紫外分光光度计使用步骤

实验前的关键准备：光源稳定与比色皿选择

在进行任何分光光度分析之前，仪器的预热与耗材的选择是决定数据精度上限的基础。紫外分光光度计通常配备氘灯（用于紫外区）和钨灯（用于可见区），光源从开启到发射光谱能量达到动态平衡通常需要20至30分钟。若跳过预热直接测量，基线漂移将导致明显的吸光度偏差。

比色皿的材质匹配是新手容易忽视的环节。在200nm-350nm的紫外波段，必须选用石英比色皿，因为普通玻璃或塑料对比色皿在紫外区有极强的吸收，会严重干扰实验结果。操作时应手持比色皿的毛面，光路通过的透光面需用镜头纸单向擦拭，确保无指纹或溶剂残留。

标准操作流程：从基线校正到浓度定量

规范的操作流程是获取可靠数据的保障。在软件系统完成自检后，应遵循以下核心步骤：

1. 参数设定：根据待测物的光谱特性选择测量模式（吸光度、透光率或浓度测定）。设置采样间隔与扫描速度，对于窄吸收峰样品，应选择较小的狭缝宽度（如1nm或2nm）以提高分辨率。
2. 基线校正（Blanking）：在两个比色皿中均加入空白溶剂，置于光路中执行全波段基线扫描或单波长调零。这一步是为了扣除溶剂和比色皿本身对光能的消减。
3. 样品测量：弃去比色皿中的空白液，用待测液润洗比色皿2-3次。这一步骤能有效避免浓度稀释带来的系统误差。注入约4/5高度的液体，放入样品室测量。
4. 数据复核：读取吸光度数值时，理想的测量区间应处于0.2-0.8 Abs之间。若读数超过1.5 Abs，则表明样品浓度过高，已超出探测器的线性响应范围，需进行稀释后重新测量。

核心技术参数与性能指标参考

从业者在评估仪器状态时，通常会关注以下几项核心技术指标，这些指标直接关系到复杂样品分析时的抗干扰能力：

行业应用中的常见干扰因素与规避方案

在实际操作中，样品的物理状态往往会影响光路的传播。例如，待测溶液若存在微小气泡，会产生类似散射的效果，导致吸光度读数虚高。此时可在测量前进行短时间的超声脱气。

环境温度的波动会引起光源能量和电子元器件的漂移。实验室环境应维持在20℃-25℃，并避免阳光直射仪器。对于挥发性强的溶剂，测量时务必盖对比色皿盖，防止浓度随溶剂挥发而产生动态变化。

维护与效能评估

日常维护的核心在于光路系统的保护。实验结束后，需及时清洗比色皿并倒置晾干，避免样品残留对池架造成腐蚀。长期不使用时，应在样品室内放置干燥剂以防反射镜受潮发霉。

对于用户而言，定期使用标准滤光片或重铬酸钾标准溶液进行波长和吸光度的校准，是确保仪器符合CNAS或GMP规范的必要动作。通过对历史校准数据的记录对比，可以预判光源灯管的寿命，在能量衰减至临界值前完成更换，从而规避因设备停机带来的科研进度损失。