高速逆流色谱原理和用途
高速逆流色谱,英文名为High-speed Countercurrent Chromatography,HSCCC为其简称。其为美国国立卫生院Ito博士在1982年所研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。
高速逆流色谱原理
1.在20世纪50年代,多极萃取技术(非连续性)为逆流色谱技术的起源,然而多极萃取设备过于庞大复杂、易碎,溶剂体系的乳化比较容易,溶剂具有较大的消耗量,较长的分离时间。
2.公转、自转(同步行星式运动)产生的二维力场被利用,保留两相中的其中一相作为固定相
3.利用高速旋转来对两相溶剂的萃取频率进行提高,当旋转速度每分钟1000转时能够达到每秒17次的萃取过程。
高速逆流色谱用途
天然新药的研发和筛选,重要指纹图谱分析,标准品的制备和快速分离以及天然yao用植物活性成分的分离为高速逆流色谱的主要用途。在天然产物分离中对于HSCCC技术的应用十分的广泛。
高速逆流色谱性能
较小的分析型的高速逆流色谱,8毫升为其柱容积,几十微克为其进样量,每分钟4000转为其zui打转速,分析能力能够和HPLC相当。较大的制备型高速逆流色谱,柱容积能够达到530毫升,一次zui多进样能够达到20克粗品。
高速逆流色谱相联检测技术
在 高速逆流色谱中应用比较多的是可见光检测、紫外光检测技术。然而有时因为组分不会吸收可见光或紫外光,或者固定相的流失造成流出液乳化,所以常用光学检测器一般不能够用来检测。然而电喷雾质谱,热喷雾质谱,快速原子轰击质谱,化学电离质谱,电子电离质谱以及质谱和 高速逆流色谱的联用已然出现。
高速逆流色谱分配系数
溶剂系统的选择为对色谱分离过程的两相同时进行选择。关键之处就在于成功分离样品。此种溶剂系统适合与否取决于样品中各组分的分配系数。随意对于溶剂系统的选择的关键环节为对分配系数的测定。分析型HSCCC法,生物活性分配比率法,HPLC法,毛细管电泳法以及薄层色谱法通常为分配系数的测定所采用。
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