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关于PCR假阴性问题的总结
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本文由 上海领成生物科技有限公司 整理汇编
2011-11-22 00:00 177阅读次数
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关于PCR假阴性问题的总结
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关于PCR假阴性问题的总结
- 关于PCR假阴性问题的总结[详细]
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2011-11-22 00:00
其它
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高灵敏的新冠病毒数字PCR 方法核酸检测方法,降低假阴性
- 2019年12月以来新型冠状病毒肆虐,使用常规的荧光定量PCR技术进行的核酸检测,因假阴性问题可能会导致患者携带病毒而不受防控,将会带来严重的潜在风险。
深蓝云生物科技的三通道高灵敏全封闭数字PCR检测新冠病毒整套方案:基于Naica自动化微滴芯片式数字PCR系统和三通道探针法新冠病毒检测试剂盒,高特异性,高灵敏度且全封闭过程确保安全性。
通过一步法反转录-数字PCR-探针方法,只需加入RNA模板,即可实现高特异性、高灵敏度、全封闭地新冠病毒RNA定性检测和定量,降低假阴性。在一个样本管中同时检测新冠病毒的开放读码框1ab(ORF1ab)、核壳蛋白(N)基因区域和人内源质控基因。
检测区段:核壳蛋白(nucleoprotein,N)基因:FAM标记;开放读码框1ab(open reading frame,ORF1ab)VIC标记;和内标基因:Cy5标记,实现对样本量的质控。[详细]
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2024-09-10 22:36
应用文章
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关于温度梯度PCR和降落PCR
- 关于温度梯度PCR和降落PCR[详细]
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2016-06-16 00:00
选购指南
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关于激光粒度仪折射率的问题
- 关于激光粒度仪折射率的问题[详细]
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2024-09-11 17:55
课件
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关于托辊配件的换油问题
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2014-05-04 00:00
应用文章
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关于氮吹仪孔径的选择问题
- 关于氮吹仪孔径的选择问题[详细]
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2024-09-29 00:07
专利
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ELISA试验中阴性的显色和阴性的本底
- ELISA试验中阴性的显色和阴性的本底以常用的间接法测抗体和夹心法测抗原为例。阳性标本中含有检测系统中特异的抗体或抗原,作为桥梁联结免疫吸附剂和酶结合物,使酶结合物吸附在固相上,无色底物在酶的作用下转变成有色产物,这就是阴性的显色,显色的深度与阳性标本中待测抗体或抗原的量成正比。阴性标本中不含待测的抗体或抗原,酶结合物不能联结在固相上,故不显色。但ELISA是一个复杂的、多步骤的反应过程,反应各步中酶结合物都有可能非特异性的吸附在固相载体上,与底物反应呈现颜色,这就形成了阴性的本底。酶结合物在固相上的非特异吸附通常有以下几条途径。酶结合物直接吸附在固相载体上。酶结合物是蛋白质,可以直接吸附在固相载体表面。但在ELISA这一步骤中选择了不利于这种吸附的条件,一般说来只要酶结合物工作浓度适当和反应后经过彻底洗涤,可以避免这种吸附。酶结合物与固相上包被蛋白质成分起反应。包被抗原不纯时,杂质蛋白也会吸附在固相载体上,某些杂质可与酶标抗体因“错认"而结合。在间接法中,杂抗原还有可能与血清标本中的免疫球蛋白特异或非特异地结合。另外非特异的免疫球蛋白也可吸附在包被的特异抗原上,特别是这种抗原为碱性蛋白质时,此时酶标记的第二抗体就与吸附的免疫球蛋白反应而形成阴性本底。在间接法中标本中的非特异免疫球蛋白的含量远远超过特异性抗体,因此可以直接吸附在固相上,这是形成阴性本底的主要原因。聚苯乙烯对免疫球蛋白有很好的吸附性能,IgM的吸附力大于IgG,聚合IgG的吸附力大于单体的IgG。酶标记的抗Ig(二抗)对吸附在载体上的Ig和与固相抗原结合的特异性Ig有着同样的亲和力,因此在加入标本的反应中,虽然采取了不利于吸附的条件,但假设血清标本不作适量的稀释,高浓度的Ig中仍有一些能吸附在固相上,因而产生较高的本底。在双抗体夹心法中,标本中如含有类风湿因子,也能使阴性血清显色。类风湿因子是作用于多种动物IgGFc段的自身抗体,多为IgM类,是一种多价抗体。在夹心法检测中充当抗原成分,同时在固相抗体及酶标抗体反应,使酶标抗体结合到载体上。在ELISA中引入生物素-亲和素系统可以提高检测的灵敏度,但如果使用不当,可使本底加深,反而得不偿失。生物素标记蛋白质如比例不合适,极易形成较高的阴性本底。从蛋清中提取的亲和素是一种碱性糖蛋白,可以通过静电作用吸附在聚苯乙烯上,也是造成BA-ELISA高本底的因素之一。从链球菌中提取的亲和素改善了这一非特异吸附现象。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务,并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务,如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品,针对以上各项服务,我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。[详细]
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2018-09-04 10:00
产品样册
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关于色谱仪的选型和配套问题
