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ELISA试剂盒检测方法
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本文由 研域生物技术(上海)有限公司 整理汇编
2018-11-05 10:00 219阅读次数
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利用抗原-抗体反应原理,就是以一抗作为探针,它与目的蛋白作用并连接,再用带有荧光标记的二抗与一抗作用,Z后显色,发光位置就有目的蛋白。ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体--聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。ELISA试剂盒检测方法:方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.6碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。方法二:用于检测未知抗体的间接法:1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃放置一个晚上。次日洗涤3次。2.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。2.同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,Z后一遍用DDW洗涤。4.其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。ELISA试剂盒注意事项:正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
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ELISA试剂盒检测方法
- 利用抗原-抗体反应原理,就是以一抗作为探针,它与目的蛋白作用并连接,再用带有荧光标记的二抗与一抗作用,Z后显色,发光位置就有目的蛋白。ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体--聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。ELISA试剂盒检测方法:方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.6碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。方法二:用于检测未知抗体的间接法:1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃放置一个晚上。次日洗涤3次。2.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。2.同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,Z后一遍用DDW洗涤。4.其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。ELISA试剂盒注意事项:正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。[详细]
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2018-11-05 10:00
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牛奶快速检测试剂盒说明书,elisa检测方法
- 牛奶快速检测试剂盒说明书,elisa检测方法此说明书为PDF格式,请下载参阅!谢谢在线QQ:747582432,电话:15810802415010-59974429联系人:张龙邮箱:bjdgsw001@163.comDD0260北京,大鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒kitRatCollagenaseTypeIIELISAKitDD0261北京,大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA检测试剂盒kitRatTriggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,TREM-1ELISAKitDD0262北京,大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒kitRatCollagenaseIELISAKitDD0263北京,大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA检测试剂盒kitRatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKitDD0264北京,大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA检测试剂盒kitRatCathepsinK,cath-KELISAKitDD0265北京,大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒kitRatAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AMAC-1ELISAKitDD0266北京,大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA检测试剂盒kitRatbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKitDD0267北京,大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA检测试剂盒kitRatRetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKitDD0268北京,大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA检测试剂盒kitRat6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKitDD0269北京,大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA检测试剂盒kitRatPentosidineELISAKitDD0270北京,大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA检测试剂盒kitRatadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKitDD0271北京,大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA检测试剂盒kitRatneutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKitDD0272北京,大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA检测试剂盒kitRatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKitDD0273北京,大鼠雌激素受体(ER)ELISA检测试剂盒kitRatEstrogenReceptor,ERELISAKitDD0274北京,大鼠β-防御素(β-Defensins)ELISA检测试剂盒kitRatβ-DefensinsELISAKit[详细]
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2018-09-03 10:00
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ELISA试剂盒检测抗原Z常用的方法
- ELISA试剂盒检测抗原Z常用的方法[详细]
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2024-09-28 22:09
其它
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恩诺沙星ELISA检测试剂盒
- 恩诺沙星ELISA检测试剂盒[详细]
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2012-08-27 00:00
安装说明
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ELISA分析检测试剂盒
- 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素(ET)水平。用纯化的大鼠内皮素(ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素(ET),再与HRP标记的内皮素(ET)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素(ET)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素(ET)浓度。ELISA分析检测试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。ELISA分析检测试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。ELISA分析检测试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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ELISA试剂盒检测范围
- 生物素与抗生物素之间具有极强的亲和力,可以缩短反应时间,达到快速检测的目的.另外,抗体和酶的生物素标记率高,又不影响其活性,每个亲和素分子能结合4个生物素,每个生物素能标记大量酶分子,使得ELISA试剂盒的敏感性大大提高,生物素与亲和素的结合也极为稳定,不会在洗涤过程中脱落.BA-ELISA是在常规ELISA的基础上,结全生物素(Biotin)与亲和素(Avidin)的高度放大作用,形成的一种检测方法.BA-ELISA分为:1,LAB法即酶联亲和素-生物素标记法(Labeledavidin-biotin,简称LAB).用辣根过氧化物酶直接标记亲和素,用生物素标记第二抗体.2,ABC法即酶联亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(Avidin-Biotin-PeroxidaseComplex,简称ABC).如用链霉亲和素(Streptavidin),则形成链霉亲和素-酶联生物素复合物(Streptavidin-Biotin-PeroxidaesComplex,简称SABC).在ABC法中,用生物素标记第二抗体,又用生物素标记过氧化物酶.在使用前30min,亲和素与酶联生物素以1:1的比例混匀.1个亲和素分子结合3个生物素分子,亲和素剩下的1个结合点与标记第二抗体的生物素结合,亲和素起桥联作用.ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidasetech-nique)法敏感几十倍.3,BAB法即酶联亲和素-生物素桥法(Bridgedavidin-biotin,简称BAB).用游离亲和素(或链霉亲和素)作为桥联剂,将生物素标记后开成的复合物与酶标记生物素连结起来,然后进行样品的检测.由于标记抗体分子上连有多个生物素,因此,Z终形成的抗原-生物素标记抗体-亲和素-酶标生物素复合物可积聚大量的酶分子;加入相应底物后,产生强烈的酶促反应,大幅度提高检测的灵敏度碱性磷酸酶广大系统包含多种放大机制:碱性磷酸酶不直接催化底物生成有色产物而是催化生成辅酶I(NAD+),辅酶I激活下一轮氧化还原反应,辅酶I启动的反应为底物的颜色化学转变提供条件.在供氢体的作用下,底物氧化/还原发生颜色变化.每个适当的微粒表面可以同时结合(或吸附)大量的标记酶和抗体分子.在包含微粒放大系统的夹心ELISA试剂盒法中,ELISA试剂盒微粒通过结合于其上的第二抗体结合于**抗体.同时微粒上又结合着标记酶,其数量大大多于第二抗体能结合的标记酶,从而得以放大.催化的显示剂沉积(Catalyzedreporterdeposition,简称CARD).CARD依次使用三套显示剂:**套显示剂是联在抗体上的HRP,它通过抗体与待测抗原的反应结合于固相表面;第二套显示剂是标有生物素的苯酚,它受到**显示剂的氧化催化后沉积于固相表面;第三套显示剂是标在链霉亲和素(Streptavidin)上的AP,可被固相上的生物素捕获,放大效果非常大.[详细]
