聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策

电泳(electrophoresis, EP)是指在电场作用下，带电颗粒往和其电性相反的电极移动。由于在电场中带电粒子移动速度各不相同，利用这一不同从而达到分离的技术被叫做电泳技术。下面让小编带你了解一下聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策。

1807年，俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）Z早发现了电泳现象。

1936年，移动界面电泳仪由瑞典学者A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造出来，马血清白蛋白的3种球蛋白被分离出来，电泳技术被创建了。

聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策

1．蛋白带模糊不清和分辨不佳

诸多因素造成蛋白带模糊不清和分辨不佳。尽然分辨率能够通过梯度凝胶提高，然而常规聚丙烯酰胺凝胶电泳相比于其他方法是分辨率较低的方法。为了使分辨率得到提高，加入的样品不能够过多。窄带可以由体积小的样品提供。为了避免扩散，在加样后应立即电泳。为了充分的分离组分，需要选择合适的凝胶浓度。一般靠近前沿的蛋白带分辨率不佳，因此，应该按照分子量与凝胶孔径的关系，灌制的凝胶应当足够长，防止样品走出前沿。引起扩散而使分辨率降低的原因也包括样品的蛋白水解作用。一般水解作用会发生在在样品准备的时候，样品蛋白会被系统中的内源性蛋白酶水解，若想要减少这种情况的发生，可以缓冲液中加蛋白酶YZ剂。

2．蛋白带过宽与邻近蛋白泳道的蛋白带相连

加样量太多或加样孔泄漏会引起蛋白带过宽与邻近蛋白泳道的蛋白带相连。

3．蛋白带偏斜

由于加样位置偏斜或者滤纸条或电极放置不平行常常会造成蛋白带偏斜。

4．“纹理”现象

样品中不溶颗粒常常会导致“纹理”现象。离心除去不溶性颗粒和增加溶解度是克服的办法。

5．“拖尾”现象

电泳中Z常见的现象为“拖尾”现象。样品溶解不佳常常会引起这种现象。一种办法是降低凝胶浓度；在加样前离心，选用合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液，加增溶辅助试剂为另外一种克服的办法。

6．指示剂前沿呈现两边向上或向下的现象。

垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起了向下的“皱眉”现象，尤其是当靠近隔片的凝胶聚合不完全或凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡时就会有这种现象产生。向上的“微笑”现象表面凝胶冷却不均匀，中间部分没有得到很好的冷却。在垂直电泳中以及用较厚的凝胶时常发生这种情况。