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人5-羟色胺受体elisa试剂盒使用方法
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本文由 上海易利生物科技有限公司 整理汇编
2018-10-01 10:00 277阅读次数
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本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20ng/L-500ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中5-羟色胺受体(5-HTR)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人5-羟色胺受体(5-HTR)水平。用纯化的人5-羟色胺受体(5-HTR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺受体(5-HTR),再与HRP标记的5-羟色胺受体(5-HTR)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-羟色胺受体(5-HTR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人5-羟色胺受体(5-HTR)浓度。
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人5-羟色胺受体elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T20ng/L-500ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中5-羟色胺受体(5-HTR)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人5-羟色胺受体(5-HTR)水平。用纯化的人5-羟色胺受体(5-HTR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺受体(5-HTR),再与HRP标记的5-羟色胺受体(5-HTR)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-羟色胺受体(5-HTR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人5-羟色胺受体(5-HTR)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
产品样册
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人5-羟色胺转运蛋白elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T11pg/ml-400pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)水平。用纯化的人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺转运蛋白(5-HTT),再与HRP标记的5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)浓度。[详细]
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2018-12-30 10:00
产品样册
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大鼠5-羟色胺受体2C(HTR2C)ELISA试剂盒
- 大鼠5-羟色胺受体2C(HTR2C)ELISA试剂盒[详细]
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2016-08-01 00:00
产品样册
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5-羟色胺受体1A抗体
- 产品中文名称:5-羟色胺受体1A抗体英文名称:Anti-5-HTR1A(5-HT1A(5-hydroxytryptamine/serotoninreceptor1A;5HT1a;ADRBRL1;ADRB2RL1;HTR1A)产品规格:100ug,200ug产品浓度:1mg/ml产品价格:电询,021-62217165,18717813312产品类型:一抗抗体抗体来源:Mouse,Rabbit克隆类型:Monoclonal,Polyclonal交叉反应:Mouse,Rat,Human等等。(更多交叉反应种属,电询。)性状:LyophilizedorLiquid纯化方法:AffinitypurifiedbyProteinA产品应用:IP=1:20-100,ELISA=1:1000-5000,WB=1:100-1000,IHC-Fr=1:100-500IHC-P=1:100-500,ICC/IF=1:100-500(具体应用方法,电询。)保存:-20°5-羟色胺受体1A抗体抗体的溶解方法:1:用移液器加0.1ml双蒸水到试管内,混匀,-20℃保存。若为其它规格(如:0.2ml)的冻干粉抗体,则加与标签上规格一致的(如:0.2ml)双蒸水溶解,混匀,-20℃保存。2:用移液器加0.05ml(规格的50%)双蒸水到试管内,再加0.05ml(规格的50%)的甘油到试管内,混匀,-20℃保存;若为其它规格(如:0.2ml)的冻干粉抗体,则加标签上规格的50%(如:0.1ml)双蒸水,再加标签上规格的50%(如:0.1ml)甘油溶解,混匀,-20℃保存。抗体的溶解要求:抗体溶解后,将其分装成5-10支(以0.1ml抗体为例,20ulx5支或10ulx10支),-20℃保存,用一支取一支,避免反复冻溶。另:预试验可做几个梯度1:100、1:200、1:400稀释,如果背景高,还可再稀释,选一个**的稀释比例,再正式做,效果**。5-羟色胺受体1A抗体QuantitySize:100ug(1mg/ml,Constituents:0.01MPBS,pH7.4with10mg/mlBSAand0.1%Sodiumazide.Reconstitutewith0.1mlsteriledistilledwater.)Productname:Anti-5-HTR1AantibodyDescription:Rabbitpolyclonalto5-HTR1ATestedapplications:IP,ELISA,WB,IHC-Fr,IHC-P,ICC/IFSpeficity:RabbitpolyclonalIgG,affinitypurifiedbyProteinA.Reactswith:Mouse,Rat,Chicken,Humanandsoon.Predictedmolecularweight:Application:IP=1:20-100,ELISA=1:1000-5000WB=1:100-1000,IHC-Fr=1:100-500IHC-P=1:100-500,ICC/IF=1:100-500notyettestedinotherapplications.optimaldilutions/concentrations首ldbedeterminedbytheenduser.Storage:Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20°C.WhenreconstitutedinsterilepH7.40.01MPBSordiluentofantibodytheantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.ImportantNote:Thisproductassuppliedisintendedforresearchuseonly,notforuseinhuman,therapeuticordiagnosticapplications.[详细]
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2018-10-19 10:00
