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人钙粒蛋白C(Calgranulin C)ELISA试剂盒说明书
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2018-09-13 10:01 181阅读次数
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人钙粒蛋白C(CalgranulinC)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CalgranulinC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CalgranulinC与单抗结合,加入生物素化的抗人CalgranulinC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CalgranulinC浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CalgranulinC浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CalgranulinC含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CalgranulinC检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CalgranulinC。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.2%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
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人钙粒蛋白C(Calgranulin C)ELISA试剂盒说明书
- 人钙粒蛋白C(CalgranulinC)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CalgranulinC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CalgranulinC与单抗结合,加入生物素化的抗人CalgranulinC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CalgranulinC浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CalgranulinC浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CalgranulinC含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CalgranulinC检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CalgranulinC。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.2%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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- 人超敏C反应蛋白(hsCRP)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人hsCRP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的hsCRP与单抗结合,加入生物素化的抗人hsCRP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,hsCRP浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中hsCRP浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):400ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清至少作1:200稀释(取5ul,加标本稀释液995ul,稀释200倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入400ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应hsCRP含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的hsCRP检测浓度小于0.3ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人hsCRP。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书
- 粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlLZM人溶菌酶规格:48T/96Tβ-HCG人绒毛膜促性腺激素β规格:48T/96THCG人绒毛膜促性腺激素规格:48T/96TPAPP-A人妊娠相关血浆蛋白A规格:48T/96TSP1/PSβ1-G人妊娠特异性β1糖蛋白规格:48T/96THG人妊娠疱疹抗体规格:48T/96THSF-1人热休克因子1规格:48T/96THSPgp96人热休克蛋白糖蛋白96规格:48T/96THSP-90人热休克蛋白90规格:48T/96THSP-70人热休克蛋白70规格:48T/96THsp-60人热休克蛋白60规格:48T/96THSP-40人热休克蛋白40规格:48T/96THSP-27人热休克蛋白27规格:48T/96THSP-20人热休克蛋白20规格:48T/96TIMA人缺血修饰白蛋白规格:48T/96TALD人醛缩酶规格:48T/96TALD人醛固酮规格:48T/96Ti-PTH人全段甲状旁腺素规格:48T/96TASGPR人去唾液酸糖蛋白受体规格:48T/96TNA人去甲肾上腺素规格:48T/96TFK人趋化因子规格:48T/96TSRB/CD36人清道夫受体B规格:48T/96TSM人鞘磷脂规格:48T/96TDsg-1人桥粒芯糖蛋白-1规格:48T/96THyl人羟赖氨酸规格:48T/96TOH-PYD人羟基胶原吡啶交联规格:48T/96THRGP人羟脯氨酸糖蛋白规格:48T/96THyp人羟脯氨酸规格:48T/96TDyn人强啡肽规格:48T/96TLMP-1人潜伏膜蛋白1规格:48T/96TPro-ANP人前心钠肽规格:48T/96TPro-ANP人前心钠肽规格:48T/96TPSA人前列腺特异性抗原规格:48T/96TPAP人前列腺酸性磷酸酶规格:48T/96TPGF人前列腺素F规格:48T/96TPGE2人前列腺素E2规格:48T/96TPGE1人前列腺素E1规格:48T/96TPTGDS人前列腺素D合成酶规格:48T/96TPGDS人前列腺素D合成酶规格:48T/96TPGI人前列环素规格:48T/96TPCP人前胶原C端肽酶规格:48T/96TPA人前白蛋白规格:48T/96TCALLA人普通急性淋巴细胞白血病抗原规格:48T/96TGLUT3人葡萄糖转运蛋白3规格:48T/96TGLUT1人葡萄糖转运蛋白1规格:48T/96TGIP人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽规格:48T/96TGOD人葡萄糖氧化酶规格:48T/96TGKRP人葡萄糖激酶调节蛋白规格:48T/96TGCK人葡萄糖激酶规格:48T/96TGPI人葡萄糖6磷酸异构酶规格:48T/96TSPA人葡萄球菌蛋白A规格:48T/96TTetanusAb人破伤风抗体规格:48T/96TODF人破骨细胞分化因子规格:48T/96TPrednisolone人泼尼松龙规格:48T/96TSMM人平滑肌肌球蛋白规格:48T/96TSyk人酪氨酸激酶规格:48T/96TCORT人皮质酮/肾上腺酮规格:48T/96TCortisol人皮质醇规格:48T/96TCLA人皮肤淋巴细胞相关抗原规格:48T/96TSRF/IF人皮肤反应因子/炎性因子规格:48T/96TDPT人皮肤蛋白规格:48T/96TCTACK/CCL27人皮肤T细胞虏获趋化因子规格:48T/96TFSA人胚胎性硫糖蛋白抗原规格:48T/96TCIAP人牛小肠碱性磷酸酶规格:48T/96TFⅫ人凝血因子Ⅻ规格:48T/96TFⅩⅢ人凝血因子ⅩⅢ规格:48T/96TFⅩ人凝血因子Ⅹ规格:48T/96TFⅨ人凝血因子Ⅸ规格:48T/96TⅧ-Ag人凝血因子Ⅷ相关抗原规格:48T/96TFⅢ人凝血因子Ⅲ规格:48T/96TFⅡ人凝血因子Ⅱ规格:48T/96TF1+2人凝血酶原片段F1+2规格:48T/96TT-TM人凝血酶血栓调节蛋白复合物规格:48T/96TTR人凝血酶受体规格:48T/96TTAT人凝血酶抗凝血酶复合物规格:48T/96TGelsolin人凝溶胶蛋白规格:48T/96TCLU人凝聚素规格:48T/96Tgelson人凝胶原蛋白规格:48T/96TUFC人尿游离皮质醇规格:48T/96TALB人尿微量白蛋白规格:48T/96TUreC人尿素酶相关蛋白C规格:48T/96TPLAUR/uPAR人尿激酶型纤溶酶原激活物受体规格:48T/96TuPA/PLAU人尿激酶型纤溶酶原激活物规格:48T/96TuPA/PLAU人尿激酶型纤溶酶原激活物规格:48T/96TuPA人尿激酶型纤溶酶原激活物规格:48T/96TUK人尿激酶规格:48T/96TUP人尿蛋白规格:48T/96TGDI人鸟苷酸解离YZ因子规格:48T/96TGEF人鸟苷酸交换因子规格:48T/96TODC人鸟氨酸脱羧酶规格:48T/96TODC人鸟氨酸脱羧酶规格:48T/96TOCT人鸟氨酸氨基甲酰转移酶规格:48T/96TFAK人黏着斑激酶规格:48T/96TMAdCAM-1人黏膜地址素细胞黏附分子规格:48T/96TBDNF人脑源性神经营养因子规格:48T/96TBNP人脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96TNGB人脑红蛋白规格:48T/96TENK人脑啡肽规格:48T/96TBGP/Gehrelin人脑肠肽规格:48T/96Tvisfatin人内脂素/内脏脂肪素规格:48T/96Tvaspin人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶YZ剂规格:48T/96TEL人内皮脂肪酶规格:48T/96TES人内皮抑素规格:48T/96TeNOS-3人内皮型一氧化氮合成酶3规格:48T/96TeNOS人内皮型一氧化氮合成酶规格:48T/96TET-1人内皮素1规格:48T/96TET-1人内皮素1规格:48T/96TEG-VEGF人内分泌腺来源的血管内皮生长因子规格:48T/96TET人内毒素规格:48T/96TTdT人末端脱氧核苷酸转移酶规格:48T/96TTCCC5b-9人末端补体复合物C5b-9规格:48T/96Tponticulin人膜桥蛋白规格:48T/96TANX-Ⅴ人膜联蛋白Ⅴ规格:48T/96TMAC人膜攻击复合物规格:48T/96TMCP/CD46人膜辅蛋白规格:48T/96TMIS/AMH人缪勒管YZ物质/抗缪勒管激素规格:48T/96TIAP人免疫YZ酸性蛋白规格:48T/96T[详细]
