿命为1~2年，为保证设备正常运转，建议每年更换一次。更多生产用磁力搅拌反应釜使用说明书的详细内容请看附件.....[详细]
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