- 关于色谱仪的选型和配套问题[详细]
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2012-06-18 00:00
期刊论文
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关于干燥方式和干燥设备的选型问题
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2024-09-20 23:32
期刊论文
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FTIR talk‘问答集’- 关于FTIR用聚光镜的问题
- FTIR talk‘问答集’- 关于FTIR用聚光镜的问题[详细]
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2008-07-10 00:00
其它
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关于橙汁喷雾干燥中粘壁问题的解决方法
- 随着科技的发展,对喷雾干燥的利用效率越来越高,甚至有用户18个小时连续运转,目的就是在更短的时间内,干燥更多的样品,用于生产或研究。
喷雾干燥的粘壁现象,尤其受到喷雾干燥机的工程研究人员与用户不断研究攻克的问题。[详细]
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2020-06-02 09:31
其它
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喷雾干燥技术关于物料粘壁问题的解决方案
- 下面从粘壁现象的起因、结果、解决办法依次谈起:
喷雾干燥过程中,干燥的物料粘附在干燥塔内壁上的现象,一般称为粘壁现象。粘壁现象是喷雾干燥实验中必须考虑的一个重要问题。
[详细]
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2025-04-09 09:58
其它
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丙肝抗体阴性表现
- 丙肝抗体阴性表现 丙肝抗体阴性一般是指没有感染丙型肝炎病毒。相对于丙肝抗体阴性,丙肝抗体阳性患者的血中含有丙型肝炎病毒,具有传染性。丙型肝炎的发生率显著高于输丙肝抗体阴性者的血。 我们对丙肝抗体阴性也要有所了解,以便更好的预防丙肝。肝病专家介绍说感染丙型肝炎病毒的初期,患者没有任何不舒服的感觉。在5-12周的潜伏期后,只有大约四分之一的病人会出现食欲差、疲倦、黄疸等症状;而大部分的患者却没有任何感觉。而且,感染后大约要经过二十年左右才会出现肝硬化。因此,有很多人根本不知道自己已经被感染。因此,对于丙肝抗体阴性要具体问题提具体分析,要想知道自己有没有感染上,Z重要的办法是查看血液中是否有病毒。病人在急性感染后的数天内,血清中会出现病毒RNA,并且在产生抗体前一直会存在几个月,所以通过检查病毒抗原或病毒RNA可以帮助早期诊断。 但是,目前用的试剂是利用丙型肝炎病毒基因所产生的病毒蛋白做成的,所以,并不能直接检查。而且,由于血液中的丙型肝炎数量相当少,有时甚至测不出。这并不表示没有丙型肝炎了,只是代表病毒当时的活性很低。上海易利生物致力于生命科学领域的研究,研发并长期提供:ELISA试剂盒,生物试剂,标准品,抗体等科研产品,产品应用领域广泛,满足各大院校实验室、研究室、化验室专业客户群需求。[详细]
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2018-12-30 10:00
产品样册
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FTIR talk‘问答集’- 关于FTIR上使用的光源的问题
- FTIR talk‘问答集’- 关于FTIR上使用的光源的问题[详细]
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2009-01-09 00:00
其它
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关于氧化还原电位(ORPEh)去极化测定法的二十个问题
- 关于氧化还原电位(ORPEh)去极化测定法的二十个问题[详细]
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2006-10-12 00:00
报价单
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关于橙汁喷雾干燥ZL中的解决粘壁问题
- 关于橙汁喷雾干燥ZL中的解决粘壁问题[详细]
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2016-09-07 00:00
选购指南
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关于果冻杯包装封口膜易破损的问题研究
- 关于果冻杯包装封口膜易破损的问题研究[详细]
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2024-09-19 23:59
报价单
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关于LACHAT流动注射分析仪有关问题的几点说明
- 关于LACHAT流动注射分析仪有关问题的几点说明[详细]
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2024-09-28 03:03
实验操作
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关于微生态制剂存在的问题及应用前景
- 我国微生态制剂的研究起步较晚,发展相对缓慢,和国外还有很大的差距。导致这种情况主要原因如下:
1、目前对于微生态制剂的大多数研究停留在使用效果水平上,对基础理论方面的研究还远远不够。
......[详细]
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2025-01-09 10:31
其它
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关于光谱仪器中常用的光电倍增管及其有关问题的探讨介绍
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2020-04-26 17:54
操作手册
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