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人多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒说明书
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人多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Dopamine单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Dopamine与单抗结合,加入生物素化的抗人Dopamine,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Dopamine浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Dopamine浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清至少10倍稀释,血浆可以不在稀释。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Dopamine含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Dopamine检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Dopamine。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
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人多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒说明书
- 人多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Dopamine单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Dopamine与单抗结合,加入生物素化的抗人Dopamine,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Dopamine浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Dopamine浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清至少10倍稀释,血浆可以不在稀释。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Dopamine含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Dopamine检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Dopamine。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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人 (Human) 多巴胺 (Dopamine) ELISA 检测试剂盒说明书
- 人(Human)多巴胺(Dopamine)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:800nmol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗Dopamine抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:800nmol/L(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400nmol/L(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200nmol/L(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100nmol/L(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50nmol/L(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25nmol/L(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0nmol/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。[详细]
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2018-09-14 10:01
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小鼠多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Dopamine单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Dopamine与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Dopamine,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,Dopamine浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Dopamine浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Dopamine含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Dopamine检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠Dopamine。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠Dopamine单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Dopamine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Dopamine,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Dopamine浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Dopamine浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清至少10倍稀释,血浆可以不在稀释。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Dopamine含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Dopamine检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Dopamine。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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人多巴胺(DA)ELISA试剂盒
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- 人(human)多巴胺试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清一、试剂组成1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶标偶合液EnzymeConjugate12.0ml3、标准品Standard 5x1.0ml4、呈色剂A、SubstrateA6.0ml5、呈色剂B、SubstrateB6.0ml6、终止液StopSolution6.0ml7、浓缩洗涤液(1:20)RinsingBuffer60.0ml8、5倍样品稀释液dilution15.0m人(human)多巴胺试剂盒说明书二、注意事项1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。2.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。3.保存于2-8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。4.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟三、操作步骤1.每孔分别加入已稀释的样品、标准品各100ul。2.将板置于37℃温育30分钟。3.甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。4.每孔加入酶标偶合液100ul。5.将板置于37℃温育30分钟。6.甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。7.每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒温箱反应15分钟。8.每孔加终止液50ul,于450nm波长读O.D.值。人(human)多巴胺试剂盒说明书四、结果判断仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。检测值范围:0400nmol/L敏感度:1.0nmol/L[详细]
