大鼠多巴胺ELISA检测试剂盒实验步骤

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• 大鼠多巴胺ELISA检测试剂盒实验步骤

  大鼠多巴胺ELISA检测试剂盒实验步骤[详细]

  2015-04-21 00:00

  操作手册

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• 大鼠 （Rat） 多巴胺ELISA 检测试剂盒

  试验原理：Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：1600ng/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Dopamine抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。[详细]

  2018-09-19 10:01

  产品样册

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• 大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒

  大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-10 00:00

  实验操作

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• 大鼠多巴胺(DA)检测试剂盒

  大鼠多巴胺(DA)检测试剂盒[详细]

  2024-09-22 22:25

  期刊论文

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• 大鼠多巴胺(DA)检测试剂盒

  大鼠多巴胺(DA)检测试剂盒[详细]

  2024-09-22 18:39

  实验操作

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• 大鼠多巴胺（Dopamine）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com大鼠多巴胺（Dopamine）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠Dopamine单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Dopamine与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠Dopamine，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，Dopamine浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Dopamine浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：10ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。血清至少10倍稀释,血浆可以不在稀释。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成20ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Dopamine含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的Dopamine检测浓度小于15pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Dopamine。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠多巴胺ELISA试剂盒中文说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4　大鼠多巴胺ELISA检测试剂盒说明书　　　本试剂仅供研究使用标本：组织匀浆试验原理：Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：1600ng/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Dopamine抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。大鼠多巴胺ELISA试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：1600ng/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。800ng/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液400ng/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液200ng/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。大鼠多巴胺ELISA试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（ng/L）A16001600样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的Dopamine标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的Dopamine含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-1600ng/L4、敏感度：1.0ng/L[详细]

  2024-09-11 18:02

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• 大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒

  大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  期刊论文

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• 大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA试剂盒

  大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  应用文章

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• 大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒

  大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-10 00:00

  其它

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• 大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒

  大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-10 00:00

  其它

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• ELISA试剂盒实验原理与操作步骤

  上海劲马生物科技有限公司ELISA试剂盒实验原理与操作步骤实验方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法操作步骤：具体请参照说明书（详细说明书请联系我司业务人员：021-60517348，13817140470。）注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-11 18:03

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• 加A试剂盒实验步骤

  利用具有3’-5’外切酶活性的高保真DNa聚合酶，如Pfu等进行PCR扩增时，其PCR产物为不带A尾的平末端DNa片段，如想将该片段克隆到T载体上，需要先利用A-Tai领Enzyme在平末端片段后加上A尾后才能与T载体上3’末端的T碱基互补连接。本产品是在平末端DNa片段的3’末端添加一个A尾，使平末端的DNa片段进行TA克隆成为可能。本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在30分钟完成整个过程。与平末端DNa片段克隆相比，TA克隆具有较高的克隆效率，可大大提高实验成功率。[详细]

  2018-09-04 10:00

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• 大鼠雌二醇ELISA试剂盒实验操作方法

  大鼠雌二醇ELISA试剂盒实验操作方法[详细]

  2015-04-24 00:00

  课件

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• 大鼠钙调神经磷酸酶（CaN）Elisa试剂盒操作步骤

  使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中钙调神经磷酸酶(CaN)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)水平。用纯化的大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入钙调神经磷酸酶(CaN)，再与HRP标记的钙调神经磷酸酶(CaN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的钙调神经磷酸酶(CaN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠钙调神经磷酸酶(CaN)浓度。标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 人 （Human） 多巴胺 （Dopamine） ELISA 检测试剂盒说明书

  人（Human）多巴胺（Dopamine）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：800nmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Dopamine抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：800nmol/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400nmol/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200nmol/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100nmol/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50nmol/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25nmol/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0nmol/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。[详细]

