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1,25vd ELISA试剂盒说明书
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本文由 北京科瑞美科技有限公司 整理汇编
2018-10-31 10:00 612阅读次数
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【产品名称】通用名称:1,25双羟基维生素D检测试剂盒英文名称:1,25-DihydroxyVitaminDEIA【包装规格】96人份/盒【预期用途】仅供体外诊断使用。我公司的1,25双羟基维他命D检测试剂盒是一个通过免疫提取样本后进行酶联免疫测定人血清或血浆中的1,25双羟基维生素D(1,25D)的纯化的完整检测系统。结果应结合其他临床和实验室数据用以协助临床医生对成人肾病患者体内的1,25D缺乏的评估。【概要和说明】维生素D是与来源于自然产生的7-脱氢胆固醇(维生素D3前体)密切相关的分子的一个常见集体术语。在阳光照射下,维生素D3前体在皮肤中经历光解转化生成维生素D3(胆钙骨化醇)。这种化合物不具有生物活性,但却进入血液循环中经肝脏羟化为活性25羟基维生素D(25D),少部分在肾脏中进一步羟化为高度活力的钙调节素1,25D。1,25D在循环中主要与维生素D结合蛋白和白蛋白结合。1,25D是钙(和磷)代谢中的主要调节者之一,刺激肠内钙吸收和促进骨重吸收。同时,它通过直接作用于甲状旁腺和间接升高血钙水平来YZ甲状旁腺激素生成。1,25D的生成本身也受到甲状旁腺激素的刺激,因此形成一个有效的控制环。维生素D缺乏症通常与饮食不足相关,Z常见的是素食主义者,而且也与低阳光照射(如:老年人和机构工作人员)和皮肤较黑有关。在早期肾衰竭中1,25D的生成显示异常,尽管这可能不会对肾脏产生影响。在晚期肾衰竭时,1α-羟基可能出现异常,出现低1,25D水平结果。
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1,25vd ELISA试剂盒说明书
- 【产品名称】通用名称:1,25双羟基维生素D检测试剂盒英文名称:1,25-DihydroxyVitaminDEIA【包装规格】96人份/盒【预期用途】仅供体外诊断使用。我公司的1,25双羟基维他命D检测试剂盒是一个通过免疫提取样本后进行酶联免疫测定人血清或血浆中的1,25双羟基维生素D(1,25D)的纯化的完整检测系统。结果应结合其他临床和实验室数据用以协助临床医生对成人肾病患者体内的1,25D缺乏的评估。【概要和说明】维生素D是与来源于自然产生的7-脱氢胆固醇(维生素D3前体)密切相关的分子的一个常见集体术语。在阳光照射下,维生素D3前体在皮肤中经历光解转化生成维生素D3(胆钙骨化醇)。这种化合物不具有生物活性,但却进入血液循环中经肝脏羟化为活性25羟基维生素D(25D),少部分在肾脏中进一步羟化为高度活力的钙调节素1,25D。1,25D在循环中主要与维生素D结合蛋白和白蛋白结合。1,25D是钙(和磷)代谢中的主要调节者之一,刺激肠内钙吸收和促进骨重吸收。同时,它通过直接作用于甲状旁腺和间接升高血钙水平来YZ甲状旁腺激素生成。1,25D的生成本身也受到甲状旁腺激素的刺激,因此形成一个有效的控制环。维生素D缺乏症通常与饮食不足相关,Z常见的是素食主义者,而且也与低阳光照射(如:老年人和机构工作人员)和皮肤较黑有关。在早期肾衰竭中1,25D的生成显示异常,尽管这可能不会对肾脏产生影响。在晚期肾衰竭时,1α-羟基可能出现异常,出现低1,25D水平结果。[详细]
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2018-10-31 10:00
产品样册
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人维生素D(VD)ELISA试剂盒
- 人维生素D(VD)ELISA试剂盒l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人维生素D(VD)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人维生素D(VD)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人维生素D(VD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0ng/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:1.5ng/mL48ng/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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- BIM人维生素D(VD)ELISA试剂盒l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人维生素D(VD)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人维生素D(VD)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人维生素D(VD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0ng/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:1.5ng/mL48ng/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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人1,25-二羟基维生素D3ELISA试剂盒
