GX液相色谱仪色谱柱的保存和再生

　　GX液相色谱仪色谱柱在色谱分析系统中主要起着分离检测物质的作用，如同色谱系统的心脏，同时也是易损耗品。所以，GX液相色谱仪色谱柱的保存和再生显得尤为重要。

GX液相色谱仪色谱柱保存

　　为了延长GX液相色谱仪色谱柱的使用寿命，应在分析柱前连接一个小体积的保护柱。保护柱是内径为1.0mm、2.1mm、3.2mm、4.6mm或10mm、20mm、40mm，长7.5mm、10mm或20～60mm的短填充柱，通常填充和分析柱相同的填料(固定相)，可看作是分析柱的缩短形式，安装在分析柱前。其作用是收集、阻断来自进样器的机械和化学杂质，以保护和延长分析柱的使用寿命。

　　一只1cm长的保护柱就能提供充分的保护作用。若选用较长的保护柱，可降低污染物进入分析柱的机会，但会引起谱带扩张。因此选择保护柱的原则是在满足分离要求的前提下，尽可能选择对分离样品保留低的短保护柱。

　　保护柱也可装填和分析柱不同的填料，如较粗颗粒的硅胶(10～15um)或聚合物填料，但柱体积不宜过大，以降低柱外效应的影响。保护柱装填的填料较少，价格较低，其为消耗品，通常可分析50～100次样品，柱压力降呈现增大的趋向就是需要更换保护柱的信号。现在市场供应的结构新颖可更换柱芯式设计的保护柱，由保护柱套和可更换式保护柱芯两部分组成。

　　对硅胶基体的键合固定相，流动相的pH值应保持在2.5～7.0之间。具有极端值的流动相会溶解硅胶，而使键合相流失。

　　使用水溶性流动相时，为防止微生物繁殖引起柱阻塞，应加入0.01%的叠氮化Na，以YZ微生物的繁殖。对不洁净的样品，要使用0.45um滤膜过滤或经固相萃取器净化后再进样。

　　GX液相色谱仪进行正式分析前，应先用10倍柱体积的流动相冲洗色谱柱，以保持GX液相色谱仪色谱柱处于平衡状态。当使用乙醇、异丙醇、乙酸等黏度大的流动相时，色谱柱的平衡时间要延长，甚至要加倍。

　　对反相C18 键合相柱，除去柱中含有的缓冲溶液盐类或水溶性物质时，不应使用纯水冲洗。因为C18键合相像一条长链将硅胶黏结，当有有机溶剂存在时，其表面被流动相润湿，C18长链完全展开，像海水中的海藻一样。当纯水或缓冲溶液通过时，C18键合相与其不浸润，键合相表面会塌陷，从而将溶剂、样品分子或无机盐分子包合。此时仅用纯水无法将包合物洗脱出，应使用含5%有机溶剂的水溶液冲洗，才可清除无机盐或水溶性物质。

　　硅胶、氧化铝或正相键合相柱，应保存在流动相中。氰基柱不能保存在纯有机溶剂(如甲醇或乙腈)中，应保留在欲使用的流动相中;氨基柱应该保存在乙腈中，而非流动相，并且应注意不可使用丙酮作流动相。C18反相柱应保存在纯甲醇溶剂中，对填充高交联度苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球的非极性固定相也可用此法保存。

GX液相色谱仪色谱柱再生

　　对使用时间较长、柱效逐渐下降的GX液相色谱仪色谱柱，可用下述方法进行快速再生，以除去微量不洁杂质在柱头的聚积。

　　正相柱：用下述极性强且能互溶的有机溶剂来洗涤色谱柱，每种溶剂每次用30mL清洗，按庚烷、lv仿、乙酸乙酯、丙酮(氨基柱不用)、甲醇、5%甲醇水溶液次序冲洗(洗脱剂的极性依次递增)，Z后再用纯甲醇通过柱将水分带出，拆下柱置于气相色谱仪柱箱中升温至75℃，以除去水分。另应注意不能使用乙醇，它会使柱丧失柱效。

　　反相柱：用极性溶剂每种30mL，按以下顺序清洗：5%甲醇水溶液、0.5mol/L H3PO4(或0.1mol/L EDTA钠盐)、5%甲醇水溶液、甲醇、甲醇-lv仿(1：1)混合液、甲醇、5%甲醇水溶液。Z后保存在甲醇溶剂中。

　　当GX液相色谱仪色谱柱的性能变得很差时，可采用下述两种方法，作Z后的补救。

　　一种方法是修补柱头并同时更换不锈钢烧结片。当取下烧结片发现柱头塌陷或填料被杂质污染时，可挖掉0.5mm左右的固定相，再重新填充同样的干燥固定相，用少量流动相润湿，再填充干燥的固定相与柱口平齐，如此重复3～5次。再换上新的不锈钢烧结过滤片，拧紧结头，与高压泵连接，用流动相冲洗20min，若柱压力降恢复正常，可连接GX液相色谱仪检测器，测柱效。若柱效恢复就可继续使用。若柱压力降恢复正常，但柱效仍偏低，表明柱头未填充紧密，仍有空隙，此时应重复上述操作，直至柱压力降恢复正常、柱效也恢复正常才可继续使用。

　　另一种方法是倒冲色谱柱。此法适用于已修补过柱头，柱寿命已达中后期的色谱柱。柱逆向使用后柱效会损失较大(约30%)，倒冲柱可检查柱头不锈钢烧结片是否堵塞。若已堵塞在倒冲柱时，可观察到柱压力降减小，待柱压力降恢复正常，再将GX液相色谱仪色谱柱按原方向安装使用。