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2018-09-27 10:00
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人白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒洗板方法
- 人(Human)白三烯B4(LTB4)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被白三烯B4(LTB4)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白三烯B4(LTB4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,Z终结果乘以5才是样本实际浓度。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。[详细]
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2018-11-15 10:00
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NGF,BIM小鼠神经生长因子ELISA试剂盒检测方法说明书
- NGF,BIM小鼠神经生长因子ELISA试剂盒检测方法说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠神经生长因子(NGF)的含量。l有效期:6个月l保存条件:2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠神经生长因子(NGF)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠神经生长因子(NGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样本处理及要求1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。7.建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注:1.标准品浓度依次为:400、200、100、50、25、0pg/mL2.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围:12.5pg/mL400pg/mL。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器,极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本,使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本,重复实验[详细]
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2018-11-15 10:03
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2012-08-24 00:00
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- 猴白细胞介素ELISA检测试剂盒已知IL-1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-1的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗IL-1抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型猴白细胞介素ELISA检测试剂盒自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。猴白细胞介素ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:800pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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人ELISA试剂盒检测说明书
- 人(Human)白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒人ELISA试剂盒检测说明书试验原理IL-6试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-6浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-6和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-6的浓度呈比例关系。人ELISA试剂盒检测内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:800pg/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗IL-6抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)人ELISA试剂盒检测说明书?自备材料:蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。人ELISA试剂盒检测样品收集、处理及保存方法:血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人ELISA试剂盒检测说明书操作注意事项:试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。人ELISA试剂盒检测安全性:避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人ELISA试剂盒检测试剂的准备:标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:800pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。人ELISA试剂盒检测性能:1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人ELISA试剂盒检测操作步骤:使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。人ELISA试剂盒检测结果判断与分析:1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-6标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-6含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-14 10:00
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猪ELISA 检测试剂盒说明书
- 猪ELISA试剂盒检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:IL-8试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-8浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-8和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-8的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗IL-8抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:800pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度(pg/ml)A800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-8标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-8含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-14 10:01
产品样册
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ELISA检测试剂盒通用说明书
- ELISA检测试剂盒试验原理:Dopamine试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Dopamine浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Dopamine和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Dopamine的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。ELISA检测试剂盒安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Dopamine标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Dopamine含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800nmol/L4、敏感度:1.0nmol/L[详细]
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2018-09-19 10:00
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兔 ELISA 检测试剂盒说明
- 用途:兔EstradiolELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的Estradiol。本试剂盒可以检测天然和重组的Estradiol。本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。试验原理:兔Estradiol试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Estradiol浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Estradiol和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Estradiol的浓度呈比例关系。自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:2.洗涤缓冲液(20×)的稀释:蒸馏水20倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。结果分析以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Estradiol标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Estradiol含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。[详细]
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2018-09-19 10:00
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羟基乙酸ELISA试剂盒检测结果
