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GB10267.4-1988 金属钙分析方法 8-羟基喹啉-萃取分光光度法测定铝
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GB10267.4-1988金属钙分析方法8-羟基喹啉-萃取分光光度法测定铝
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GB10267.4-1988 金属钙分析方法 8-羟基喹啉-萃取分光光度法测定铝
- GB10267.4-1988金属钙分析方法8-羟基喹啉-萃取分光光度法测定铝[详细]
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2024-09-29 00:09
产品样册
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金属钙分析方法萃取分光光度法测定铝[1]
- GB10267.4-1988金属钙分析方法萃取分光光度法测定铝[1][详细]
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2018-08-24 10:00
产品样册
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8-氢氧化喹啉参数报告
- 8-氢氧化喹啉参数报告性状:白色或浅黄色结晶或结晶性粉末。露光变黑。有石炭酸气味。易溶于乙醇、氯仿、苯和矿酸,几乎不溶于水。熔点76℃。沸点约267℃。半数致死量(小鼠,腹腔)48mG/kG。8-氢氧化喹啉参数报告用途:生化研究。沉淀和分离金属离子的沉淀剂和萃取剂,能与下列金属离子络合:Cu+2、Be+2、Mg+2、Ca+2、Sr+2、Ba+2、Zn+2、Cd+2、Al+3、Ga+3、In+3、Tl+3、Yt+3、La+3、Pb+2、B+3、Sb+3、Cr+3、MoO+22、Mn+2、Fe+3、Co+2、Ni+2、Pd+2、Ce+3、Pr+3。有机微量分析测定杂环氮的标准。有机合成。保存:RT,避光英文名称:8-Hydroxyquinoline;Oxyquinoline;Oxine;Quinophenol;8-Quinolinone;Hydroxybenzopyridine;Oxybenzopyridine;Phenopyridine;Oxychinolin其他名称:8-氢氧化喹啉;8-羟基氮(杂)萘;邻羟基氮(杂)萘;8-羟基氮萘;喔星;8-羟基氮杂萘CAS号:148-24-3C9H7NO=145.16级别:AR含量:≥99.5%熔点:73.0~74.5℃氯化物:≤0.002%硫酸盐:≤0.01%对镁灵敏度试验:合格乙酸溶解试验:合格灼烧残渣:≤0.02%8-氢氧化喹啉参数报告糖皮质激素受体αelisa原理,大鼠GR-α/elisa步骤说明抗生素检定培养基系列鸡α干扰素elisa原理,(IFN-α)elisa步骤说明鸭白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒猪血管内皮钙粘着蛋白复合体实验步骤(VE-cad)elisa技术开发小鼠β淀粉样蛋白1-40elisa原理,小鼠Aβ1-40/elisa步骤说明猪基质金属蛋白酶YZ因子1elisa原理,猪TIMP-1/elisa步骤说明大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒人心肌营养素1elisa原理,人CT-1/elisa步骤说明大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒[详细]
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2018-10-23 10:30
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三溴偶氮胂分光光度法测定钙
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2024-09-23 13:55
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铝及铝合金钙含量的测定
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2024-09-19 03:56
专利
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人(human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OH-DG)说明书
- 人(human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OH-DG)本试剂盒仅供研究使用标本:血清或血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1块2~8℃干燥保存酶标偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存标准品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色剂A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色剂B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存终止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液(RinsingBufferx20)1瓶60.0毫升2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液(Diluentx5)1瓶15.0ml2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、注意事项1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。2.使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低极ng确度,造成吸光度偏离的假像。7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水119倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水14倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)四、操作步骤1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。8、将96孔板置于37℃温育30分钟。9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上,450nm处测定OD;显色后,15分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线,计算样本含量五、结果判断1.仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;2、检测值范围:0-80ng/ml3、敏感度:0.5ng/ml[详细]
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2018-09-14 10:01
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化妆品中羟基喹啉的检测 方法参照CFDA公布标准
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2024-09-29 07:42
操作手册
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水质 钙和镁的测定 原子吸收分光光度法
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2006-04-11 00:00
实验操作
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大鼠8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠8-OHdG单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的8-OHdG与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠8-OHdG,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,8-OHdG浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中8-OHdG浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。所有标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应8-OHdG含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的8-OHdG检测浓度小于30pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠8-OHdG。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒