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2018-10-09 10:00
产品样册
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人胱抑素C(Cystatin C)ELISA试剂盒说明书
- 人胱抑素C(CystatinC)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CystatinC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CystatinC与单抗结合,加入生物素化的抗人CystatinC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CystatinC浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CystatinC浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):120ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1:5倍稀释。血清、血浆1:20倍稀释。2.标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入400ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CystatinC含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CystatinC检测浓度小于1.5ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CystatinC。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.6%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人活化蛋白C(APC)ELISA Kit说明书
- 人活化蛋白C(APC)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
标准
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人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒
- 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
其它
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96T人C 反应蛋白ELISA检测试剂盒
- 人C反应蛋白ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理: CRP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CRP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CRP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CRP的浓度呈比例关系。 安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人C反应蛋白ELISA检测试剂盒 操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人C反应蛋白ELISA检测试剂盒 操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人C反应蛋白ELISA检测试剂盒 结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的CRP标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的CRP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ug/ml4、敏感度:0.1ug/mlCholicacid胆酸[81-25-4]250gCholinebitartrate重酒石酸胆碱[87-67-2]25gCholinechloride氯化胆碱[67-48-1]500gCholinesterase,Butyryl胆碱酯酶/500UChondroitinsulfatesodiumsalt硫酸软骨素[9007-28-7]25gChorionicgonadotropinhuman绒毛膜促性腺激素[9002-61-3]1mgChromiumgranular铬粒[7440-47-3]100gChromium(III)chloride氯化铬[10025-73-7]250gChromium(III)chloride,hexahydrate氯化铬六水[10060-12-5]250gChromicacid三氧化铬[1333-82-0]250gChromium(VI)oxide三氧化二铬[1308-38-9]250gChromium(III)potassiumsulfate,dodecahydrate硫酸钾铬十二水[7788-99-0]250gChromium(III)sulfate,hydrate硫酸铬[10101-53-8]250gChromotropicacid,sodiumsalt变色酸钠盐[5808-22-0]100gChymostatin胰凝乳蛋白酶YZ剂[9076-44-2]5mgChymotrypsinalpha-TLCKTreatedTLCK-treated胰凝乳蛋白酶[9004-07-3]25mgChymotrypsinalpha-TLCKTreatedTLCK-treated胰凝乳蛋白酶[9004-07-3]100mg[详细]
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2018-09-27 10:00
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人超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa试剂盒使用说明书
- 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa试剂盒使用说明书[详细]
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2014-05-05 00:00
期刊论文
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人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白AELISA试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T0.5μg/L-40μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)水平。用纯化的人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8),再与HRP标记的S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)浓度。[详细]
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2018-09-19 10:01
产品样册
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人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A试剂盒使用方法
- 检测范围:96T0.5μg/L-40μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)水平。用纯化的人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8),再与HRP标记的S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)浓度。[详细]
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2024-09-28 21:45
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人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人PKC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的PKC与单抗结合,加入生物素化的抗人PKC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,PKC浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中PKC浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆至少作1:2稀释(取50ul,加标本稀释液50ul,稀释2倍)。细胞上清至少10倍稀释。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应PKC含量,再乘上稀释倍数。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的PKC检测浓度小于16pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人PKC。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2024-09-30 08:54