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Q0253羟基乙酸,规格:CP,98%,包装:25克,品牌:国产/进口,保存条件:RT,CAS号:79-14-1<产品学名>羟基乙酸<别名>甘醇酸;羟基醋酸;乙二醇酸<英文名>Glycolicacid<英文别名>Hydroxyaceticacid;Hydroxyethanoicacid<规格>CP,98%<包装>25克<规格>BR,70%<包装>100毫升<CAS号>79-14-1C2H4O3=76.05<级别>CP<含量>≥98.0%<硫酸盐>≤0.02%<澄清度试验>合格<氯化物>≤0.1%<铁>≤0.003%<重金属>≤0.003%<灼烧残渣>≤0.2%<级别>BR<含量>≥70.0%<灼烧残渣>≤0.3%<重金属>≤2ppm<性状>无色或液体<性状>无色结晶,略吸湿,能溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸。对皮肤和粘膜略有刺激性,水溶液的<PH>2.5(0.5%)、2.33(1.0%)、2.16(2.0%)、1.91(5.0%)、1.73(10.0%)。低毒,半数致死量(大鼠,经口)1950mg<用途>生化研究。分析试剂,pH的控制,有机合成,薄荷脑和奎宁酯类的制备,染发剂配制<保存>RTA09983免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforImmunoglobulinE(IgE),适用种属:Susscrofa;Porcine(Pig),规格:48T/96TA09984免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforImmunoglobulinG(IgG),适用种属:Susscrofa;Porcine(Pig),规格:48T/96TA09985可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforLectinGalactosideBinding,Soluble3BindingProtein(LGALS3BP),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09986微小染色体维持缺陷蛋白2(MCM2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforMinichromosomeMaintenanceDeficient2(MCM2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09987S100钙结合蛋白A6(S100A6)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforS100CalciumBindingProteinA6(S100A6),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09988糖蛋白M6A(GPM6A)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforGlycoproteinM6A(GPM6A),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09989细胞分裂周期因子23(CDC23)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforCellDivisionCycleProtein23(CDC23),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09990角质转谷氨酰铵酶(TGM1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforTransglutaminase1,Keratinocyte(TGM1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09991髓细胞核分化抗原(MNDA)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforMyeloidCellNuclearDifferentiationAntigen(MNDA),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09992干扰素调节因子8(IRF8)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforInterferonRegulatoryFactor8(IRF8),适用种属:Homosapiens(Human),ELISA试剂盒规格:48T/96TA09993涎福林蛋白(SPN)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSialophorin(SPN),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09994类粘蛋白2(ORM2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforOrosomucoid2(ORM2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09995磷脂爬行酶1(PLSCR1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforPhospholipidScramblase1(PLSCR1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09996CD7分子(CD7)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforClusterOfDifferentiation7(CD7),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09997脑啡肽酶(NEP)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforNeprilysin(NEP),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09998受体相互作用丝氨酸苏氨酸激酶2(RIPK2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforReceptorInteractingSerineThreonineKinase2(RIPK2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA09999Rho家族GTP酶1(RND1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforRhoFamilyGTPase1(RND1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10000S100钙结合蛋白A8(S100A8)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforS100CalciumBindingProteinA8(S100A8),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10001S100钙结合蛋白A9(S100A9)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforS100CalciumBindingProteinA9(S100A9),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10002血清淀粉样蛋白A2(SAA2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSerumAmyloidA2(SAA2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10003信号传导转录激活因子2(STAT2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSignalTransducerAndActivatorOfTranscription2(STAT2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10004CD5分子(CD5)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforClusterOfDifferentiation5(CD5),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10005激肽释放酶原(PK)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforPrekallikrein(PK),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10006白介素21(IL21)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforInterleukin21(IL21),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10007转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforTransformingGrowthFactorBetaStimulatedProteinClone22(TSC22),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10008归巢关联细胞黏附分子(HCAM)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforHomingAssociatedCellAdhesionMolecule(HCAM),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10009高分子量激肽原(HMWK)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforHighMolecularWeightKininogen(HMWK),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10010粘蛋白2(MUC2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforMucin2(MUC2),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10011粘蛋白7(MUC7)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforMucin7,Secreted(MUC7),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10012棕榈酰化膜蛋白2(MPP2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforMembraneProtein,Palmitoylated2(MPP2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10013乙醇脱氢酶1(ADH1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforAlcoholDehydrogenase1(ADH1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10014硒蛋白P1(SEPP1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSelenoproteinP1,Plasma(SEPP1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10015维生素D结合蛋白(DBP)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforVitaminDBindingProtein(DBP),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10016簇集蛋白(CLU)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforClusterin(CLU),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10017尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforUridinePhosphorylase1(UPP1