产品样册
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5-羟色胺
- 5-羟色胺[详细]
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2024-10-08 05:22
报价单
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人gp2b3a受体elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.3pg/ml-15pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中gp2b3a受体含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人gp2b3a受体水平。用纯化的人gp2b3a受体抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入gp2b3a受体,再与HRP标记的gp2b3a受体抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的gp2b3a受体呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人gp2b3a受体浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
产品样册
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小鼠5-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒说明书
- 小鼠5-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒说明书[详细]
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2015-05-20 00:00
其它
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小鼠5-羟色胺转运体蛋白(SERT)ELISA试剂盒
- 小鼠5-羟色胺转运体蛋白(SERT)ELISA试剂盒检测范围:96T3.5ng/L-160ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中5-羟色胺转运体蛋白(SERT)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠5-羟色胺转运体蛋白(SERT)水平。用纯化的小鼠5-羟色胺转运体蛋白(SERT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺转运体蛋白(SERT),再与HRP标记的5-羟色胺转运体蛋白(SERT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-羟色胺转运体蛋白(SERT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠5-羟色胺转运体蛋白(SERT)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-12-06 10:00
产品样册
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河蟹5-羟色胺(5-HT)elisa检测试剂盒说明书
- 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中河蟹5-羟色胺(5-HT)水平。用纯化的河蟹5-羟色胺(5-HT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺(5-HT),再与HRP标记的5-羟色胺(5-HT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的5-羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中河蟹5-羟色胺(5-HT)浓度。河蟹5-羟色胺(5-HT)elisa检测试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(640pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。河蟹5-羟色胺(5-HT)elisa检测试剂盒操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液160pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液80pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液40pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液20pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。河蟹5-羟色胺(5-HT)elisa检测试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2024-09-29 06:43
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5-羟色胺ELISA Kit使用说明书
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羟色胺ELISAKit使用说明书(德国IBL:RE59121)1、应用范围此试剂盒可用于人血清、血浆、血小板和尿液中五羟色胺的体外定量检测。进一步的研究表明:此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究。2、前言说明五羟色胺是色氨酸代谢的中间产物,它主要存在于肠嗜铬细胞、血清素激活的神经元和血小板中,它已被确定为是神经系统的一种神经递质。循环血液中的五羟色胺几乎都集中于血小板内。循环五羟色胺浓度的变化可反映出人体的一些病理变化,这些病理变化包括:慢性肌紧张性头痛、精神分裂症、高血压、舞蹈症、杜氏肌肉萎缩症和早期急性阑尾炎。血清五羟色胺的检测对类癌综合征的检测具有重要临床意义。人们预计:在不久的将来,人们对血小板内五羟色胺的研究兴趣(包括五羟胺的吸收及释放动力学研究)应该会不断增长。3、实验原理样品准备(将五羟色胺转变为N-乙酰五羟色胺)是样品的稀释的一部分,将每一份样品分别于酰化试剂一起温育就可以得到酰化的五羟色胺。此实验采用的是竞争性ELISA的原理,生物素标记的和非生物素标记的抗原竞争性结合到一定数量的抗体结合位点上。Z后,结合到抗体上的生物素标记抗原的量于样品中被分析物的浓度成反比。当反应系统达到平衡后,洗板除去未结合的生物素标记抗原,用抗生物素碱性磷酸酶做标记、对硝基苯磷酸做底物来检测结合到抗体上的生物素标记抗原的量。用已知标准品做一条标准曲线,将未知样品的酶活性在标准曲线上进行定标就可以得到未知样品中五羟色胺的浓度。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃,避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。打开了的试剂盒在有效期内稳定,前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意有些食物会含有一定量的五羟色胺,另外,有些药物也会刺激五羟色胺的释放,从而导致五羟色胺的浓度升高。病人应当禁食富含五羟色胺的食物,如:阿司匹林、促肾上腺皮质激素、MAOYZ剂、phenazetin、儿茶酚氨、利血平和烟碱。血清注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸血和脂血样品。如果样品出现混浊,则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存18-25℃2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。