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人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析
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本文由 上海易利生物科技有限公司 整理汇编
2018-12-30 10:00 672阅读次数
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人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20ng/ml-480ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入MMP-2,再与HRP标记的MMP-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)浓度。
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人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析
- 人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20ng/ml-480ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入MMP-2,再与HRP标记的MMP-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)浓度。[详细]
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2018-12-30 10:00
产品样册
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人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人MMP-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的MMP-2与单抗结合,加入生物素化的抗人MMP-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,MMP-2浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中MMP-2浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):200ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液、尿液、唾液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清或血浆测定前用标本稀释液至少作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成200ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应MMP-2含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的MMP-2检测浓度小于0.15ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人MMP-2。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人基质金属蛋白酶-2酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T使用目的:20μg/L-480μg/L本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入MMP-2,再与HRP标记的MMP-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)浓度。试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
产品样册
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人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit说明书
- 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
操作手册
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大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA
- 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA[详细]
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2024-09-28 15:50
产品样册
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人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)酶联免疫分析
- 人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)酶联免疫分析[详细]
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2015-06-04 00:00
专利
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兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒
- 兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-13 00:00
安装说明
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细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性免疫捕获定量检测试剂盒
- 主要用途细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性免疫捕获定量检测试剂是一种旨在通过使用MMP-2特异性抗体捕获样品中的MMP-2抗原蛋白,识别并切离人工合成含硫多肽,释放出巯基,进而使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体)样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellularmatrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissueresorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类:(1)胶原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖;(2)明胶酶(Ⅳ型胶原酶):MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维;(3)基质溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金属蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs,当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成,合成的MMPs以无活性的酶原(proenzyme)形式分泌到细胞外,随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活,一种激活的MMPs可激活另一种MMPs,形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2,又称明胶酶A(gelatinase-A)或IV型胶原酶(typeIVcollagenase),其前体分子量为XX,激活后分子量为XX和XX。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白(collagens)、纤维连接蛋白(fibronectin)、弹性纤维蛋白(elastin)、层粘连蛋白-5(laminin-5)、前体肿瘤坏死因子-α(pro-TNF-α)和神经(蛋白)聚糖(neurocan)。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基质金属蛋白酶2的活性检测通过使用MMP-2特异性抗体涂板在孔板里的相应孔里,然后捕获样品中的MMP-2抗原蛋白,在胶原酶潜酶活化剂醋酸氨基苯汞(4-aminophenylmercuricacetate;APMA)的存在下,识别并切离人工合成含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,释放出巯基(sulfhydrylgroup),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量测定组织基质金属蛋白酶2的特异活性。其反应系统为:[详细]
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2018-11-08 10:00
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大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A) elisa试剂盒说明书
- 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A) elisa试剂盒说明书[详细]
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2024-10-08 05:29
应用文章
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上海沪峰为您提供人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)说明书
- 上海沪峰生物科技有限公司是一家集经销批发、招商代理的有限责任公司,是一家经国家相关部门批准注册的企业。主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、毒素、移液器等产品,产品畅销国内大部分地区,销售额逐年稳步提高。上海沪峰生物科技拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,与国内多家企业建立了良好的长期合作关系,在市场上树立了公司的良好信誉和形象。公司主要产品涉及:ELISA试剂盒,生物试剂,血清,抗体,耗材。检测试剂:免疫检测、基因检测、化学检测、临床批文原料试剂:抗原抗体、分子生物、生化试剂、细胞工程、医用原料消耗材料:生物耗材、医用耗材、书籍软件服务维修:技术服务、设备维修[详细]
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2024-09-28 07:04
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人基质金属蛋白酶-3酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T5g/L-150g/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-3(MMP-3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-3(MMP-3),再与HRP标记的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-3(MMP-3)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(240g/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-03 10:00
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人基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T使用目的:45μg/L-1200μg/L本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平。用纯化的人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-9(MMP-9),再与HRP标记的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)浓度。试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-04 10:00
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人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒
- 人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-28 16:54
期刊论文
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人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)检测试剂盒
- 人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 11:52
选购指南
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人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒
- 人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-23 20:50
操作手册
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马基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 马基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T2μg/L-90μg/L使用目的:本试剂盒用于测定马血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平。用纯化的马基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入基质金属蛋白酶-9(MMP-9),再与HRP标记的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中马基质金属蛋白酶-9(MMP-9)浓度。马基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。马基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。马基质金属蛋白酶-9酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-14 10:00
产品样册
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人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA Kit说明书
- 人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
课件
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人基质金属蛋白酶YZ剂-2(TIMP-2)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人基质金属蛋白酶YZ剂-2(TIMP-2)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TIMP-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TIMP-2与单抗结合,加入生物素化的抗人TIMP-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,TIMP-2浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TIMP-2浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液、尿液、腹水、唾液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆测定前用标本稀释液至少作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应TIMP-2含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的TIMP-2检测浓度小于0.1ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人TIMP-2。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人基质金属蛋白酶ELISA检测试剂盒
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2024-09-16 11:47
课件
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人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)ELISA分析试剂盒原装
- 人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)ELISA分析试剂盒原装[详细]
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2015-04-20 00:00
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