  2018-09-14 10:01

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• 莱克多巴胺（Rac）定量检测试剂盒（ELISA）

  www.biokanu.com莱克多巴胺（Rac）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书一、概要β兴奋剂是一种人和兽医作为ZL哮喘的药物。在牲畜中超剂量使用可以脂肪组织转化为肌肉组织，由于能够显著改善脂肪率和生产效率，β兴奋剂往往被滥用于畜牧养殖生产中。已经有克伦特罗或其他β兴奋剂中毒的病例报道，近来又有一些非法使用莱克多巴胺（Rac）来替代克伦特罗作为饲料添加，并存在滥用现象。通常情况下，HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法，但是其前处理步骤繁琐、费用昂贵。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点，已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点，能Zda限度地减少操作误差和工作强度。二、用途定量检测动物尿液中莱克多巴胺（Rac）的残留。三、检测原理本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应，微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体，加入鼠抗莱克多巴胺抗体后，会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后，加入标准品、样品及莱克多巴胺酶标记物（Rac-HRP），游离的莱克多巴胺（Rac）与莱克多巴胺酶标记物（Rac-HRP）竞争莱克多巴胺抗体结合位点。经过孵育及洗板后，加入底物并孵育。结合的酶连接物将底物转化为蓝色的产物。加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄色。在450nm处测量，吸光度值与样品中的莱克多巴胺浓度成反比，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中莱克多巴胺的含量。四、检测限检测限：0.05ng/ml（0.05ppb）五、特异叉物交叉率（%）Dobutamine……………………………………5.3Ritodrine………………………………………3.6RactopamineGluc.A…………………………1.0RactopamineGlucB……………………………384(1S,3S)Ractopamine…………………………2.1(1R,3S)-Ractopamine……………………………0.9Isoxsuprine………………………………………0.3Salmeterol…………………………………………0.3Fenoterol…………………………………………0.1Clenbuterol……………………………………<0.01Salbutamol………………………………………<0.01六、试剂盒组成每一个盒中的试剂足够进行96个试验（包括标准测定），试剂盒中的组份如下：1、96孔酶标板1块（12孔×8条）：预包被羊抗鼠IgG2、标准液×6瓶（1ml/瓶）：0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL3、酶连接物（6mL）：辣根过氧化物酶标记的莱克多巴胺工作液4、莱克多巴胺抗体（6mL）：鼠抗莱克多巴胺单克隆抗体工作液5、底物液A（6mL）：过氧化脲6、底物液B（6mL）：四甲基联苯胺（TMB）7、终止液（6mL）：2NH2SO48、浓缩洗涤液（25×）（25mL）：含Tween-20的磷酸盐缓冲液（PBST）9、其他：封板膜3张，自封袋1个，说明书1份七、样本处理处理任何样本，必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。取50μL清亮尿样直接测定，如尿样浑浊3000转离心10min，取上层清亮尿液测定，暂不使用的样本应于-20℃冷冻保存。八、检测步骤仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20-25℃）平衡30min以上。2、准备：取出需要数量的微孔板，将用剩的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架，标准品和样品做两个平行实验，记录下标准品和样品的位置。3、加抗体：每孔加入100μL稀释后的抗体溶液，37℃恒温箱孵育30分钟。4、洗板：倒出孔中的液体，将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打，以保证完全除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液，静置20秒钟，甩去液体，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。5、加标准品/样品：加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中，标准品和样品做两个平行实验，然后加入50μL稀释后的酶连接物到微孔，小心地充分混合，37℃恒温箱孵育30分钟。6、重复3的操作。7、显色：每孔先加入底物液A50μL，再加入底物液B50μL，37℃避光孵育15min（如果显色过浅，可适当延长孵育时间，反之亦然）。8、测定：每孔加入终止液50μL，设定酶标仪于450nm处，测定每孔OD值。九、结果判定（1）百分吸光率的计算，标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以**个标准（0标准）的吸光度值，再乘以1**%，即百分吸光度值（%）＝B×1**%B0B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值（2）标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标，以莱克多巴胺标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中莱克多巴胺的实际浓度。若利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样本的准确、快速分析。（欢迎来电索取）十、注意事项1、严格按照说明书操作时间，每加一种试剂前需要将其摇匀，各操作步骤紧凑进行。2、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20-25℃）会导致所有标准的OD值偏低。3、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。4、试剂变质的迹象底物有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到25min（或更长），但不得超过30min。反之，则减短反应时间。7、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。十一、贮存条件及有效期贮存条件：2-8℃、干燥避光防潮。有效期：在正确贮存条件下，有效期为12个月。[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 大鼠前列腺素分析检测试剂盒操作步骤

  大鼠前列腺素分析检测试剂盒操作步骤[详细]

  2016-04-05 00:00

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