人ELISA试剂盒的反复冻融

人ELISA试剂盒的反复冻融

本文由研域（上海）化学试剂有限公司整理汇编

2018-09-14 10:00 319阅读次数

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那么在处理和保存方面要考虑哪些方面呢？1、标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。2、血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，人ELISA试剂盒如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。3、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；人ELISA试剂盒二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。4、在冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。5、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的人ELISA试剂盒测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。

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人ELISA试剂盒的反复冻融

那么在处理和保存方面要考虑哪些方面呢？1、标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。2、血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，人ELISA试剂盒如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。3、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；人ELISA试剂盒二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。4、在冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。5、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的人ELISA试剂盒测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。[详细]
2018-09-14 10:00
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激活素A和卵泡抑素对冻融人胎儿卵巢雌二醇分泌的影响

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人一氧化氮（NO）ELISA试剂盒

电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人一氧化氮（NO）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人NO单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的NO与单抗结合，加入生物素化的抗人NO，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，NO浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中NO浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：1000μM/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成1000μM的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入1000μM的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56、0μM为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应NO含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的NO检测浓度小于1μM。2.特异性：可同时检测重组或天然的人NO。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]
2018-09-13 10:01
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人c-fos ELISA试剂盒

人c-fosELISA试剂盒操作步骤仅供研究使用检测范围：96T3μg/L-120μg/L使用目的：人c-fosELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮素（ET）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素（ET）水平。用纯化的大鼠内皮素（ET）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素（ET），再与HRP标记的内皮素（ET）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素（ET）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素（ET）浓度。人c-fosELISA试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人c-fosELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-09-19 10:00
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人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒

人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒[详细]
2024-09-25 17:06
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人preptin ELISA试剂盒

人preptin ELISA试剂盒[详细]
2024-09-29 06:08
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人ELISA试剂盒,TPA ELISA Kit

96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人组织多肽抗原（TPA）ELISA试剂盒相关产品：96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人组织多肽抗原（TPA）ELISA试剂盒IL-10,小鼠白介素-10Elisa试剂盒磺胺二甲基恶唑,标准品JLJL200712人Elisa试剂盒,人ProteinCElisa试剂盒，HumanProteinCELISA试剂盒CAS号:108-69-0,3,5-二,98%人Elisa试剂盒,人CD30Elisa试剂盒，HumanClusterofdifferentiation30,CD30ELISA试剂盒CAS:893-36-7,盐酸-L-白氨酰-2-萘胺/L-亮氨酰-2-萘胺盐酸盐/L-白氨酰-β-萘胺盐酸盐/盐酸-L-亮氨酰-2-萘胺/L（+）-亮氨酰-2-萘基盐酸氨/L-Leucyl-2-naphthylamidehydrochloride,BR,98%,1克,避光,-20℃96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人组织多肽抗原（TPA）ELISA试剂盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA试剂盒人（BV）kit说明书,细菌性阴道病Elisa试剂盒CXCR3ELISAKit,大鼠CXC趋化因子受体3Elisa检测试剂盒蒙花苷,标准品,含量测定,20mg,常温,避光PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISA试剂盒猪（apo-A1）kit说明书,载脂蛋白A1Elisa试剂盒大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒HumanhepatitisBvirusXinteractingprotein,HBXIPELISAKit人异常凝血酶原（APT）ELISA试剂盒HumanAbnormalprothrombin,APTELISA试剂盒草乌甲素,标准品,含量测定,50mg,常温,避光96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人组织多肽抗原（TPA）ELISA试剂盒GRP1957,营养肉汤,供一般细菌培养、转种和增菌用,250g小鼠生长激素释放多肽（GHRP）ELISA试剂盒HumanMotilin,MTLELISAKitCAS号:4767-3-7,2,2-双（羟甲基）丙酸,98%[详细]
2018-10-23 10:31
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Elisa试剂盒：人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书

Elisa试剂盒：人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书人血清，血浆，细胞上清及相关液体样本中D-乳酸盐（D-lactate）的含量。Elisa试剂盒：人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书用纯化的D-乳酸盐（D-lactate）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入D-乳酸盐（D-lactate），再与HRP标记的D-乳酸盐（D-lactate）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。Elisa试剂盒：人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存Elisa试剂盒：人D-乳酸盐Elisa试剂盒说明书人D-乳酸盐（D-lactate）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆，细胞上清及相关液体样本中D-乳酸盐（D-lactate）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人D-乳酸盐（D-lactate）水平。用纯化的D-乳酸盐（D-lactate）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入D-乳酸盐（D-lactate），再与HRP标记的D-乳酸盐（D-lactate）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的D-乳酸盐（D-lactate）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人D-乳酸盐（D-lactate）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为300ng/ml，200ng/ml，100ng/ml，50ng/ml，25ng/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：8ng/ml-400ng/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-10-23 10:31
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人ELISA试剂盒的操作保存方法

人ELISA试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。人ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：80ug/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40ug/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20ug/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10ug/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0ug/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5ug/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0ug/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。[详细]
2024-09-29 02:38
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GB238-2002金属材料反复弯曲试验方法

GB238-2002金属材料反复弯曲试验方法[详细]
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实验操作
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人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒

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2013-12-06 00:00
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人白介素1 (IL-1)ELISA试剂盒

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人白介素1(IL-1)ELISA试剂盒

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2013-12-06 00:00
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人干扰素(IFN-)ELISA试剂盒

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其它
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人白色念珠菌(C.albicans)ELISA试剂盒

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA试剂盒[详细]
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人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒

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2013-12-06 00:00
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人透明质酸(HA)ELISA试剂盒

人透明质酸(HA)ELISA试剂盒[详细]
2013-12-06 00:00
期刊论文
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