- 人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)ELISA试剂盒l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0ng/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:1.5ng/mL48ng/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2018-11-15 10:03
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ELISA试剂盒说明书
- 植物防卫素/植物抗毒素(PDF)ELISA试剂盒说明书本试剂盒植物防卫素/植物抗毒素(PDF)ELISA试剂盒仅供体外研究使用预期应用ELISA法定量测定植物组织、细胞或其它相关样本中防卫素/植物抗毒素(PDF)含量。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗PDF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗PDF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的PDF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)1.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成20ng/ml,10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。如配制10ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)20ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。2.样品稀释液:1×20ml/瓶。3.检测稀释液A:1×10ml/瓶。4.检测稀释液B:1×10ml/瓶。5.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。6.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。7.底物溶液:1×10ml/瓶。8.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。9.终止液:1×10ml/瓶(2NH2SO4)。10.覆膜:1×5张操作步骤实验开始前,请提前配制好所有试剂;试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,均应用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。建议各实验室在操作前先进行预实验以建立**稀释倍数。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。注:1.每次实验留一孔作为空白调零孔(不同于空白孔),该孔不加任何试剂,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。2.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温。使用后立即冷藏保存试剂。3.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入检测溶液B或底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,洗板拍干后请立即加入后步试剂,应避免微孔干燥掉。4.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。5.在储存和温育时避免强光直接照射。6.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。7.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。特异性本试剂盒可同时检测重组或天然的植物防卫素/植物抗毒素(PDF),且与其它相关蛋白无交叉反应。计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线(推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curveexpert1.3),根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。2.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。3.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请Z后乘以稀释倍数。5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。6.底物请避光保存。说明1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,**个孔与Z后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。4.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。6.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。7.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。8.有效期:6个月ELISA试剂盒联系人:马先生(先生)部门(职位):销售(经理)手机号码:15021200052电话:86-021-54100800/64855665传真:86-021-54261506所在地:上海公司地址:徐汇区钦江路15号1405邮政编码:200233邮件:solarbio@126.com公司网址:http://www.shsolarbio.com[详细]