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2018-09-14 10:01
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小鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠多巴胺(DA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠多巴胺(DA)水平。用纯化的小鼠多巴胺(DA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入多巴胺(DA)再与HRP标记的多巴胺(DA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的多巴胺(DA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠多巴胺(DA)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:135ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液20ml×1瓶20ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为90ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:5ng/L-100ng/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒说明书
- 鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒说明书使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中多巴胺(DA)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡多巴胺(DA)水平。用纯化的鸡多巴胺(DA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入多巴胺(DA),再与HRP标记的多巴胺(DA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的多巴胺(DA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡多巴胺(DA)浓度。鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒组成:130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(200pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求:1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。100pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液50pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液25pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液12.5pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液6.25pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒保存条件及有效期:1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2019-01-02 10:00
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大鼠多巴胺ELISA试剂盒中文说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4 大鼠多巴胺ELISA检测试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用标本:组织匀浆试验原理:Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:1600ng/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗Dopamine抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。大鼠多巴胺ELISA试剂盒操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:1600ng/L(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。800ng/L(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液400ng/L(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液200ng/L(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100ng/L(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液50ng/L(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ng/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。大鼠多巴胺ELISA试剂盒操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(ng/L)A16001600样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Dopamine标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Dopamine含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-1600ng/L4、敏感度:1.0ng/L[详细]
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2024-09-11 18:02
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人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA试剂盒
- 人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
操作手册
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人多巴胺受体D3(DRD3)ELISA试剂盒
- 人多巴胺受体D3(DRD3)ELISA试剂盒[详细]
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2015-03-18 00:00
实验操作
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人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒
- 人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒[详细]
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2015-01-13 00:00
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人多巴胺脱羧酶(DDC)试剂盒使用说明书