- 细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)比色法测定试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)比色法测定试剂是一种旨在使用单克隆抗8-羟基脱氧鸟苷抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗,通过染料四甲基联苯胺染色显示蓝色,即通过比色法定量评价DNA损伤水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞(动物、人体等)的8-羟基脱氧鸟苷的定量分析。广泛用于细胞衰老、细胞凋亡、肿瘤等的研究。产品严格无菌,即到即用,反应敏感,操作简捷,性能稳定,显色清晰。技术背景核酸氧化损伤(nucleotideoxidativedamage),包括DNA和RNA损伤,是由于环境因子或细胞代谢影响,在逃避细胞防御机制的前提下,所产生的四种损伤之一:氧化、烷化(alkylation)、水解和碱基错配损伤等。而氧化损伤主要通过活性氧族(reactiveoxygenspecies;ROS),包括超氧自由基阴离子(superoxideradical;O2-)、过氧化氢(hydrogenperoxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxylradical;OH-)、过氧化基(peroxylradical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitriteanion;ONOO-)等的作用,使碱基羟基化和嘌呤环裂开,诱导鸟嘌呤(guanine;G)向胸腺嘧啶(thymine;T)的颠换(transversion),造成体细胞基因突变,影响细胞周期、基因转录、细胞凋亡等,Z终导致各种疾病的发生,例如糖尿病、高血压、中风、癌症、衰老等。其中核酸损伤产物8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine;8-OHdG)作为DNA损伤的分子标志;8-羟基鸟苷(8-hydroxyguanosine)作为RNA损伤的分子标志。8-羟基脱氧鸟苷是Z常见的DNA损伤产物,也是氧化应急的生物标志。四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)是过氧化物酶(Peroxidase)的生色底物,在过氧化物酶的催化下,电子供体TMB底物在过氧化氢氧化下失去电子,产生游离自由阳离子单电子氧化产物,在pH4.9条件下,呈现出颜色变化和沉积,形成蓝色沉淀产物,且不受乙醇影响。被用于检测标记过氧化物酶的活性,灵敏度高,特异性好。[详细]
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2018-11-08 10:00
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铬天青 S 分光光度法测定生活饮用水中铝的方法探讨
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2024-02-27 10:10
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2015-03-20 00:00
期刊论文
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人8-羟基脱氧鸟苷酸ELISA检测试剂盒操作说明
- 人(Human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:细胞培养上清液试验原理:8-OHDG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHDG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将8-OHDG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHDG的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗8-OHDG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型人(Human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA检测试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。人(Human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA检测试剂盒操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人(Human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的8-OHDG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的8-OHDG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[详细]
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2018-09-19 10:00
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ELISA试剂盒8-羟基喹哪啶的使用方法
- ELISA试剂盒生化试剂8-羟基喹哪啶按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等;按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。A88138大肠杆菌显色培养基13.5×15cm/张A88139大肠菌群显色培养基15×20cm/张RTA881408-羟基喹哪啶大肠杆菌&大肠菌群显色培养基30×3cm/卷A88141TBX培养基100张/盒A88142细菌总数显色培养基50张/盒A88143O157显色培养基50张/盒A88144沙门氏菌显色培养基100张/盒A88145李斯特氏菌显色培养基1卷RTA88146金黄色葡萄球显色培养基100张/包RTA88147霉菌和酵母菌显色培养基200张/盒RTA88148弧菌显色培养基200张/盒A88149坂崎杆菌显色培养基200张/盒A88150尿道定位显色培养基200张/盒A88151假单胞分离肉汤200张/盒A88152肌醇测定培养基200张/盒A88153烟酸测定培养基50张/盒A88154维生素B12测定用培养基50张/盒A88155叶酸测定培养基50张/盒A88156泛酸测定培养基50张/盒ELISA试剂盒A88157游离生物素测定培养基50张/盒A88158气单胞菌培养基基础50张/盒A88159气单胞菌培养基添加剂100张/盒A88160支原体培养基基础100张/盒[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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人(Human) 8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA 检测试剂盒
- 人(Human)8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHDG)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:细胞培养上清液试验原理:8-OHDG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHDG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将8-OHDG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHDG的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:400ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗8-OHDG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:400ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200ng/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25ng/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5ng/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/ml)A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的8-OHDG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的8-OHDG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-400ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[详细]
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