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小鼠17-β-羟基类固醇脱氢酶10(HSD17β10)ELISA试剂盒
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本文由 上海康朗生物科技有限公司 整理汇编
2016-08-08 00:00 227阅读次数
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小鼠17-β-羟基类固醇脱氢酶10(HSD17β10)ELISA试剂盒
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小鼠17-β-羟基类固醇脱氢酶10(HSD17β10)ELISA试剂盒
- 小鼠17-β-羟基类固醇脱氢酶10(HSD17β10)ELISA试剂盒[详细]
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2016-08-08 00:00
安装说明
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大鼠17-羟基皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠17-羟基皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠17-OHCS单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的17-OHCS与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠17-OHCS,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,17-OHCS浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中17-OHCS浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):5μmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。尿液不做稀释。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成10mmol的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10mmol的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0μmol为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应17-OHCS含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的17-OHCS检测浓度小于8μmol。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠17-OHCS。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.6%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒
- 小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)的含量。有效期:6个月保存条件:2-8℃本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水备注:1.标准品浓度依次为:80、40、20、10、5、0μmol/L2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能检测范围:2.5μmol/L80μmol/L。灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1μmol/L。特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。[详细]
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2024-09-29 09:22
产品样册
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小鼠羟基类固醇脱氢酶酶联免疫分析使用说明书
- 使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清样本3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)含量。小鼠羟基类固醇脱氢酶酶联免疫分析实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)水平。用纯化的小鼠3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD),再与HRP标记的3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。小鼠羟基类固醇脱氢酶酶联免疫分析操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。60ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液30ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液15ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液7.5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3.75ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:小鼠羟基类固醇脱氢酶酶联免疫分析计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒
- 小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-15 02:27
报价单
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小鼠羟基丁酸脱氢酶(HBDH)ELISA试剂盒
- 小鼠羟基丁酸脱氢酶(HBDH)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-20 03:28
安装说明
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小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)elisa试剂盒使用说明书
- 小鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)elisa试剂盒使用说明书[详细]
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2013-08-07 00:00
实验操作
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小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)ELISA试剂盒
- 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)ELISA试剂盒[详细]
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2015-03-05 00:00
操作手册
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小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)ELISA试剂盒
- 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)ELISA试剂盒[详细]
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2015-03-05 00:00
应用文章
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小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒使用说明书
- 小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商,乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒,品质保证,技术严格,无效果退款退货。Elisakit规格:48孔配置/96孔配置酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本白介素10(IL-10)含量。试验原理:IL-10试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-10浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-10和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-10的浓度呈比例关系。[详细]
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2018-11-09 10:00
产品样册
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小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
- 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-23 13:58
报价单
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人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒组成
- 人(human)17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒本试剂盒仅供研究使用标本:尿液一、试剂组成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1块2~8℃干燥保存酶标偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存标准品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色剂A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色剂B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存终止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液(RinsingBufferx20)1瓶60.0毫升2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液(Diluentx5)1瓶15.0ml2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、人(human)17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒注意事项1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。2.使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低极ng确度,造成吸光度偏离的假像。7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水119倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水14倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)四、人(human)17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒操作步骤1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。8、将96孔板置于37℃温育30分钟。9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上,450nm处测定OD;显色后,15分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线,计算样本含量五、人(human)17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒结果判断1.仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;2、检测值范围:0-160umol/ml3、敏感度:0.5umol/ml[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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现货人17-羟皮质类固醇ELISA检测试剂盒
- 人17-羟皮质类固醇ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用标本:尿液试验原理: 17-OHCS试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知17-OHCS浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将17-OHCS和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中17-OHCS的浓度呈比例关系。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人17-羟皮质类固醇ELISA检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人17-羟皮质类固醇ELISA检测试剂盒操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人17-羟皮质类固醇ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的17-OHCS标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的17-OHCS含量可根据其OD值由标准曲线换算出浓度。3、检测值范围:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/LPAX2(PAX2Pairedboxgene2)配对盒基因2抗体0.2mlPAX3(Pairedboxgene3)配对盒基因3抗体0.2mlPAX5(Pairedboxgene5)配对盒基因5抗体0.2mlRatIgM/FITC荧光素标记大鼠IgM0.3mlrHIL-1Ra/FITC荧光素标记重组人白介素-1受体拮抗剂0.3mlKLH/FITC荧光素标记血蓝蛋白0.3mlPAX7(Pairedboxgene7)配对盒基因7抗体0.2mlPAX8(Pairedboxgene8)配对盒基因8抗体0.2mlPAX9(Pairedboxgene9)配对盒基因9抗体0.2mlP-cadherin(placental)P-钙粘附分子抗体0.1mlP-cadherin(placental)P-钙粘附分子抗体0.2mlLI-cadherin(liver-intestinecadherin)肝肠钙粘连蛋白抗体0.2mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)origin:human,mouse,rat,rabbit,horse,bovine,dog,chickenandsheep增殖细胞核抗原抗体0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)origin:human,mouse,rat,rabbit,horse,bovine,dog,chickenandsheep增殖细胞核抗原抗体0.2mlhumanIgM/Cy3荧光素Cy3标记人IgM0.1mlhumanIgA/Cy3荧光素Cy3标记人IgA0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)增殖细胞核抗原抗体0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)增殖细胞核抗原抗体0.2ml[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA
- 人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中17-羟皮质类固醇(17-OHCS)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)水平。用纯化的人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入人17-羟皮质类固醇(17-OHCS),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)含量。[详细]
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2018-12-02 10:00
产品样册
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人激肽释放酶10(KLK 10)ELISA Kit说明书
- 人激肽释放酶10(KLK 10)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-25 00:00
标准
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猪白介素10(IL-10)ELISA试剂盒
- 猪白介素10(IL-10)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-12 00:00
实验操作
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大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒
- 大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
安装说明
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大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒
- 大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
操作手册
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大鼠白介素-10(IL-10)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠白介素-10(IL-10)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠IL-10单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IL-10与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠IL-10,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,IL-10浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中IL-10浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IL-10含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的IL-10检测浓度小于16pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠IL-10。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒
- 人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:09
操作手册
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