- 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人多巴胺脱羧酶(DDC)水平。用纯化的人多巴胺脱羧酶(DDC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入多巴胺脱羧酶(DDC),再与HRP标记的多巴胺脱羧酶(DDC)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的多巴胺脱羧酶(DDC)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人多巴胺脱羧酶(DDC)浓度。人多巴胺脱羧酶(DDC)试剂盒使用说明书试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160U/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人多巴胺脱羧酶(DDC)试剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80U/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40U/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20U/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10U/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5U/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。人多巴胺脱羧酶(DDC)试剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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DA,进口小鼠多巴胺elisa试剂盒说明书
- l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠多巴胺(DA)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠多巴胺(DA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠多巴胺(DA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:120、60、30、15、7.5、0pg/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:3.75pg/mL120pg/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于0.1pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2018-11-18 10:00
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人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa技术说明书
- 广锐生物-国内高、优Elisa试剂盒供应商人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa技术说明书本试剂盒用于测定人血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中6-羟多巴胺(6-OHDA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人6-羟多巴胺(6-OHDA)水平。用纯化的人6-羟多巴胺(6-OHDA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入6-羟多巴胺(6-OHDA),再与HRP标记的6-羟多巴胺(6-OHDA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的6-羟多巴胺(6-OHDA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人6-羟多巴胺(6-OHDA)(IL-2)浓度。人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa技术说明书酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:45ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa技术说明书样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞2浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa技术说明书[详细]
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2018-11-05 10:00
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人多巴胺-β羟化酶elisa代测,DBH试剂盒
- 在人多巴胺-β羟化酶elisa代测,DBH试剂盒实验前的我们应该要特别注意的有以下几点:一、请老师看清楚说明书内容。二、厂家发货的盒子都是Z近生产的,但在实验前还是要确定一下生产日期。三、另外要根据试剂盒组成查看人多巴胺-β羟化酶elisa代测,DBH试剂盒所包含的试剂是否齐全。四、酶标板可以用多少拆卸多少,剩余部分做点处理低温保存。五、实验所用到的酶标仪、洗板机、离心机、培养箱人抗角蛋白抗体酸性罗氏培养基基础豚鼠降钙素基因相关肽人血纤肽/纤维蛋白肽BHonda氏产毒肉汤培养基兔IFN-γelisa试剂盒大鼠PGE2elisa试剂盒放线菌液体培养基人未甲基化寡聚脱氧核苷酸小鼠多巴胺D1受体猪生长激素释放肽ghrelin[详细]
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2018-10-23 10:30
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多巴胺ELISA Kit使用说明书
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用说明书(德国IBL:RE59161)1、应用范围此试剂盒可用于人血浆和尿液中多巴胺的体外定量检测,可手动操作,也可自动操作。进一步的研究表明:此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究。2、前言说明儿茶酚氨类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织,并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中,儿茶酚氨激素及其代谢产物间甲肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加,因而这些激素可用于疾病的诊断。所以,这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断,当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤,所以用户可使用各种各样的动物材料进行实验。如果用此试剂盒测大鼠、小鼠或其它动物,则儿茶酚氨的化学结构与动物的相同。3、实验原理此固相酶联免疫吸附实验利用的是ELISA的夹心法。微孔中包被了羊抗兔抗体。在温育时间之内,加入的溶液抗在体可直接与抗原分子上的一个表位结合。样品中的抗原与酶标二抗(可与抗原分子上的不同表位结合)在包被孔中温育。加入底物液后,溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接用标准曲线确定。4、贮存与稳定性试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃,避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定,前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。5、样品的采集与储存注意人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品:维生素B,咖啡,香蕉,α甲基多巴,MAO,COMTYZ剂,还有降血压类药物。血浆(EDTA)注意血液采集后两小时内,将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸血和脂血样品。如果样品出现混浊,则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。贮存2-8℃≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。稳定性6h1个月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h内的所有尿液,之后将其加入到10-15ml6N的HCl防腐剂中。