稳定性2小时6小时3个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h内的所有尿液,之后将其加入到10-15ml6N的HCl防腐剂中。确定用于结果结算的总体积。使用前请将所有样品混合并离心。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融。稳定性6个月血浆、血小板98%以上的循环五羟色胺都位于血小板内,在血液凝集时就可以释放出来。用静脉穿刺的方法将全血收集到含EDTA或柠檬酸的塑料试管中(如10mlMonovetteNC试管中加入1ml柠檬酸溶液)。室温下,将全血样品以200×g的速率离心10分钟得到富含血小板的血浆(PRP)。将PRP-上清转移到另一试管中。为了获得血小板乳糜微粒,我们将200ulPRP(350000~500000个血小板/ul)加入到800ul生理盐水中,之后4℃下以4500×g的速率离心10分钟(或4℃下10000×g的速率离心2分钟)。离心后弃取上清。在血小板乳糜微粒中加入200ul双蒸水,之后样品就可以在-20℃以下的环境下冻存数周了。将冻融的样品在室温下以1000×g的速率离心2分钟。整个实验需要使用20ul上清液(见酰化)。如果您想测无血小板血浆(PFP)中五羟色胺的浓度,我们可以将PRP在4℃以4500×g的速率离心10分钟(或4℃下10000×g的速率离心2分钟)就可以获得无血小板血浆(PFP)。游离五羟色胺的ELISA实验要使用50ul上清液(见酰化)。注意:PRP中五羟色胺的直接检测实验表明:大约10%的PRP样品可以检测到不可预知的高浓度五羟色胺(结果用GX液相层析和流氏细胞术获得)。为了避免这种差异性,我们建议您即检测血小板中五羟色胺,也检测无血小板血浆中的五羟色胺。无血小板血浆血小板微粒(从血浆中分离得到)避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。储存≤-20℃≤-20℃≤-80℃稳定性2周4周1年组织匀浆和细胞培养上清使用组织匀浆和细胞培养上清作样品,一般无特殊注意事项注意:细胞培养基可能含有一定量的五羟色胺!储存≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融。稳定性6个月6、试剂盒成分注意试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分。数量标记成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM组胺抗血清,蓝色,即用,内含:兔抗血清、Tris缓冲液和0.01%的NaN3。1×5mlBIOTIN五羟色胺生物素,黄色,即用,内含0.1%的NaN3。1×0.2mlENZCONJCONC酶联物,10倍浓缩,内含碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体、Tris缓冲液、HCl和0.01%的NaN3。1×7×0.5mlCALA-G标准品A-G,0;0.08;0.24;0.73;2.2;6.6;19.8ng/ml,0;0.45;1.4;4.1;12.5;37.4;112.3nmol/l,即用,内含酰化的五羟色胺、磷酸盐缓冲液和0.1%的NaN3。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO质控品1+2,冻干,内含人血清和0.02%的NaN3。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。1×3mlACYLREAG酰化试剂内含乙酸酐和丙酮,即用1×50mlASSAYBUFCONC检测缓冲液,10倍浓缩,内含磷酸缓冲液、BSA和1%的NaN3。1×50mlWASHBUFCONC洗涤液,20倍浓缩,内含磷酸缓冲液、吐温和0.1%的硫柳汞。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片,密封于铝铂金属袋内,内含对硝基苯酚磷酸盐。1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液,即用,内含二乙醇胺、水和0.05%的NaN3。1×15mlPNPPSTOPPNPP终止液,即用,内含1M的NaOH和0.25M的EDTA。3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1)移液器,体积:20;25;50;100;1000ul2)玻璃试管(12×75mm)3)试管架4)振荡器(500rpm)5)旋涡混合器6)水浴箱,37℃7)带储器的8道移液器8)洗涤瓶,自动或半自动洗板机9)离心机:≥1500×g10)可在405nm处读数的酶标仪(参考波长:600-650nm)11)双蒸水或去离子水12)吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明供手动和自动操作参考用注意用于96孔检测的试剂成分可分成3次用。下述体积是使用4条(32孔)时所需要的体积。如果客户想将标准品从7支减为6支的话,我们可以省掉标准品G。则检测范围相应的减少到155ug/l(血浆)或706ug/l(血清,尿液,组织匀浆和细胞培养上清)。血清、尿液、组织匀浆和细胞培养上清样品可以选择简短操作步骤进行,只需温育3.5个小时(但血浆样品不能采用简短操作步骤进行),以上样品也可以选择可选操作步骤进行检测(将样品温育一整夜),血浆样品必须按照温育一整夜进行检测。8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分加入稀释剂比例备注储存稳定性15ml检测缓冲液150ml双蒸水1:10出现黄褐色并不会影响实验结果2-8℃2周15ml洗涤液300ml双蒸水1:202-8℃4周质控品0.5ml双蒸水静置15min,混合时无泡沫≤-20℃有效期内稳定60ul酶联物6ml稀释的检测缓冲液1:101临时配置,只能使用一次18-25℃2小时3PNPP底物片8mlPNPP底物缓冲液临时配置,只能使用一次18-25℃5小时8.2样品的稀释样品五羟色胺浓度高于Z高标准品的必须用检测缓冲液进行进一步的稀释。8.3样品和质控品的酰化样品A:血清,尿液,血小板提取物,组织匀浆和质控品样品B:无血小板血浆注意请不要酰化标准品,标准品已经酰化了。样品准备可使血清、尿液、血小板乳糜微粒、组织匀浆和细胞培养上清被稀释107倍,而血浆样品则被稀释23.5倍。结果计算时必须将此稀释因子考虑进去。8.3.1样品A:血清、尿液、血小板提取物、组织匀浆和质控品1将质控品和样品A分别20ul加入到玻璃试管中。2在每一试管中加入100ul稀释好的检测缓冲液,旋涡混合。3在每一试管中加入25ul酰化试剂1(3%),加入后立即旋涡混合。4将试管盖好,将试管放到37℃水浴箱内温育15分钟。5在每一试管中加入2ml已稀释好的检测缓冲液,旋涡混合61500×g下离心10分钟注意准备好的样品必须立即检测。其上清可在18-25℃下稳定存放1小时。8.3.2样品B:无血小板血浆1将50ul样品B加入到玻璃试管中。2在每一试管中加入100ul稀释好的检测缓冲液,旋涡混合。3在每一试管中加入25ul酰化试剂,加入后立即旋涡混合。4将试管盖好,将试管放到37℃水浴箱内温育15分钟。5在每一试管中加入1ml已稀释好的检测缓冲液,旋涡混合61500×g下离心10分钟注意准备好的样品必须立即检测。其上清可在18-25℃下稳定存放1小时。9、实验步骤9.1简短操作步骤(仅供样品A使用,不能应用于血浆)1将标准品、酰化好的质控品和酰化好的样品各50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羟色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羟色胺抗血清。4盖板,室温(18-25℃)下振荡(500rpm)温育90min。5移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去残余液体。6在每一微孔中加入150ul临时准备好的酶联物。7盖板,室温(18-25℃)下振荡(500rpm)温育60min。