胃蛋白酶原测定在胃癌及其癌前病变诊断中的应用

本文由 上海高创化学科技有限公司 整理汇编

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  人胃蛋白酶原2(PG2)操作方法简介广锐生物做更好的身边实验试剂供应专家：Elisa试剂盒、生物试剂、生化试剂、抗体、培养基、标准品|对照品等科研试剂！欢迎来电咨询订购：Elisa试剂盒现货低价！目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胃蛋白酶原2(PG2)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胃蛋白酶原2(PG2)水平。用纯化的人胃蛋白酶原2(PG2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胃蛋白酶原2(PG2)，再与HRP标记的胃蛋白酶原2(PG2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胃蛋白酶原2(PG2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人胃蛋白酶原2(PG2)浓度。人胃蛋白酶原2(PG2)操作方法简介操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为90μg/L，60μg/L，30μg/L，15μg/L，7.5μg/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人胃蛋白酶原2(PG2)操作方法简介人胃蛋白酶原2(PG2)操作方法简介[详细]

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  Monowave 400微博辅助合成能够加热到180oC、5min，因此非常适合与氮化硅荧光量子点的合成。此外，充足的搅拌，极ng确的温度、压力控制；快速加热和冷却使得微波合成操作非常简便。产物有着均一的球状外形，1-5nm范围内的窄分散，27.1%的产率等优点。更重要的是CNQDs对Hg2+有较高的选择性，并且，生物毒性非常低。[详细]

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• 特价销售大鼠胃蛋白酶原酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T1.5μg/L-40μg/L大鼠胃蛋白酶原酶联免疫分析试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中胃蛋白酶原(PG)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶原(PG)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶原(PG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胃蛋白酶原(PG)，再与HRP标记的胃蛋白酶原(PG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胃蛋白酶原(PG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠胃蛋白酶原(PG)浓度。试剂盒组成大鼠胃蛋白酶原酶联免疫分析试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。大鼠胃蛋白酶原酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-04 10:00

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• GCMS在有机酸尿症诊断中的应用

  GCMS在有机酸尿症诊断中的应用[详细]

  2024-09-20 06:20

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• 胃蛋白酶的临床意义说明

  胃蛋白酶为白色或淡黄色的粉末；无霉败臭；有引湿性；水溶液显酸性反应。胃蛋白酶的临床意义如下：胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在pH1.5～5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，而且一部分被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶测定可用于鉴别神经性低酸症和胃性低酸症，当胃酸过少或缺乏时，前者胃蛋白酶的含量有时正常而后者盐酸与胃蛋白酶同时缺乏。一般认为胃性低酸症是由于胃粘膜的重症器质性变化所致，特别是对于恶性贫血、无酸症、无胃蛋白酶分泌是诊断上的重要所见。慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二脂肠炎等胃蛋白酶的分泌常减少。一般胃酸基础分泌高的疾患，如十二指肠溃疡等，胃蛋白酶活性。正常值：基础胃液胃蛋白酶分泌量为84.4±9.72mg酪氨酸/h，Z高胃蛋白酶分泌量为190.29±15.31酪氨酸/h（Anson氏法）；420±208kU/L（改良李氏法）。胃蛋白酶的作用方法：胃蛋白酶应保存在低温环境中（－20℃至－80℃），以防止其发生自降解。储存于pH值大于11的溶液中或对其进行还原性甲基化也可以有效防止自降解的发生；当pH值回到6时，胃蛋白酶的活性即可恢复。胃内的消化主要是对蛋白质初步分解，胃蛋白酶具有分解蛋白质的作用，但从主细胞分泌出的胃蛋白酶是以无活性的酶原存在，必须依据胃酸激活并提供作用环境，因此盐酸激活胃蛋白质酶原、提供胃蛋白酶作用的酸性环境，是其助消化功能.胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在pH1.5～5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，而且一部分被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。[详细]

  2018-09-28 10:00

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  2005-08-04 00:00

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