GX液相色谱仪色谱柱的使用及维护

　　色谱柱是GX液相色谱仪的心脏，在GX液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性，延长柱子的使用寿命非常重要。因此对GX液相色谱仪色谱柱的维护是关键。

GX液相色谱仪色谱柱的使用

　　GX液相色谱仪色谱柱是消耗品，因此尽可能地仔细使用会延长色谱柱的寿命。

　　1、色谱柱使用前注意事项

　　色谱柱的储存液无特殊说明均为评价报告所示的流动相。在使用前一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。如胺基(NH2)氰基(CN)柱均为正相条件下评价，所以如果使用条件为反相条件时，请用一中介流动相(如异丙醇)。

　　先置换掉柱内的储存液，然后再应用反相条件对于C18固定相采用的是甲醇-水为评价流动相，若要使用含盐浓度较高的流动相，使用前请用超纯水或甲醇含量相对较低的甲醇-水顶替掉原来的评价流动相，否则会对色谱柱造成极大的伤害，将会明显地减少色谱柱使用寿命。

　　2、色谱的使用方向

　　GX液相色谱仪色谱柱标签上的箭头所示方向是评价时流动相流动的方向，使用过程相流动的方向也Z好按此方向。

　　3、流动相

　　流动相中所用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱，或至是分析纯试剂配流动相水Z好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45或0.22m的滤膜过滤一次则更好，这一点对含盐的流动相尤为重要。另外装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。总之，必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。

　　4、样品

　　样品也要尽可能的清洁，同样可选用样品过滤器或样品预处理(SPE柱)对样品进行预处理;若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，如无特殊要求，所有的溶剂和样品应严格脱水。

　　5、PH值

　　以常规硅胶为基质的键合相填料GX液相色谱柱通常的PH值适用范围是2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界(特别是在8.0≤PH≤10.0时)条件下使用GX液相色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于GX液相色谱仪色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

GX液相色谱仪色谱柱的保存

　　1、在别无选择的情况下，流动相的使用条件又非常剧烈时(如PH﹥10.0或PH﹤2.0)，凡是以硅胶为基质的色谱柱，关机前Z好用适当的溶剂如超纯水将流动相顶替出柱，然后方可短时间或过夜保存。

　　2、如色谱柱要长时间保存，色谱柱必须存于合适的溶剂状态下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙睛中，正相柱可以存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞中，并将购买新色谱柱时附送的防尘防干裂塑料堵头堵上。对使用过含盐浓度较高的流动相的色谱柱，在储存之前，必须用超纯水顶替掉原来的流动相后，再储存于合适的溶剂状态下。储存的温度Z好是室温。

GX液相色谱仪色谱柱的再生

　　因为GX液相色谱仪色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，当出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰时，一般来说可能是柱效下降。

　　1、反相柱的再生

　　采用以甲醇:水=95:5(V:V)，纯甲醇，二氯甲烷等溶剂作流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱的量为一倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。

　　2、正相柱的再生

　　顺次以正己烷异丙醇二氯甲烷甲醇作流动相，冲洗色谱柱。每步注意平衡溶剂的顺序，不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积。因异丙醇的粘度较大，冲洗过程中请随时注意调整冲洗的流速，用甲醇冲洗完后，再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。

　　3、离子交换柱的再生

　　长时间在高PH值和高离子强度缓冲溶液中使用，将导致色谱柱离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗，可使阳离子柱再生。反之，用稀碱缓冲溶液冲洗，可使阴离子柱再生。

　　GX液相色谱仪色谱柱的再生方法并不是的标准方法，使用者可根据自己的实际经验和目的，选择合适的并能溶解柱内污染物的溶剂作流动相，按正方向或反方向的冲洗。但是需要指出是，无论采用什么方法再生色谱柱，均不可能完全恢复柱效或其他参数至新柱水平。

GX液相色谱仪色谱柱的维护保养

　　1、每天用足够的时间平衡色谱柱。

　　2、尽量使用预柱保护分析柱。

　　3、色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。

　　4、避免使用高粘度的溶剂作流动相。

　　5、避免流动相组成和极性的剧烈变化。

　　6、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。

　　7、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2.5～7，尽量不超过该范围。

　　8、注意每根色谱柱的柱压上限，严禁在上限压力下工作。

　　9、严格控制进样量，并尽量用流动相溶解样品。

　　10、避免样品阀扳动过慢，造成柱压大的波动。

　　11、压力升高可能是需要更换预柱的信号。

　　12、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂清洗色谱柱(约20倍)，并保存在乙腈(氨基柱)、甲醇(C18柱)或流动相(氰基柱)中。

　　13、若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。