安谱实验助您安心吃火锅，食品中成分快速检测解决

本文由 上海实验科技股份有限公司ap 整理汇编

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• 安谱实验助您安心吃火锅，食品中成分快速检测解决

  安谱实验助您安心吃火锅，食品中成分快速检测解决[详细]

  2016-01-25 00:00

  专利

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• 安谱助力食品中16种邻苯二甲酸酯检测食品中16种邻苯二

  安谱助力食品中16种邻苯二甲酸酯检测食品中16种邻苯二[详细]

  2011-06-08 00:00

  期刊论文

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• ELISA实验中常见问题的解决

  ELISA操作常见问题1．样品稀释酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。2．试剂盒平衡试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温（约25℃），一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。3．样品和试剂的混匀稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。4．加样在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。5．温育温育是ELISA测定中影响测定成败Z为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。Z为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。因为，不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。6．洗板固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术，需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来，以保证ELISA测定的特异性。洗板对于ELISA测定来说，也是极其关键的一步。洗液尽量不要溢出孔外；加洗液后要静置1分钟，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及时更换吸水纸，尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去，否则可能影响试验结果。7．边缘效应使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较ZX孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与ZX孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。8．显色显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说，显色时间过短，结果偏低；显色时间过长，空白或者非特异性显色增加。9．比色比色要注意波长的选择。以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用，而前者比色波长为450nm，后者为492nm，滤光片需根据要求随时更换。因此，容易出现滤光片错用的问题。其次，单波长或双波长比色选择的问题。所谓的单波长比色即是通常的以对显色具有Zda吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定；而双波长双色则酶标仪在敏感波长如450nm和非敏感波长如630nm下各测定一次，敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和；非敏感波长下测定即改变波长至一定值，使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零，此时测得的吸光度即为脏物的吸光度值。Z后酶标仪给出的数值为敏感波长下的吸光度值与非常感波长下的吸光度值的差。因此，双波长比色测定具有能排除由微滴板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响的优点。由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性，也就是说每次测定或同次测定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度测定值，故而在ELISA测定比色时，**是使用双波长比色。综上所述，尽管ELISA测定的操作步骤非常简单，但有可能会影响测定结果的因素却较多，分布在测定操作的各步之中，尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因，特对常见问题及原因归纳总结于下表。操作过程中可能出现的问题和解决方法问题可能原因解决方法显色淡，灵敏度偏低1、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温2、试剂盒未充分平衡试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。3、培养箱温度不足37℃注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意4、保温时间不足校正定时钟准确定时5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，**一次性使用7、蒸馏水水质有问题使用新鲜合格的蒸馏水8、底物作用时间不足准确定时背景深，全部呈有色,1、洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留浓缩洗液准确配制；10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释；充分洗涤，彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染2、样品污染样品应新鲜采集，或低温保存，防止污染3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长调整培养箱温度，准确定时4、吸嘴重复使用，未洗净或消毒不彻底吸嘴尽可能一次性使用5、蒸馏水被污染使用新鲜蒸馏水6、酶等试剂混用不同批号试剂勿混用7、一次实验的标本量过多，加样时间太长，导致实际反应时间延长合理安排实验，避免几块酶标板同时加样重复性不佳1、样品数量多少不一，加样时间有长有短重复某一样品时，加样时间尽可能与**次接近2、保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性3、加样量不一致样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴出现白板，阳性对照不显色显色液变质更换新的显色液洗涤液配制有误请按说明书所示稀释倍数配制未加酶结合物而认为已加入注意不要漏加终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用每次加液前均应看清标签[详细]

  2018-09-02 10:00

  产品样册

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• 安谱实验DR.E标准品培训报名表

  安谱实验DR.E标准品培训报名表[详细]

  2016-04-25 00:00

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• 食品中过氧化氢残留快速检测试纸

  食品中过氧化氢残留快速检测试纸[详细]

  2014-07-19 00:00

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• 食品中脱氢乙酸快速检测解决方案

  食品中脱氢乙酸快速检测解决方案[详细]

  2024-09-12 18:28

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• 使用粮食安全综合检测仪测定食品中抗生素成分的实验方案

  　本实验基于抗原-抗体特异性结合原理和间接竞争酶联免疫吸附技术(ELISA)，结合粮食安全综合检测仪的光学检测模块实现抗生素成分的定量测定。首先，将抗生素抗原包被于酶标板微孔内，加入待测试样提取液和特[详细]

  2025-12-31 10:37

  应用文章

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• 安谱推出原料药中的铬检测耗材整体解决方案

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  2024-09-12 18:29

  操作手册

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• 安谱助力食品中16种邻苯二甲酸酯检测—食品中16种邻苯二甲酸酯专用混标