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2018-09-02 10:00
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人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3DVDDHVD 3)ELISA试剂
- 人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3DVDDHVD 3)ELISA试剂[详细]
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2024-09-29 04:29
课件
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DKK-1 ELISA试剂盒说明书
- Wnt通路YZ因子DKK-1检测试剂盒背景介绍:DKK-1是影响成骨细胞成熟的WNT信号通道的拮抗剂。Dkk-1首先在人肝母细胞瘤和Wilms’瘤中,然后在肝肿瘤中被发现高表达。Dkk-1的高表达被证明可以成为多种肿瘤预后差的标志,如肝细胞癌、食道癌、骨肉瘤、肺癌、结肠癌、骨关节炎、骨质疏松症、卵巢上皮癌和多发性瘤。DKK-1对肿瘤的骨转移有促进作用,这与DKK-1能导致骨吸收,YZ骨形成的作用相一致。产品优势:用于人血清样本检测样本量小,只需20ul检测范围宽夹心法检测操作时间短参考文献:TheroleofDickkopf-1inbonedevelopment,homeostasis,anddisease.PinzoneJJetal.,Blood,2009;113:517-525.ElevatedSerumDickopf-1LevelsIncreaseRiskofHipandVertebralFractureinOlderCaucasianWomen.ArasuAetal.,EndocrRev,2013;34:SAT-224.ComparativeEffectofZoledronicAcidVersusDenosumabonSerumSclerostinandDickkopf-1LevelsofNaivePostmenopausalWomenWithLowBoneMass:ARandomized,Head-to-HeadClinicalTrial.AnastasilakisADetal.,JClinEndocrinolMetab,2013;98:3206-3212.[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA211 ELISA试剂盒说明书
- CA211ELISA试剂盒介绍:CYFRA21-1肿瘤标志物酶联免疫吸附试剂为量化测定血清和肝素化血浆内的CYFRA21-1的含量提供了工具。该试剂只可作为体外诊断之用。CYFRA21-1是细胞角蛋白19的一个片断。尽管在身体各个细胞内均由表达,但在肺组织中的表达尤其突出,特别是肺癌组织中。CYFRA21-1作为肿瘤标志物在诊断中的重要性主要表现在对非小细胞肺癌(NSCLC)病人的鉴别诊断,预后及术后评价。另外也有报道作为肿瘤标志物的CYFRA21-1亦可用于对膀胱癌的监测。CYFRA21-1肿瘤标志物酶联免疫试剂使用的是KS19.1和BM19.21双鼠单克隆抗体,以确定细胞角蛋白19片断。网址:286595[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA724 ELISA试剂盒说明书
- CA724ELISA试剂盒介绍:CA72-4癌抗原标志物酶联免疫吸附试剂(EIA-5071)为量化测定血清和血浆内的CA72-4(TAG-72)的含量提供了工具。该试剂只可作为体外诊断之用。CA72-4为一48kD的糖蛋白。报道表明,在多种恶性肿瘤疾病中(包括癌,胃癌,胆囊癌,直肠癌,乳腺癌,卵巢癌,宫颈癌等)发现CA72-4的血清和血浆水平均有升高。尽管在一些良性疾患中如风湿病或卵巢囊肿中CA72-4的血清和血浆水平也有升高,但在消化道和卵巢肿瘤病患中具有诊断意义上的肿瘤标志物作用(95%可信度)。CA72-4在血中的水平与肿瘤的分期和大小有很好的相关性。在对消化道癌病患的治LX果监测和随访中,CA72-4是一个可供选择的检测指标(其他可供选择的指标还包括CA19-9或CEA)。另外,CA72-4也经常被独立用于对卵巢癌病患的治LX果监测和随访过程中,特别是对于CA125水平并没有升高的女性病例具有非常意义的肿瘤标志作用。网址:286595[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA242 ELISA试剂盒说明书
- CA242ELISA试剂盒介绍:我公司其它肿瘤标志物相关产品,已有产品包括:中文名称英文名称针对疾病糖类抗原19-9试剂盒CA19-9ELISAKit癌糖类抗原242试剂盒CA242ELISAKit癌、结直肠癌糖类抗原15-3试剂盒CA15-3ELISAKit乳腺癌糖类抗原125试剂盒CA125ELISAKit卵巢癌人附睾分泌蛋白4试剂盒HE4ELISAKit卵巢癌鳞状细胞癌抗原试剂盒SCCELISAKit宫颈鳞癌、肺鳞癌、食管鳞癌神经元烯醇化酶试剂盒NSEELISAKit肺癌胃泌素释放肽前体试剂盒ProGRPELISAKit小细胞肺癌细胞角蛋白19试剂盒Cyfra21-1ELISAKit非小细胞肺癌癌胚抗原试剂盒CEAELISAKit结直肠癌、其他恶性肿瘤甲胎蛋试剂盒AFPELISAKit肝癌前列腺特异性抗体试剂盒PSAELISAKit前列腺癌游离前列腺特异性抗原试剂盒f-PSAELISAKit前列腺癌CA724ELISAKitCA50ELISAKitTPAELISAKitTPSELISAKit如需了解更多资料,请联系北京科瑞美公司。[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA199 ELISA试剂盒说明书