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10018肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforAlkalinePhosphatase,Liver/Bone/Kidney(ALPL),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10019β-位淀粉样前体蛋白裂解酶2(βACE2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforBeta-SiteAPPCleavingEnzyme2(bACE2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10020β-位淀粉样前体蛋白裂解酶2(βACE2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforBeta-SiteAPPCleavingEnzyme2(bACE2),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10021纤溶酶原(Plg)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforPlasminogen(Plg),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10022白介素6受体(IL6R)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforInterleukin6Receptor(IL6R),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10023甲状旁腺激素(PTH)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforParathyroidHormone(PTH),适用种属:Chicken(Gallus),规格:48T/96TA10024多功能蛋白聚糖(VS)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforVersican(VS),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10025血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforVascularEndothelialGrowthFactorReceptor1(VEGFR1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10026V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforV-JunSarcomaVirus17OncogeneHomolog(JUN),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10027V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforV-JunSarcomaVirus17OncogeneHomolog(JUN),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10028V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforV-FosFBJMurineOsteosarcomaViralOncogeneHomolog(FOS),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10029V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforV-FosFBJMurineOsteosarcomaViralOncogeneHomolog(FOS),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10030再生蛋白Ⅳ(REG4)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforRegeneratingIsletDerivedProtein4(REG4),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10031肌钙蛋白T()酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforTroponinT(),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10032鞘氨醇(Sph)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSphingosine(Sph),适用种属:General,规格:48T/96TA10033角蛋白17(KRT17)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforKeratin17(KRT17),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10034核因子κB(NFκB)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforNuclearFactorKappaB(NFkB),适用种属:Chicken(Gallus),规格:48T/96TA10035核因子κB2(NFκB2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforNuclearFactorKappaB2(NFkB2),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10036V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforV-RelReticuloendotheliosisViralOncogeneHomologB(RELB),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10037轴突生长诱向因子1(Ntn1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforNetrin1(Ntn1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10038轴突生长诱向因子4(Ntn4)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforNetrin4(Ntn4),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10039载脂蛋白A4(APOA4)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforApolipoproteinA4(APOA4),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10040E选择素(SELE)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforSelectin,Endothelium(SELE),适用种属:Susscrofa;Porcine(Pig),规格:48T/96TA10041解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforADisintegrinAndMetalloprotease9(ADAM9),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10042解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforADisintegrinAndMetalloprotease9(ADAM9),适用种属:Rattusnorvegicus(Rat),规格:48T/96TA10043解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforADisintegrinAndMetalloprotease9(ADAM9),适用种属:Musmusculus(Mouse),规格:48T/96TA10044组织转谷氨酰铵酶(TGM2)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforTransglutaminase2,Tissue(TGM2),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10045音猬因子(SHH)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforHedgehogHomolog,Sonic(SHH),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10046白介素12(IL12)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforInterleukin12(IL12),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10047补体因子D(CFD)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforComplementFactorD(CFD),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10048毒蕈碱型胆碱受体M1(CHRM1)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforCholinergicReceptor,Muscarinic1(CHRM1),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96TA10049白介素10(IL10)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforInterleukin10(IL10),适用种属:Bostaurus;Bovine(Cattle),规格:48T/96TA10050肿瘤坏死因子α(TNFα)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforTumorNecrosisFactorAlpha(TNFa),适用种属:Bostaurus;Bovine(Cattle),规格:48T/96TA10051凝血因子Ⅺ(F11)酶联免疫试剂盒,英文名:ELISAKitforCoagulationFactorXI(F11),适用种属:Homosapiens(Human),规格:48T/96T[详细]
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2018-09-19 10:00
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大鼠Neuritin ELISA检测试剂盒
- www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断大鼠NeuritinELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠Neuritin捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠Neuritin呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品(240pg/mL)0.6mL0.6mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:240、120、60、30、15、7.5pg/mL.试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。[详细]
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2018-09-22 10:00
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