天然质谱法对半胱氨酸连接的抗体 药物偶联物及其药物/抗体比率进行测定

本文由 安捷伦科技（中国）有限公司 整理汇编

2016-08-08 00:00 551阅读次数

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• 天然质谱法对半胱氨酸连接的抗体 药物偶联物及其药物/抗体比率进行测定

  本文以半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC) 为研究对象，使用天然质谱法，通过 Agilent 6530 Q-TOF LC/MS 检测 ADC 的完整分子量，并使用安捷伦 DAR 计算器软件 (Agilent DAR Calculator) 计算 ADC 的加权平均药物/抗体比率(Drug to Antibody Ratio,DAR)。[详细]

  2016-08-08 00:00

  专利

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• 抗体药物偶联物 (ADC) 的药物/抗体比率 (DAR) 计算

  抗体药物偶联物 (ADC) 是制药公司药物开发途径中快速发展的一类新型生物ZL药物。ADC 的制备方法是通过化学方法将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体相连。ADC 通过结合 GX细胞毒性药物与靶标特异性抗体将细胞毒性药物直接送达病变组织，同时限制药物在非 目标组织中的毒性。 药物/抗体比率 (DAR) 是抗体所连接药物数量的平均值，它是 ADC 的重要属性。由于低载药 量会降低效力，而高载药量则会对药代动力学 (PK)1 和毒性产生负面影响，因此 DAR 值能够 对药效产生影响。目前的偶联化学方法有赖氨酸侧链酰胺化或半胱氨酸链间二硫键还原，载 药量通常为 0 ~ 8 个药物分子 (D0 ~ D8)/抗体。[详细]

  2020-05-08 14:50

  应用文章

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• UHPLC/Q-TOF 联用系统测定抗体药 物偶联物 (ADC) 的药物/抗体比率 (DAR)

  本文以半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC) 为研究对象，使用连接 PLRP-S 反相液相色谱柱的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统分离还原的轻链、重链和相对应连接药物的轻重链，并通过 Agilent 6530 高分辨率四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统对各个色谱峰进行鉴定。通过积分处理紫外吸收图谱中各轻重链的峰面积百分比，结合各个峰的偶联药物数目，计算 ADC 的加权平均药物/抗体比率 (Drug to Antibody Ratio, DAR)。同时使用了安捷伦 DAR 计算器 (Agilent DARCalculator) 对质谱解卷积结果进行 DAR 值计算，所得结果与紫外吸收图谱计算所得结果相同。[详细]

  2024-09-20 13:30

  选购指南

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• 疏水色谱法对抗体偶联药物的DAR分析

  疏水色谱法对抗体偶联药物的DAR分析[详细]

  2014-10-10 00:00

  操作手册

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• Orbitrap高分辨质谱在抗体偶联药物质量分析中的应用

  根据抗体偶联药物的偶联方式可分为非靶向共价偶联（如赖氨酸的氨基偶联）、半胱氨酸巯基偶联（重链间靠非共价键结合）、定点氨基酸共价偶联、N- 糖基化偶联。[详细]

  2025-08-12 15:43

  产品样册

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• Agilent 6530 Q-TOF 对单克隆抗体 药物的二硫键连接进行确认

  本文介绍了使用 Agilent 6530 Q-TOF 采集肽段数据，采用整合有 BioConfirm 的 MassHunter 定性软件，通过软件中的蛋白酶解产物比较功能 (Compare Protein Digest Files)，实现了对单克隆抗体药物中二硫键连接的确证。此方法无需对样品进行额外的标记，仅通过对还原和非还原组样品的一级质谱进行比对，即可实现对样品二硫键连接的确认。[详细]

  2024-09-20 03:43

  实验操作

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• 药物溶出度的测定方法及其进展

  药物溶出度的测定方法及其进展[详细]

  2007-03-04 00:00

  产品样册

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• SFE在天然药物方面的应用

  SFE在天然药物方面的应用[详细]

  2024-09-26 01:25

  课件

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• 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体试剂盒使用方法

  检测范围：96T20pg/ml-480pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)水平。用纯化的人抗双链DNA/天然DNA(dsDNA)抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)，再与HRP标记的人抗双链DNA/天然DNA(dsDNA)抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（960pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]

  2018-10-03 10:00

  产品样册

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• 天然药物成分常用提取分离系统介绍

  [详细]

  2020-04-26 17:54

  应用文章

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• 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒

  大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  其它

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• 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒

  人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒[详细]

  2015-03-12 00:00

  操作手册

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• 液相色谱仪在天然药物及成药分析中的应用

  液相色谱仪在天然药物及成药分析中的应用[详细]

  2015-08-12 00:00

  操作手册

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• 药物对人体Na+/Ca2+交换剂的影响及其对药物开发的意义

  所有的动物蛋白都能催化Ca2+:Na+交换，尽管有些也能运输K+。NCX质膜蛋白用3个na +交换个1ca2 +。哺乳动物的Na+/Ca2+交换器有三种亚型NCX1-3，它们的相似度约为70%[详细]

  2021-03-01 09:40

  应用文章

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• DSC药物晶型的测定

  DSC药物晶型的测定[详细]

  2024-09-14 23:12

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• 药物辅料硬脂酸镁的比表面积测定

  药物辅料硬脂酸镁的比表面积测定[详细]

  2024-09-28 00:31

  产品样册

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• 人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒

  人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-17 00:00

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  人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)检测试剂盒[详细]

  2024-09-18 18:06

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• 药物解决方案

  药物解决方案[详细]

  2024-09-23 13:54

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