  2011年5月23日，新闻报导台湾公布大量饮料中由于添加了含有邻苯二甲酸酯的起云剂，可能会对人体造成伤害。卫生部于2011年6月1日发布紧急通知，《关于公布食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第六批）的公告（卫生部公告2011年第16号）》，将17种邻苯二甲酸酯列为第刘辟违法食品添加剂。链接如下：http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohwsjdj/s7891/201106/51902.htm目前，我国检测食品中邻苯二甲酸酯的主要方法是《GB/T21911-2008食品中邻苯二甲酸酯的测定的标准品》，其中检测了16种邻苯二甲酸酯，都包括在卫生部的公告中。而公告中另外提及了DINP。关于DNP和DINP：DNP：应为邻苯二甲酸二壬酯。GB/T21911-2008显示峰为单峰，此峰应为邻苯二甲酸二正壬酯（DNNP）。目前各个标准品供应商品牌提供的DNP，有的是异构体混合物，所出峰为多个峰，其中也包括DINP；也有部分提供的是DNNP，为单峰。两者都属于DNP。而在实际工业上使用的DNP塑化剂，应为异构体混合物。所以如果您购买的DNP为异构体混合物，并且没有要求对DINP进行定量，则不需要再另外购买DINP标准品。[详细]

  2018-08-10 10:58

  产品样册

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• 戴安应对食品中香精香料检测的液相色谱技术

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  2024-09-26 05:47

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• Lonestar高效离子迁移谱用于食品中4-甲基咪唑的快速检测

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  2024-09-13 23:08

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• 灵芝活性成分的毛细管电泳快速检测

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  2010-01-28 00:00

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  安谱过滤产品[详细]

  2015-06-24 00:00

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  为了感谢您一直以来对CNW品牌的支持，上海安谱科学仪器有限公司现推出“CNW液相色谱柱使用体验”征文活动，您只要写出CNW液相色谱柱使用体验，即可获得精美奖品一份。[详细]

  2018-08-10 10:58

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• 烘焙食品中安赛蜜和阿斯巴甜的检测解决方案

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  2024-09-20 13:38

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• 小活络丸中痕量毒性成分的快速限量检测

  小活络丸中痕量毒性成分的快速限量检测[详细]

  2024-09-27 23:58

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  BSZYD-FZJ重金属检测仪快速检测食品中的重金属BSZYD-FZJ重金属检测仪（12通道）用于快速检测食品中的金属铅、砷、铜、铬、镉、汞，以下是产品的特点：*仪器全金属机壳，坚固耐用。*5英寸大屏幕全中文液晶显示屏。*光源采用超高亮发光二极管，具有低功耗、可靠性高，响应速度快等优点。*采用闭环回路光源自动校准系统，避免了长时间使用，或者外部条件变化导致的光源过强或过弱等现象，保证光源始终工作在**状态。*光源预热及恒温管理系统，有效避免漂移，保证长时间测量的稳定性。*12组独立检测单元，每单元均由一组光源系统，一个样品仓，一组检测系统构成。*仪器自动校正0%及1**%，不需要人工进行此校正操作。*仪器具备自检功能。能判断故障并给予提示，帮助人员对仪器进行维护。*超大容量内存，可存储上万条数据。*可随时进行数据查询、打印、删除等操作。*仪器配备USB接口，可将数据上传到电脑。*配备大容量可充电电池，无外接电源时，可维持超过8小时工作。*配有汽车电源接口，方便用户用于装备流动检测车。一、BSZYD-FZJ重金属检测仪（12通道）参数：*重金属铅：检出下限：0.5mg；0.2mg/L检测范围：(0～50)mg；(0～20)mg/L*砷：检出下限：0.04mg；0.02mg/L检测范围：(0～4)mg；(0～2)mg/L*铜：检出下限：0.08mg/L；0.4mg；2mg检测范围：(0～5)mg/L；(0～20)mg；(0～100)mg*六价铬：检出下限：0.5mg；0.03mg/L检测范围：(0～50)mg；(0～3)mg/L*镉：检出下限：0.1mg；0.01mg/L检测范围：(0～10)mg；(0～1)mg/L*汞：检出下限：0.02mg；0.02mg/L检测范围：(0～2)mg；(0～2)mg/L二、BSZYD-FZJ重金属检测仪（12通道）配置：*主机1台*天平1台*样品处理器具及试剂1套*电热杯1个*超声波清洗机1个*USB线1根*安装光盘1张*操作说明书1本*BSZYD-FZJ重金属检测仪（12通道）电源1套[详细]

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  2016-01-20 00:00

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