液相色谱自动进样器操作指南

液相色谱自动进样器操作指南

液相色谱自动进样器（Autosampler）作为高效液相色谱（HPLC）系统中不可或缺的关键组件，极大地提升了分析效率和重现性。本文旨在为实验室、科研、检测及工业领域的从业者提供一份详尽的操作指南，以期帮助大家更高效、准确地使用自动进样器。

自动进样器的基本原理与构成

自动进样器通过机械臂或转盘式的样品盘，配合精确的注射泵和阀门系统，实现样品的全自动化进样。其核心在于精确控制进样体积、减少交叉污染以及优化进样流程。

典型的自动进样器主要由以下几个部分组成：

• 样品盘 (Sample Tray): 容纳待分析的样品瓶，通常有多种规格以适应不同样品量需求，例如96位或140位样品盘。
• 注射系统 (Injection System): 包括进样针、进样阀（通常为六通阀）和注射泵。注射泵负责将样品精确地从样品瓶抽取并推入流动相。
• 机械臂/转盘 (Robotic Arm/Turret): 负责将进样针定位到正确的样品瓶上方，并执行抽取和推注操作。
• 清洗系统 (Washing System): 在连续进样过程中，对进样针进行内外壁清洗，以防止样品残留造成交叉污染。标准清洗溶剂通常为流动相或特定清洗液。
• 控制系统 (Control System): 集成在色谱工作站软件中，负责设定进样序列、进样量、清洗次数、清洗溶剂等参数。

关键操作步骤与参数设置

1. 样品准备与放置:

   
   
   • 样品瓶选择: 选用符合要求的毛细管样品瓶，确保其密封性良好。
   • 样品制备: 确保样品溶解完全，无可见颗粒物。必要时进行过滤，以保护色谱柱和进样阀。
   • 样品体积: 确保样品量大于设定进样量，并预留足够体积用于进样针的吸取。
   • 样品盘摆放: 按照软件设定的序列，将样品瓶正确放置在样品盘的指定位置。注意区分样品、标准品、空白溶剂和清洗液。
   
   

2. 进样参数设定 (软件界面):

   
   
   • 进样模式 (Injection Mode):
     • 全循环进样 (Full Loop): 适用于需要精确控制进样体积的场景。通过填充进样环（Loop）来确定进样量，例如10 µL、20 µL、50 µL等。
     • 抽取式进样 (Partial Loop/Syringe Draw): 适用于样品量有限的情况，直接抽取一定体积的样品进样。
     
     
   • 进样量 (Injection Volume): 根据分析方法和样品浓度设定，一般范围在0.1 µL至1000 µL之间，具体取决于进样阀的填充体积和方法要求。
   • 样品稀释 (Sample Dilution): 部分高端自动进样器支持在进样前对高浓度样品进行自动稀释，以扩展线性范围。
   • 进样针清洗 (Needle Wash):
     • 外部清洗 (External Wash): 进样针外部与清洗溶剂接触。
     • 内部清洗 (Internal Wash): 进样针内部通过吸取和吐出清洗溶剂进行清洗。
     • 清洗次数与溶剂: 通常设置为2-3次，使用流动相作为清洗溶剂是常见选择，有时也需要使用有机溶剂（如甲醇、乙腈）进行强力清洗。
     
     
   • 分液缸/注射器容量 (Syringe Size): 根据设定的进样量选择合适容量的注射器。
   • 抽取速度 (Aspiration Speed): 适当的抽取速度可以减少气泡的产生，例如100-500 µL/min。
   • 排液速度 (Dispense Speed): 适当的排液速度有助于提高进样精度。
   
   

3. 系统调试与运行:

   
   
   • 管路检查: 确保所有连接管路紧密，无泄漏。
   • 气泡检测: 运行空载程序，检查系统是否存在气泡。
   • 进样测试: 在正式运行前，进行一次单一样品或标准品的进样测试，检查进样量和峰形是否正常。
   • 序列运行: 启动自动进样器，使其按照预设序列自动执行所有样品的分析。
   
   

常见问题与维护

• 交叉污染: 确保进样针清洗充分，清洗溶剂选择得当。
• 进样量不准确: 检查注射器是否损坏，管路是否泄漏，进样阀是否正常。
• 气泡问题: 检查溶剂脱气情况，检查管路连接。
• 日常维护: 定期清洗进样针、进样阀和管路，检查密封件的磨损情况。

通过遵循上述操作指南，并结合仪器的具体型号和说明书，您将能够更熟练、高效地使用液相色谱自动进样器，为您的科学研究和质量控制提供坚实保障。