贮存≤-20℃避免热源或太阳直射,避免反复冻融,冷冻状态下运输样品。稳定性6个月6、试剂盒成分注意试剂盒所提供的试剂足够做96孔单孔检测或48孔双份检测。注意此包被板也可用于检测肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。数量标志成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,单克隆)。1×6×2.5mlCALA-F标准品A-F肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L)去甲肾上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L)多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL(0;78;228;750;2938;14688nmol/L)即用,内含:肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2质控品1+2即用,含:肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签.1×250μLENZCONJCONC酶联物浓缩型(100×)内含:碱性磷酸酶标记的抗体,Tris缓冲液,HCl,0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板(微孔板)每板24孔,包被了硼酸亲和凝胶。2×60mlEXTRBUF提取缓冲液粉红色,即用,内含:0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT冻干粉内含:儿茶酚-氧位-甲基转移酶(猪肝),NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加剂内含:人血浆,稳定剂,0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫罗兰色,即用,内含:抗多巴胺抗体(兔),缓冲液,稳定剂。2×1.25mlCOENZ酶联复合物即用,内含:S-腺苷-L-蛋白酸,稳定剂。1×3mlENZBUF酶缓冲液即用,内含:Tris缓冲液,HCl,稳定剂。4×13mlRELEASEBUFRelease缓冲液黄色,即用,内含:0.1M的HCl,指示剂。2×3mlACYLREAG酰化试剂即用,内含:二甲基甲酰胺,乙醇。注意:有毒,高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗涤液浓缩型(10×)内含:Tris缓冲液,HCl,吐温,0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片内含:对硝基苯磷酸(PNPP)1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液即用,内含:二乙醇胺,水,0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP终止液即用,内含:1M的NaOH,0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用,内含:0.1M的HCl3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材(但试剂盒不提供)1)移液器(10;10-100;100-1000μL)2)轨道摇床(200-900rpm)3)旋涡混合器4)带储器的8通道移液器5)洗涤瓶,自动或半自动包被板清洗系统6)酶标仪7)双蒸水或去离子水8)吸水纸,取样吸头,计时器9)样品稀释用试管。8、手动操作8.1实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。下列所述体积为做48人份时所需要的量。注意试剂盒中的质控品和所有尿液样品在使用前都必须在试管中用0.1M的HCl按1:5的比例进行稀释(例如:20μL尿液+80μL0.1M的HCl)。标准品无需稀释。8.2样品的稀释如果样品中多巴胺浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释:样品待稀释稀释液备注血浆多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度双蒸水提取步骤前尿液多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度0.1N的HCl提取步骤前8.3样品、标准品和质控品的提取(提取板)1)将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各20μL和500μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外,在所有的微孔中加入500μL双蒸水以消除体积差别。2)在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3)盖板。在轨道摇床(600-900rpm)上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中,液体的表面应该会浸湿粘性金属板,但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。5)每孔加入2ml双蒸水6)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。8)每孔加入150μL提取缓冲液,再向每孔中加入50μL酰化试剂,立即混合均匀。9)在轨道摇床(400-600rpm)上18-25℃的环境下提取20min。(无需盖板)10)快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。11)每孔加入2ml双蒸水。12)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。14)每孔加入300μLRelease缓冲液。15)在轨道摇床(400-500rpm)上18-25℃的环境下振荡30min。(无需盖板)已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话,您可将提取板用粘性金属板盖好,在2-8℃的环境下可存放一夜。8.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性25ml洗涤液225ml双蒸水1:10充分混合2-8℃4W60μL酶联物6ml洗涤缓冲液(已稀释好)1:101临时配置,仅能使用一次,混合时避免气泡产生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液临时配置,仅能使用一次18-25℃5h9、实验步骤(手动操作)9.1COMT酶溶液的准备注意:COMT酶溶液应在使用前直接临时配置在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水,充分混和。再加入1.25ml酶联溶液,然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*,COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合,但要避免气泡产生,配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液,则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。9.2样品、标准品和质控品的酶化注意如果使用自动置换型移液器,请将取样吸头内的残余液体加回到提取板相应的微孔内。将提取板置于一斜坡位置比较适当。科研用组织匀浆和细胞培养上清可按如下建议处理:细胞培养上清必须根据其培养基及其相应浓度进行处理:根据尿液样品的操作说明(至少提取20ul上清液),未稀释样品的灵敏度大概为1.0ng/ml。如果基质内添加了血清(FCS),血浆(至少提取500ul上清)操作的灵敏度可以是5pg/ml。无高氯酸的组织匀浆可用做匀浆样品,具体信息请咨询IBL汉堡公司。9.3检测尿液和血浆中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL刚配置好的COMT酶溶液,轻轻振荡。2在尿液样品、标准品和质控品的微孔中加入90μLRelease缓冲液(血浆样品孔除外)。将已提取好的标准品、质控品和尿液样品分别10μL加入到相应的微孔中。将100ul提取好的血浆样品加入到相应的微孔中。在此加样步骤中,可直接将取样吸头伸入到COMT溶液中。溶液颜色变成粉色,轻轻振荡。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清(紫色)。4盖板,在振荡器(400-600rpm)上室温(18-25℃)温育120min5移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。吸水纸上拍干以除去残余液体。6在每一微孔中加入100ul临时配置好的酶联物。