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洗板时应了解以下问题
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本文由 上海盈公生物技术有限公司 整理汇编
2018-09-27 10:00 938阅读次数
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洗板目的在于将特异性结合于固相上的抗原(抗体)与温育过程中吸附的非特异性成份分离,使免疫复合物与待测抗体(抗原)呈一定比例,洗板是否合格直接影响检测结果的准确性。洗板应严格按照说明控制洗板时间及洗板次数,ELISA检测一般用洗涤液洗板3次,洗涤液应严格按照操作说明进行稀释,洗液应注满每个微孔并注意洗液不外溢,垂直甩板避免交叉污染,防止出现假阴性及假阳性结果。使用洗板机洗板可一定程度上避免环境污染、提高工作效率,洗涤开始时注意观察每根吸液针是否一直插入孔底并吸干孔内全部液体,严格按照要求设置一定的洗板时间及洗板次数。洗板过程中注意冲力大小,避免冲力过大导致酶结合物丢失,吸光度值偏低。洗液应根据不同厂家的酶标板调整注水量,注意不要溢出孔外;稀释洗液所用的蒸馏水或去离子水酸碱度适中,使配出的洗液pH在7.2~7.6范围内,用非金属容器保存,保持液体新鲜无污染、沉淀。洗板结束后将板拍干,应垂直扣在备好的干净的吸水纸或毛巾上,且注意每次更新干净的吸水纸或毛巾。洗板时还应注意以下问题:1、需每天校正注液量及残液量,洗涤后残液量不得大于2μl;2、及时更换破损吸液针,避免破坏底板包被;3、针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度,避免冲洗针头卡住酶标板;4、注意调整洗液量,洗液量过多将溢出,过少将达不到洗涤效果;5、关机前使用蒸馏水冲洗管道,避免洗液的结晶物堵塞管道;6、不同种试剂盒的洗液严禁混合使用。临床操作中,工作人员由于担心洗板次数过少达不到去除非特异性物质的理想效果而增加洗板次数,Z近研究发现,随着洗板次数的增加样本检测的OD值降低,造成假阴性结果及灰区标本的漏检。
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洗板时应了解以下问题
- 洗板目的在于将特异性结合于固相上的抗原(抗体)与温育过程中吸附的非特异性成份分离,使免疫复合物与待测抗体(抗原)呈一定比例,洗板是否合格直接影响检测结果的准确性。洗板应严格按照说明控制洗板时间及洗板次数,ELISA检测一般用洗涤液洗板3次,洗涤液应严格按照操作说明进行稀释,洗液应注满每个微孔并注意洗液不外溢,垂直甩板避免交叉污染,防止出现假阴性及假阳性结果。使用洗板机洗板可一定程度上避免环境污染、提高工作效率,洗涤开始时注意观察每根吸液针是否一直插入孔底并吸干孔内全部液体,严格按照要求设置一定的洗板时间及洗板次数。洗板过程中注意冲力大小,避免冲力过大导致酶结合物丢失,吸光度值偏低。洗液应根据不同厂家的酶标板调整注水量,注意不要溢出孔外;稀释洗液所用的蒸馏水或去离子水酸碱度适中,使配出的洗液pH在7.2~7.6范围内,用非金属容器保存,保持液体新鲜无污染、沉淀。洗板结束后将板拍干,应垂直扣在备好的干净的吸水纸或毛巾上,且注意每次更新干净的吸水纸或毛巾。洗板时还应注意以下问题:1、需每天校正注液量及残液量,洗涤后残液量不得大于2μl;2、及时更换破损吸液针,避免破坏底板包被;3、针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度,避免冲洗针头卡住酶标板;4、注意调整洗液量,洗液量过多将溢出,过少将达不到洗涤效果;5、关机前使用蒸馏水冲洗管道,避免洗液的结晶物堵塞管道;6、不同种试剂盒的洗液严禁混合使用。临床操作中,工作人员由于担心洗板次数过少达不到去除非特异性物质的理想效果而增加洗板次数,Z近研究发现,随着洗板次数的增加样本检测的OD值降低,造成假阴性结果及灰区标本的漏检。[详细]
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2018-09-27 10:00
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红外线测温仪安装时应注意的问题
- 红外线测温仪安装时应注意的问题红外线测温仪通常是用来测量轴承的振动,在少数情况下也会用来测量转轴振动。在测量振动速度的时候,如果测温仪安装方式不正确或者安装不牢固,都会造成测量结果失真或者由于振动引起测温仪损坏。因此我们要慎重选择智能红外线测温仪的安装方式。 当测温仪用于测量转轴振动时,安装通常采取在现场用手扶、橡皮泥粘粘水磁吸盘固定、螺栓固定等四种方式。在临时性振动测量中,大多数采用手扶测温仪的方式,这种方法测量灵活、使用方便,特别是当智能红外线测温仪数量缺少和测温仪互换性不好时,有着特殊的优点;缺点在于测试误差相对较大,而且工作强度也大。 橡皮泥还有一个缺点,就是粘接力受温度影响较大,温度较高和较低都会使粘接力显著降低,因此它不适用于固定温度较高的汽轮机高中压转子和带盘车轮的轴承中测量的速度测温仪;冬季冷态启动时,轴承温度过低也不宜采用。用橡皮泥粘粘测温仪也比较方便,测量结果正确性相对于手扶效果会好得多。需要注意的是,橡皮泥不能将智能红外线测温仪粘贴到垂直平面上,只能固定于水平面上,例如测量轴承座顶部垂直、水平、轴向振动。在粘接牢靠,频率在50Hz时,该方法Zda能量300μm振动。 永磁吸盘固定速度测温仪较橡皮泥的方式会更方便,而且目前国内也能制造出尺寸为φ50或50mm*50mm的永磁吸盘,其吸力可达196N,用这样的吸盘固定500g以下的智能红外线测温仪,吸附在水平面上,Zda可测量1000μm振动。缺点在于一般机组轴承座表面都涂有泥子或者油漆,这会导致吸盘的吸力降低,所以当吸附在垂直平面上、振幅较大时,还需扶手辅助一下,避免测温仪脱落而摔坏。 用螺栓直接将速度测温仪固定在轴承上,不仅可以可靠地测量轴承座顶部三个方向的振动,而且还可以测量垂直平面上两个方向的振动。这种安装方法是四种安装方法中Z牢固的一种。 智能红外线测温仪的安装要视测量的需要,根据不同的工作环境,选择以上四种方式中的Z适合一种,这样才能保证测量的顺利进行,减少测量和试验误差。[详细]