8移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去残余液体。9如果有条件的话,可以用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液时,每孔间的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。10在每一微孔中加入200ul临时配置好的PNPP底物液。11室温(18-25℃)下振荡(500rpm)温育60min。12在每一微孔中加入50ulPNPP终止液以终止底物反应,轻轻振板以使溶液混合均匀。13加终止液后60min内405nm处读取OD值。9.2可选操作步骤(温育一整夜,样品A和样品B均适用)9.2.1**天1将标准品、酰化好的质控品和样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羟色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羟色胺抗血清。4盖板,轻轻振板,2-8℃下温育16-20小时(一整夜)。9.2.2第二天1移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去参与液体。2在每一微孔中加入150ul临时配置好的酶联物。3盖板,室温振荡器上(500rpm)温育60分钟。4移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干以除去残余液体。5如果有条件的话,可以用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液时,每孔间的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。6在每一微孔中加入200ul临时配置好的PNPP底物液。7室温振荡器上(500rpm)温育30分钟。8在每一微孔中加入50ulPNPP终止液,振板以混合孔内成分。9加终止液后60min内405nm处读取OD值。(参考波长:600-650nm)10、结果计算将所有标准品、质控品和样品的OD值减去空白孔的OD值。在半对数坐标纸上,以标准品的OD值(Y轴,线性)对其浓度(X轴,对数)绘制出一条标准曲线,或采用自动计算的方法绘制出一条标准曲线。用Cubicspline、4参数或双对数可以得到较好的曲线图。在计算标准曲线时,应当应用到每一个标准品数值(两个数值中,明显逸出的数值应当被忽略掉,采用更加合理的一个数值用)。样品的浓度可以从标准曲线上定量得到。由于样品被稀释了,所以Z终样品结果必须乘以相应的稀释因子,单位为ng/ml。血清、尿液、血小板、组织匀浆、细胞培养上清、质控品:×107无血小板血浆:×23.5进行了进一步稀释的样品结果应当乘以相应的稀释因子。实验必须满足如下标准才符合要求:50%OD/Odmax():0.60-1.00ng/ml(平均0.8ng/ml)△OD标准品A-标准品G≥0.80OD转换系数:五羟色胺(ng/ml)×5.67=nmol/l如果样品中五羟色胺浓度高于Z高标准品,则此样品必须按照实验前准备说明进行稀释并重新检测。11、期望值实验结果不能当作任何ZL结果的**原因,疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值(97.5%):样品数量单位平均值建议每个实验室读确定自己的正常值范围范围血清99ng/ml88.630-200无血小板血浆35ng/ml3.71.8-7.5血小板35ng/109血小板490217-86124小时尿液49μg/d83.1≤200本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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2018-11-14 10:00
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人5羟色胺酶联免疫分析试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T[详细]
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2018-12-30 10:00
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大鼠5-羟色胺(5-HT)酶联免疫分析(ELISA)
- 大鼠5-羟色胺(5-HT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中5-羟色胺(5-HT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5-羟色胺(5-HT)水平。用纯化的大鼠5-羟色胺(5-HT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺(5-HT)再与HRP标记的ET-1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠5-羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠5-羟色胺(5-HT)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:225pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为150pg/ml,100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:5pg/ml-180pg/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月www.biokanu.com[详细]
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2018-09-22 10:00
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人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒
- 人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
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人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒
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2024-09-29 11:41
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硫酸-5-羟色胺肌酐说明书,硫酸-5-羟色胺肌酐产品资料
- CAS号:61-47-2中文名称:硫酸-5-羟色胺肌酐其他中文名称:5-羟色胺肌酸酐硫酸盐;5-羟色胺肌氨酸酐硫酸盐一水合物英文名称:5-HT其他英文名称:Serotonincreatininesulfatesaltmonohydrate;5-Hydroxytryptaminecreatininesulfatecomplex产品规格:BRwww.shjsbio.com[详细]
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2018-10-08 10:00
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人过氧化物酶体增殖物激活受体αELISA试剂盒使用方法
- 检测范围:96T10ng/L-320ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)水平。用纯化的人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α),再与HRP标记的过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(640ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-09-19 10:01
