“识别地沟油，逗点来帮忙”下篇之 Copure® SILICA

简介

上篇介绍了用C18固相萃取方法测食用油中辣椒素含量。据查，辣椒素是斥水亲脂、无色无嗅的结晶或蜡状化合物，易溶于非极性有机溶剂中，故逗点生物开发出使用正相固相萃取方法检测食用油中辣椒素的含量，鉴别“地沟油”，其中天然辣椒素平均回收率113.9%，RSD 0.7%，合成辣椒素平均回收率105.4%，RSD 1.2%，有效地提高了辣椒素的回收率。

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测食用油中辣椒素残留，鉴别“地沟油”。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

天然辣椒素(CAS: 404-86-4)、合成辣椒素(CAS: 2444-46-4)。

三、应用范围

本方法适用于“地沟油”中辣椒素含量的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma® Copure® Silica固相萃取小柱 500 mg/6 mL(Cat. No. COSIL6500)。

五、实验方法

1、样品提取

准确称取2.0 g试样于50 mL离心管中，加入10 mL正己烷，振荡提取10 min，备用。

2、SPE柱净化

(1)活化：Silica柱使用前用5 mL甲醇洗去杂质，再5mL丙酮活化，5mL正己烷平衡。

(2)上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5mL正己烷到提取管中，混匀，全部转移到柱中，弃去流出液；加5 mL 20 %乙酸乙酯-正己烷溶液（1:4,v/v）淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用4 mL甲醇洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1 mL/min内）。

(3)上机测试：洗脱液用甲醇定容至4 mL，经0.22 μm滤膜过滤，供上机测试。

3、HPLC条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)

检测器：Waters 2475 荧光检测器

检测波长：激发波长：229 nm  发射波长：320 nm

流动相：A：水  B：甲醇

洗脱方式：等度洗脱，A：B=20：80

流速：1.0 mL/min

进样体积：20 μL 

七、实验结果

1、2.4 mg/kg油样基质中辣椒素的添加回收结果

表1  2.4 mg/kg油样基质中辣椒素的添加回收结果

2、添加水平为2.4 mg/kg辣椒素检测的液相色谱图

图1  添加水平为2.4 mg/kg天然辣椒素检测的液相色谱图

图2  添加水平为2.4 mg/kg合成辣椒素检测的液相色谱图

本方法回收率和RSD满足标准要求。