- CA199ELISA试剂盒说明书:人血清消化道癌抗原(CA19-9)酶标定量试剂盒采用酶联免疫测定(ELISA)技术,定量测定患者的血清中CA19-9浓度,本试剂盒主要用于:消化道癌早期诊断、癌细胞与非癌细胞的鉴别,淋巴结细胞转移程度的判断,可与生物素技术FAP、APAAP法选择搭配使用。体液检测,用于胃癌及其他消化道肿癌高危人群的筛选检查、提高消化道肿瘤的早期检出率。胃癌和其他消化道癌的临床ZL的监测和LX评价。一组粘液型糖蛋白SialosyiLewis抗原(SLA),例如CA19-9、CA19-5,已作为消化道癌循环肿瘤相关抗原得到人们的认可。CA19-9代表了Z重要的和基本的碳水化合肿瘤标志物。组织中的CA19-9的免疫组化分布与癌组织中的CA19-9浓度一致。而后者的浓度则高于正常组织或发炎的组织。Z近的报告表明,受试者血清CA19-9水平频繁升高会患有不同的消化道恶性肿瘤,例如癌、结肠直肠癌、胃癌、肝癌。与CEA一同检测时,CA19-9升高提示设定为胆囊炎的患者为胆囊肿瘤。该肿瘤相关抗原也会在某些非恶性肿瘤的条件下升高。研究证明,CA19-9浓度值的检测对上述已诊断为恶性肿瘤患者ZL的监控是很有用处的。已经表明血清CA19-9值随着ZL而持续上升,表明肿瘤有隐性的转移或仍有肿瘤残余。血清CA19-9值持上升可能与进行性恶性肿瘤和或对不良的疗法的应答。下降的CA19-9值表明有利的预后和对ZL的良好的应答。网址:286595[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA153 ELISA试剂盒说明书
- CA153ELISA试剂盒介绍:乳腺癌特异性抗原(CA15-3)酶标定量试剂盒,利用酶联免疫测定(ELISA)方法,定量测定患者血清的CA15-3浓度,用于乳腺癌患者的筛检、诊断、ZL中的监测和预后的评价。乳腺癌是今天许多发达国家的妇女中常见的对生命Z具有威胁性的恶性肿瘤,大约每年有18万新病例被诊断出来。这些新患者约一半为阴性结节,然而其中30%发展成转移性癌。有一些肿瘤标志物可以帮助医生鉴别和诊断乳腺癌患者。这些标志物包括:雌激素和孕酮受体,DNA倍体,S期分项百分比,表皮生长因子受体,HER-2/neu致癌基因,P53抑癌基因,组织蛋白酶D,增生标志物和CA15-3。CA15-3对于患者手术后复发的监控,特别是癌转移Z为有效。96%局部的和系统性复发患者CA15-3升高,可以比放射学方法和临床标准提早预报转移。血清CA15-3升高,有25%与肿瘤进展有关;CA15-3降低,有50%与对ZL的应答相关。在乳腺癌复发的检查方面,CA15-3比CEA更灵敏。在卵巢癌的复发的早期检查方面,CA15-3与CA125联合应用已显示出更加有效。网址:286595[详细]
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2018-10-31 10:00
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CA125 ELISA试剂盒说明书
- 一.卵巢癌抗原(CA-125)ELISA试剂盒介绍:人血清卵巢癌抗原CA125酶标定量试剂盒利用酶联免疫测定(ELISA)方法,定量地测定患者的CA125血清浓度,用于卵巢癌患者的筛查、诊断、ZL中的监测和预后的评价。癌抗原CA125与卵巢上皮癌有关。在血清中,CA125与高分子量的糖蛋白相联系。已发表的研究结果表明,在血清CA125水平升高的个体中可发现具有严重的子宫内膜癌,clear-cell和未分化的卵巢癌。血清CA125浓度>35U/mL,60%的妇女患有卵巢癌,而且80%以上的患者有潜在的卵巢癌。正常、健康的妇女,其血清CA125上升1%,其中3%患有良性卵巢疾病,有6%具有非瘤形成的条件(不包括**个三个月的孕期,行经期、子宫内膜异位症,子宫纤维化病、急性输卵管炎、肝病、腹膜炎、心包炎或胸膜炎)。血清CA125及骨盆检查的连续检测可以增加检查的特异性。CA125浓度的检测在对ZL的监控和区分对ZL的良性反应和不良疗法引起的进行性恶化是有益的。到现在为止,CA125是残余的卵巢上皮癌Z灵敏的方法。患有肺癌、子宫颈癌、输卵管癌、子宫癌和子宫内膜异位症的病人也会有CA125升高的情况。网址:286595[详细]
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2018-10-31 10:00
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伏马毒素ELISA试剂盒说明书
- 本试剂盒仅供研究使用。伏马毒素ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中伏马毒素(FB1)残留的定量检测。伏马毒素ELISA试剂盒实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有伏马毒素(FB1)偶联抗原,加入伏马毒素(FB1)标准品或样品,游离伏马毒素(FB1)与微孔条上预包被的伏马毒素(FB1)偶联抗原互相竞争抗伏马毒素(FB1)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中伏马毒素(FB1)含量成反比,通过标准曲线计算样品中伏马毒素(FB1)的含量。伏马毒素ELISA试剂盒组成预包被的伏马毒素(FB1)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。伏马毒素(FB1)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。抗伏马毒素(FB1)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。显色液A:1瓶(6ml)。显色液B:1瓶(6ml)。终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。说明书一份。伏马毒素ELISA试剂盒贮存:1.试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻2.未用完的微孔板应该密封干燥保存伏马毒素ELISA试剂盒注意事项1.使用试剂盒前请仔细阅读说明书。2.不要使用过期试剂盒。3.