7盖板,在振荡器(400-600rpm)上室温(18-25℃)温育60min8移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。吸水纸上拍干以除去残余液体。9如果可以的话,使用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同,使用自动置换型移液器并避免气泡产生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振荡器(400-600rpm)上室温(18-25℃)温育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP终止液,轻轻振板以使溶液混合均匀。13加终止液后60min内405nm处读取OD值。(参考波长:620-650nm)10、自动操作步骤10.1实验前说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成两次进行。下列所述体积为做48人份时所需要的量。注意试剂盒中的质控品和所有尿液样品在使用前都必须在试管中用0.1M的HCl按1:5的比例进行稀释(例如:20μL尿液+80μL0.1M的HCl)。标准品无需稀释。10.2样品的稀释如果样品中多巴胺浓度高于Z高标准品的应按照下列所述进行稀释:样品待稀释稀释液备注血浆多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度双蒸水提取步骤前尿液多巴胺浓度高于Z高标准品中多巴胺的浓度0.1N的HCl提取步骤前10.3样品、标准品和质控品的提取(提取板)1)将标准品、已稀释好的质控品、已稀释好的尿液样品各30μL和750μL血浆样品加入到提取板相应的微孔中。除血浆样品孔外,在所有的微孔中加入750μL双蒸水以消除体积差别。2)在每一微孔中加入1000μL提取缓冲液3)盖板。在轨道摇床(600-900rpm)上18-25℃的环境下提取30min。在提取过程中,液体的表面应该会浸湿粘性金属板,但液体的量不能超过微孔的2/3。液体是否溅出并不会影响实验结果。4)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。5)每孔加入2ml双蒸水6)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。7)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。8)每孔加入150μL提取缓冲液,再向每孔中加入50μL酰化试剂,立即混合均匀。9)在轨道摇床(400-600rpm)上18-25℃的环境下提取20min。(无需盖板)10)快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。11)每孔加入2ml双蒸水。12)用新的粘性金属板盖板。在轨道摇床上(600-900rpm)18-25℃的环境下振荡5min。液体是否溅出并不会影响实验结果。13)移去粘性金属板,快速弃取孔内反应液,在吸水纸上拍干。14)每孔加入450μLRelease缓冲液。15)在轨道摇床(400-500rpm)上18-25℃的环境下振荡30min。(无需盖板)已准备好的样品应当在当天就进行检测。如果不行的话,您可将提取板用粘性金属板盖好,在2-8℃的环境下可存放一夜。10.4冻干粉或浓缩成分的准备稀释成分稀释液比例备注贮存稳定性25ml洗涤液450ml双蒸水1:10充分混合2-8℃4W150μL酶联物15ml洗涤缓冲液(已稀释好)1:101临时配置,仅能使用一次,混合时避免气泡产生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液临时配置,仅能使用一次18-25℃5h11、实验步骤(自动操作)11.1COMT酶溶液的准备注意:COMT酶溶液应在使用前直接临时配置在COMT冻干粉中加入1.25ml双蒸水,充分混和。再加入1.25ml酶联溶液,然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加剂以充分混合溶解的COMT试剂*,COMT酶溶液Z后的体积为每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋涡混合器混合,但要避免气泡产生,配置好的COMT溶液可在室温下稳定存放1小时。*如果只需要一定量的COMT溶液,则剩余的COMT溶液应立即冻存于-20℃的环境下。COMT溶液可在此环境下稳定存放1-2个月。11.2实验步骤在使用自动方法做实验时,我们建议按1:10的比例预先稀释提取好的标准品、质控品和尿液样品(如果是手动操作则用Release缓冲液进行稀释)。如果稀释了,第二个步骤可简化为:将已提取好的血浆样品、已提取好的标准品(按1:10的比例预先稀释)、质控品和尿液样品各100μL加入到微孔中。在进行预稀释时,应当考虑到自动操作的死容积。1)在包被板的每一微孔中加入75μL刚配置好的COMT酶溶液,轻轻振荡。2)在尿液样品、标准品和质控品的微孔中加入90μLRelease缓冲液(血浆样品孔除外)。将已提取好的标准品、质控品和尿液样品分别10μL加入到相应的微孔中。在此加样步骤中,可直接将取样吸头伸入到COMT溶液中。溶液颜色变成粉色,轻轻振荡。3)每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4)盖板。在振荡器(400-600rpm)上18-25℃的环境下温育120min5)弃取孔内反应液,每孔用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。6)每孔加入100μL酶联物7)盖板。在轨道摇床(400-600rpm)上18-25℃的环境下温育60min8)弃取孔内反应液,用250-300μL已稀释好的洗涤液洗板6次。9)加底物液和终止液时,其时间间隔应相同10)每孔加入200μL底物液11)在轨道摇床(400-600rpm)上18-25℃的环境下温育40min。如果自动操作时的温度超过25℃时,则应相应的将温育时间缩短至30min。12)每孔加入50μLPNPP终止液以终止底物反应,轻轻振荡包被板以充分混合试剂成分。13)加终止液后60min之内405nm处读取OD值。(参考波长:620-650nm)12、期望值实验结果不能当作判断任何ZL结果的**因素,疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下结果为正常人群的正常值(5%-95%),建议每个实验室读确定自己的正常值范围:尿液血浆μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺<600<3917<100<0.65本译文仅供参考,详情请以原文为准。ZGdu家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司办公地址:深圳市蛇口工业区太子路18号海景广场11C研发基地:深圳市蛇口沿山路10号6层电话:0755-26814430,26680196邮政编码:518067免费电话:800-8306296传真:0755-26814431[详细]
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大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒
- 大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒[详细]
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小鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒
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2024-09-30 06:15
其它
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人多巴胺(DA)ELISA试剂盒检测使用的液体标本
- 人多巴胺(DA)ELISA试剂盒检测使用的液体标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1)血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2)血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3)尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4)细胞培养上清:A、检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。B、检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5)组织标本:人多巴胺(DA)ELISA试剂盒检测使用的液体标本切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。[详细]
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