小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）试剂盒使用方法

本文由 上海沪峰化工有限公司 整理汇编

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• 小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）试剂盒使用方法

  检测范围：96T1.5μg/ml-40μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G1(IgG1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入免疫球蛋白G1(IgG1)，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G1(IgG1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80μg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）ELISA试剂盒使用说明书

  小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入免疫球蛋白G1(IgG1)，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G1(IgG1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)浓度。小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80g/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40g/ml5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液20g/ml4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液10g/ml3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液5g/ml2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液2.5g/ml1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

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• 人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒

  人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒[详细]

  2015-03-18 00:00

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• 大鼠免疫球蛋白G1(IgG1)检测试剂盒

  大鼠免疫球蛋白G1(IgG1)检测试剂盒[详细]

  2016-05-17 00:00

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• 免疫球蛋白G1（IgG1）ELISA试剂盒说明书

  免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的BFGF标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlADMA人不对称二甲基精氨酸规格：48T/96TCFH人补体因子H规格：48T/96TC5b人补体片断5b规格：48T/96TC5b人补体片断5b规格：48T/96TC5a人补体片断5a规格：48T/96TC4b人补体片断4b规格：48T/96TC4b人补体片断4b规格：48T/96TC3b人补体片断3b规格：48T/96TC3b人补体片断3b规格：48T/96TC3a人补体片断3a规格：48T/96TC3bR人补体片段3b受体规格：48T/96TCCP人补体调节蛋白规格：48T/96TC4人补体蛋白4规格：48T/96TC3人补体蛋白3规格：48T/96TC7人补体7规格：48T/96TC3SP人补体3裂解产物规格：48T/96TC1INH人补体1YZ物抗体规格：48T/96TVN/CD51+CD61人玻连蛋白/体外粘连蛋白规格：48T/96T[详细]

  2018-10-09 10:00

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• 小鼠免疫球蛋白G2 b（IgG2b）试剂盒使用方法

  检测范围：96T2μg/ml-50μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G2b(IgG2b)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白G2b(IgG2b)水平。用纯化的小鼠免疫球蛋白G2b(IgG2b)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G2b(IgG2b)，再与HRP标记的免疫球蛋白G2b(IgG2b)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G2b(IgG2b)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠免疫球蛋白G2b(IgG2b)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（96μg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 大鼠免疫球蛋白A（IgA）试剂盒使用方法

  检测范围：48T1μg/ml-32μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白A(IgA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA)，再与HRP标记的免疫球蛋白A(IgA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白A(IgA)浓度。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 犬免疫球蛋白M试剂盒操作使用方法

  犬免疫球蛋白M试剂盒操作使用方法[详细]

  2015-05-22 00:00

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• 大鼠免疫球蛋白E（IgE）试剂盒使用方法

  检测范围：48T7.5μg/ml-240μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白E(IgE)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE)，再与HRP标记的免疫球蛋白E(IgE)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白E(IgE)浓度。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 人免疫球蛋白酶联免疫分析试剂盒使用方法

  本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白A（IgA）elisa试剂盒使用方法

  检测范围：48T1μg/ml-32μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白A(IgA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA)，再与HRP标记的免疫球蛋白A(IgA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白A(IgA)浓度。[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白G（IgG）试剂盒使用方法

  检测范围：96T12μg/ml-400μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G（IgG）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白G（IgG）水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白G（IgG）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G（IgG），再与HRP标记的免疫球蛋白G（IgG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G（IgG）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白G（IgG）浓度。[详细]

  2018-10-08 10:01

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• 猪总免疫球蛋白（T-IG）试剂盒使用方法

  猪总免疫球蛋白（T-IG）试剂盒使用方法[详细]

  2024-09-28 01:55

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• 小鼠CD44试剂盒使用方法

  检测范围：96T1μg/L-32μg/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中CD44含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠CD44水平。用纯化的小鼠CD44抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入CD44，再与HRP标记的CD44抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的CD44呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠CD44浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（64μg/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 小鼠c-fos试剂盒使用方法

  检测范围：96T20pg/ml-480pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中c-fos含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠c-fos水平。用纯化的小鼠c-fos抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入c-fos，再与HRP标记的c-fos抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的c-fos呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠c-fos浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（960pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 小鼠白细胞介素试剂盒使用方法

  小鼠白细胞介素试剂盒使用方法[详细]

  2024-09-29 01:25

  应用文章

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• 小鼠免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA试剂盒

  小鼠免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA试剂盒[详细]

  2013-10-14 00:00

  实验操作

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• 猪总免疫球蛋白酶联试剂盒使用方法

  猪总免疫球蛋白酶联试剂盒使用方法[详细]

  2015-03-04 00:00

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• 绵羊分泌型免疫球蛋白A（SIgA）试剂盒使用方法

  绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T1.5μg/ml-45μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平。用纯化的绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入分泌型免疫球蛋白A(SIgA)，再与HRP标记的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)浓度。[详细]

  2018-12-30 10:00

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• 小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒试剂盒

  小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒试剂盒试验原理：sIgA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知sIgA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将sIgA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中sIgA的浓度呈比例关系。小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒试剂盒内容及其配制1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。小鼠分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的sIgA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的sIgA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800ng/ml4、敏感度：1.0ng/ml[详细]

  2018-09-19 10:00

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