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人五羟色胺(Serotonin)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人五羟色胺(Serotonin)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Serotonin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Serotonin与单抗结合,加入生物素化的抗人Serotonin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Serotonin浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Serotonin浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):16ug/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成16ug/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入16ug/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Serotonin含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Serotonin检测浓度小于50ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Serotonin。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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人五-羟色胺 (5-HT) ELISA 检测试剂盒
- 人(Human)五-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:5-HT试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知5-HT浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将5-HT和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中5-HT的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80umol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗5-HT抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人(Human)五-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:80umol/L(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40umol/L(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20umol/L(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10umol/L(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0umol/L(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5umol/L(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0umol/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(umol/L)A8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。人(Human)五-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的5-HT标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的5-HT含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/L[详细]
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2018-09-19 10:00
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人CC趋化因子受体7elisa试剂盒使用方法
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.3pg/ml-16pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人痰液中树突状细胞中CC趋化因子受体7(CCR-7)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CC趋化因子受体7(CCR-7)水平。用纯化的人CC趋化因子受体7(CCR-7)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入CC趋化因子受体7(CCR-7),再与HRP标记的CC趋化因子受体7(CCR-7)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的CC趋化因子受体7(CCR-7)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人CC趋化因子受体7(CCR-7)浓度。[详细]
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2018-10-01 10:00
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大鼠5-羟色胺(5-HT)酶联免疫分析
- 大鼠5-羟色胺(5-HT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中5-羟色胺(5-HT)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5-羟色胺(5-HT)水平。用纯化的大鼠5-羟色胺(5-HT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺(5-HT)再与HRP标记的ET-1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠5-羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠5-羟色胺(5-HT)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:225pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为150pg/ml,100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:5pg/ml-180pg/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月www.biokanu.com[详细]
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2018-09-22 10:00
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