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人蛋白激酶C(PKC)elisa试剂盒说明书
- 人蛋白激酶C(PKC)elisa试剂盒说明书[详细]
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2024-10-08 05:21
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小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CRP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CRP与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CRP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CRP浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CRP浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2500ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1:5稀释((取40ul,加标本稀释液160ul,稀释5倍))。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成5000ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入5000ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CRP含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CRP检测浓度小于3.8ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠CRP。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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总蛋白C(TPC)ELISA试剂盒
- 总蛋白C(TPC)ELISA试剂盒[详细]
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2016-07-11 00:00
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人活化蛋白C(Human Activated Protein C)APC说明书
- HumanActivatedProteinCAPCHumanActivatedProteinCActivatedProteinC(APC)isaserineproteasederivedfromthetwochainvitaminKdependentzymogen,ProteinC.APCinhibitsbloodcoagulationthroughtheselectiveinactivationofthecofactorsVaandVIIIa.APCispreparedfromproteinCbyactivationwithpurifiedthrombin.Thisthrombinisremovedafteractivationbyionexchangechromatography.ActivatedProteinCpurityisdeterminedbySDS-PAGEandshowscompletereductionuponincubationwith2-mercaptoethanol.Buffercomposition=20mMTris-HCl/0.1MNaCl/pH7.4*ExtinctionCoefficient(1%)=14.5MolecularWeight=56,000daltonsAlsoavailable:des-Gla-HumanActivatedProteinC[详细]
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2018-09-29 10:03
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人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒说明书
- 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人sEPCR单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sEPCR与单抗结合,加入生物素化的抗人sEPCR,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,sEPCR浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中sEPCR浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):200ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清测定前用标本稀释液至少作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成200ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0n’g/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应sEPCR含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的sEPCR检测浓度小于0.2ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人sEPCR。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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人(Human)超敏C反应蛋白(hsCRP) ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)超敏C反应蛋白(hsCRP)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:HsCRP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HsCRP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HsCRP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HsCRP的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:8.0ug/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗HsCRP抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:8.0ug/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。4.0ug/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液2.0ug/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液1.0ug/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液0.5ug/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液0.25ug/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ug/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ug/ml)A8.08.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4.04.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2.02.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1.01.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E0.50.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F0.250.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HsCRP标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HsCRP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-8.0ug/ml4、敏感度:0.01ug/ml[详细]
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2018-09-14 10:01
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