树突状细胞——免疫世界的“哨兵
BMDC(Bone Marrow-Derived Dendritic Cells),中文名称是骨髓来源的树突状细胞。在免疫系统中,树突状细胞作为功能最强大的专职抗原呈递细胞,是连接先天免疫与适应性免疫的“桥梁”。而小鼠骨髓来源树突状细胞,因其可大量获取、易于体外操作,成为了探索免疫应答机制、开发新型疫苗与免疫疗法的黄金标准模型。
图1.DC-T 细胞相互作用[1]
细胞因子套装如何解决您的核心痛点?
从原始的小鼠骨髓单核细胞,到培养出成熟、稳定、高纯度的BMDC,这条“分化之路”充满挑战。其中,细胞因子的质量、活性与配比,是决定实验成败的关键所在。
传统的BMDC诱导方法,常常需要研究者单独购买多种细胞因子,自行摸索配比比例与操作流程,不仅流程繁琐,更面临着批次间差异大、细胞得率与纯度不稳定等诸多挑战。我们的新品细胞因子套装,正是在深入理解科研需求的基础上,通过“三重精准” 设计,筛选高品质的细胞因子、优化细胞因子浓度、优化实验操作步骤,可有效稳定地获取诱导培养的DC细胞。
精准配伍:黄金比例,协同增效
套装核心包含三种关键细胞因子:重组小鼠GM-CSF 、重组小鼠IL-4和重组小鼠TNF-α。
GM-CSF:强力促进骨髓祖细胞向树突状细胞系增殖与分化,是BMDC生成的“发动机”。
IL-4:有效抑制巨噬细胞过度生长,同时促进单核细胞向未成熟树突状细胞定向分化,是保证细胞纯度的“方向盘”。
TNF-α:一种早期炎症细胞因子,诱导BMDC的完全成熟,并增强其抗原递呈能力。它还能够激活NF-κB信号通路,促进DC产生其他炎症介质和细胞因子。
我们通过大量实验数据优化,确定了三者之间的最佳浓度配比,确保在诱导过程中既能实现细胞的高效扩增,又能最大限度地保证DC的表型与功能,有效提升CD11c+阳性细胞的得率与纯度。
高品质HiActi细胞因子:高纯度、高活性、低内毒素
超高纯度:蛋白纯度>98%,最大限度减少杂蛋白对细胞生长的干扰。
高活性:经严格的细胞增殖/抑制试验验证,确保每一批次都具有极高的生物学活性,结果稳定可靠。
极低内毒素:内毒素含量严格控制在<1.0 EU/μg,有效避免因内毒素引起的非特异性细胞激活,确保您获得的是功能状态明确的“静息”或“特定激活状态”的BMDC。
精准便捷:省心省力
只需按照我们的标准化操作指南(SOP),即可轻松开启实验,极大节省了准备时间,并显著降低了操作误差。
实战方案——小鼠BMDC诱导分化方案
图2.经典的BMDC 制备方法简图
小鼠骨髓细胞的获得
氯化铵红细胞裂解液的配制:
1)先配制10x的贮存液,配法如下:称取82.9g NH4Cl,10.0gKHCO3和0.37g Na2EDTA,溶于1L的蒸馏水中,0.22μm滤膜过滤除菌,4℃储存6个月;
2)临用前,将10x贮存液用无菌蒸馏水1 : 9稀释成1x工作液即可。
【注】:因氯化铵红细胞裂解液对骨髓细胞有一定的伤害作用,所以要尽量缩短溶血时间。
BMDC的诱导分化
BMDC的完全成熟
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相关文献:
1.Anna C. Filley1 and Mahua Dey. Dendritic cell based vaccination strategy: an evolving paradigm.J Neurooncol. 2017 Jun; 133(2): 223–235.
翌圣生物
翌圣生物科技(上海)股份有限公司成立于2014年,是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事核苷酸、蛋白、细胞和类器官四大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。公司兼备核心技术自主研发和规模化生产能力,核心产品数量达数千种,覆盖分子克隆、qPCR、NGS、体外转录、抗体、蛋白纯化及分析、细胞培养、转染、报告基因检测和类器官等多种系列,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
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