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人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒说明书
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本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编
2018-09-13 10:01 227阅读次数
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人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Elastase单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Elastase与单抗结合,加入生物素化的抗人Elastase,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Elastase浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Elastase浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):400ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入2ml蒸馏水混匀,配成200ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Elastase含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Elastase检测浓度小于0.15ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Elastase。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
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人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒说明书
- 人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Elastase单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Elastase与单抗结合,加入生物素化的抗人Elastase,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Elastase浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Elastase浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):400ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入2ml蒸馏水混匀,配成200ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Elastase含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Elastase检测浓度小于0.15ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Elastase。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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牛弹性蛋白酶(Elastase)说明书
- www.biokanu.com牛弹性蛋白酶(Elastase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中弹性蛋白酶(Elastase)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛弹性蛋白酶(Elastase)水平。用纯化的牛弹性蛋白酶(Elastase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入弹性蛋白酶(Elastase),再与HRP标记的弹性蛋白酶(Elastase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶(Elastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛弹性蛋白酶(Elastase)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:54U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为36U/L,24U/L,12U/L,6U/L,3U/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:1U/L-45U/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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牛弹性蛋白酶 (Elastase)说明书间接法
- www.biokanu.com牛弹性蛋白酶(Elastase)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中弹性蛋白酶(Elastase)的含量。实验原理本试剂盒应用间接法测定标本中牛弹性蛋白酶(Elastase)水平。用纯化的牛弹性蛋白酶(Elastase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的弹性蛋白酶(Elastase)标准品和未知浓度的弹性蛋白酶(Elastase)待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶(Elastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛弹性蛋白酶(Elastase)浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶8标准品S1(36U/L)0.5ml×1瓶2链霉亲和素-HRP6ml×1瓶标准品S2(24U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条标准品S3(12U/L)0.5ml×1瓶4生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1瓶标准品S4(6U/L)0.5ml×1瓶5显色剂A液6ml×1瓶标准品S5(3U/L)0.5ml×1瓶6显色剂B液6ml×1/瓶9说明书1份7终止液6ml×1瓶10封板膜2张标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融操作步骤根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl,在样本反应孔中加入50微升样本,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。加生物素标记的抗-IgG抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。37℃温育30分钟洗涤:操作同4。加链霉亲和素-HRP:每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。洗涤:操作同4。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数(×5×n)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。线形范围:1U/L-45U/L规格:96人份/盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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牛弹性蛋白酶(Elastase)说明书间接法
- www.biokanu.com牛弹性蛋白酶(Elastase)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中弹性蛋白酶(Elastase)的含量。实验原理本试剂盒应用间接法测定标本中牛弹性蛋白酶(Elastase)水平。用纯化的牛弹性蛋白酶(Elastase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的弹性蛋白酶(Elastase)标准品和未知浓度的弹性蛋白酶(Elastase)待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶(Elastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛弹性蛋白酶(Elastase)浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶8标准品S1(36U/L)0.5ml×1瓶2链霉亲和素-HRP6ml×1瓶标准品S2(24U/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条标准品S3(12U/L)0.5ml×1瓶4生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1瓶标准品S4(6U/L)0.5ml×1瓶5显色剂A液6ml×1瓶标准品S5(3U/L)0.5ml×1瓶6显色剂B液6ml×1/瓶9说明书1份7终止液6ml×1瓶10封板膜2张标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融操作步骤1.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl,在样本反应孔中加入50微升样本,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。3.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用4.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。5.加生物素标记的抗-IgG抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。37℃温育30分钟6.洗涤:操作同4。7.加链霉亲和素-HRP:每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。8.洗涤:操作同4。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数(×5×n)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。线形范围:1U/L-45U/L规格:96人份/盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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人中性粒细胞弹性蛋白酶elisa试剂盒说明书
- 人中性粒细胞弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0pg/ml-160pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中中性粒细胞弹性蛋白酶含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性粒细胞弹性蛋白酶水平。用纯化的人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞弹性蛋白酶,再与HRP标记的中性粒细胞弹性蛋白酶抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的中性粒细胞弹性蛋白酶呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人中性粒细胞弹性蛋白酶浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月标本收集方法:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3.尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。人中性粒细胞弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒48T1200元,96T2200元上海恒远生物科技有限公司专业elisa试剂盒生产商,elisa试剂盒dai理商,elisa试剂盒批发,本公司试剂盒种类齐全,包括人、大鼠、小鼠、兔、羊、马、牛、豚鼠、猴、鱼、植物、食品等,近千种试剂盒已经投入市场,被广大科研工作者所使用,备受客户的青睐如需了解elisa试剂盒价格及产品更多详细说明,请来电咨询:021-60520498手机13636351217何经理[详细]
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2018-11-16 10:02
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人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒
- 人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-27 23:54
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半价销售人弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.5U/L-16U/L人弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人粪样本中弹性蛋白酶(Elastase)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人弹性蛋白酶(Elastase)水平。用纯化的人弹性蛋白酶(Elastase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入弹性蛋白酶(Elastase),再与HRP标记的弹性蛋白酶(Elastase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶(Elastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人弹性蛋白酶(Elastase)浓度。试剂盒组成人弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。人弹性蛋白酶酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-05 10:00
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猪多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN Elastase)酶联免疫分析
- 猪多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)水平。用纯化的猪多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase),再与HRP标记的多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)浓度。[详细]
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2018-12-30 10:00
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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒
- 大鼠乙酰胆碱(nACh)ELISA试剂盒[详细]
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2018-09-13 10:00
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小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒
- 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 23:56
专利
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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒
- 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-23 22:48
选购指南
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小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒说明书
- 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T3g/L-160g/L小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。用纯化的人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),再与HRP标记的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(320g/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160g/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液80g/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液40g/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液20g/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液10g/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-09 10:00
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猪抗中性粒细胞弹性蛋白酶抗体(ANEA)ELISA试剂盒
- 猪抗中性粒细胞弹性蛋白酶抗体(ANEA)ELISA试剂盒[详细]
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2015-07-24 00:00
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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶 NE ELISA试剂盒实验原理
- 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶 NE ELISA试剂盒实验原理
本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。[详细]
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2022-10-13 11:44
应用文章
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中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒
- 中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒[详细]
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2015-06-19 00:00
应用文章
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人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒
- 人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
应用文章
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人钙蛋白酶(calpain)ELISA试剂盒使用说明书下载
- 人钙蛋白酶(calpain)ELISA试剂盒使用说明书下载实验目的:本试剂盒仅供研究使用,用于测定人血清,血浆及相关液体样本中钙蛋白酶(calpain)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙蛋白酶(calpain)水平。用纯化的人钙蛋白酶(calpain)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙蛋白酶(calpain),再与HRP标记的钙蛋白酶(calpain)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的钙蛋白酶(calpain)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人钙蛋白酶(calpain)浓度。试剂盒组成:参照说明书试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围:5ng/L-150ng/L试剂盒保存:2-8℃有效期:6个月注:本产品仅供科研实验使用,具体产品信息请来电或在线方式咨询。上海道壹生物科技有限公司ShanghaiDaoYiBio-technologyCo.,Ltd[详细]
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2018-11-15 10:00
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