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2018-10-07 10:03
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车载喷雾机喷雾农药时应注意哪些问题
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2016-08-24 00:00
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喷雾干燥喷嘴的设计、制造及操作时应注意的问题
- 用于工业生产的气流式喷嘴,液体出口直径(内径)应尽量大一些,这样能增加气液接触周边,使液膜变薄,更有利于雾化。在气-液质量比相同的条件下,液体喷嘴内径愈大(以不产生液体脉冲现象为极限),雾滴愈细。若雾滴大小保持一定,则液体喷嘴内径愈大,愈省压缩空气。[详细]
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2021-02-18 16:50
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2024-09-14 01:07
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超声波涂层测厚仪使用时应注意以下5方面
- 超声波涂层测厚仪是一种厚度测量仪器,主要根据声波在试样中的散播速度乘于经过试样的时间的一半而失去试样的厚度,被宽泛用于多个行业中。
超声波涂层测厚仪打理容易,而且有良好的指向性,超声技术测量金属,非金属材质的厚度,即快又正确,无玷污,尤其是在只许可一个侧面可按触的场合,更能显示其优越性,普遍用于各种板材、管材壁厚、锅炉容器壁厚及其部分腐化、锈蚀的状况、因而对冶金、造船、机械、化工、电力、原子能等各工业部门的产品测验,对设施安全运用及现代化管制起着关键的作用。
超声波涂层测厚仪运用注意事项
1,运用涂层测厚仪测量时,探头一定要垂直于被测物的外面;
2,测量时不要拖动探头,一旦这样不只对探头会形成磨损,也会使测量错误。
3,测量时探头线在衔接探头的地方不能太过弯曲及颤动(针对分体式涂层测厚仪),这样会影响测试效果,从而得不到正确的测量结果。
4,涂层测厚仪尽量为专人运用和保管。
5,如觉得涂层测厚仪测量后果偏差较大时,请先用随机装备的五片塑料校准片做一轮测试,如偏离允许误差较远则有可能是仪器自身出了问题,需返厂检修,切记不可自行拆卸自行修理。[详细]
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2019-09-26 10:25
产品样册
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人白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒洗板方法
- 人(Human)白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被白三烯B4(LTB4)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白三烯B4(LTB4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,Z终结果乘以5才是样本实际浓度。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。[详细]
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2018-11-15 10:00
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2016-04-12 00:00
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喷雾干燥物料时液雾化方式有以下几种形式
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2024-09-15 20:57
安装说明
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用户选择高低温试验箱时需了解的基本知识
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2024-09-17 20:00
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2010-01-07 00:00
实验操作
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操作生化培养箱应注意的问题点
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2013-07-02 00:00
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超声波清洗中应注意的问题
- 超声波清洗中应注意的问题[详细]
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2013-11-01 00:00
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2015-09-02 00:00
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