试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。4.标准品中含有伏马毒素(FB1),使用时应特别注意,操作时应带手套。5.终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。7.不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。8.稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果9.混合试剂时应避免起泡。伏马毒素ELISA试剂盒工作液准备伏马毒素(FB1)标准品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用样本稀释液:备用显色剂:已备用,避免光线直照反应终止液:已备用伏马毒素ELISA试剂盒样品处理:取10g粉碎的样品,加20ml70%甲醇溶液QL振荡3分钟用WhatmanNo1滤纸过滤取25μl处理后的样品,加入25μl样本稀释液于反应孔中(样本稀释倍数为2)伏马毒素ELISA试剂盒结果计算定量分析:所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以**个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00μg/L标准溶液的平均吸光度值以伏马毒素(FB1)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为伏马毒素(FB1)浓度的对数值,求得反对数即为测定液中伏马毒素(FB1)浓度C(ppb)由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。半定量测定:目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。[详细]
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2018-11-16 10:02
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PSA ELISA试剂盒说明书
- 一.PSAELISA试剂盒介绍:前列腺特异性抗原(PSA)酶标定量试剂盒利用酶联免疫(ELISA)测定手段,定量地测定患者的PSA血清浓度,用于前列腺癌患者的筛查,诊断、ZL中的监测和预后的评价。二、试剂盒的组成1.96孔抗体包被板:1块;2.酶结合物:12mL,1瓶;3.PSA零缓冲液:1瓶,7mL;4.TMB试剂(一步):1lmL;5.参照标准品:0,2,4,15,60,120ng/mL;6.终止液1NHCL:11mL;7.洗涤浓缩液(20X):50mL,1瓶。网址:286595[详细]
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2024-09-30 18:30
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Elisa试剂盒:人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书
- Elisa试剂盒:人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书人血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中D-乳酸盐(D-lactate)的含量。Elisa试剂盒:人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书用纯化的D-乳酸盐(D-lactate)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入D-乳酸盐(D-lactate),再与HRP标记的D-乳酸盐(D-lactate)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。Elisa试剂盒:人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存Elisa试剂盒:人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书人D-乳酸盐(D-lactate)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中D-乳酸盐(D-lactate)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人D-乳酸盐(D-lactate)水平。用纯化的D-乳酸盐(D-lactate)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入D-乳酸盐(D-lactate),再与HRP标记的D-乳酸盐(D-lactate)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的D-乳酸盐(D-lactate)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人D-乳酸盐(D-lactate)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:450ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为300ng/ml,200ng/ml,100ng/ml,50ng/ml,25ng/ml)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:8ng/ml-400ng/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-23 10:31
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