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细胞生长需要适宜的温度。哺乳动物细胞培养温度一般为36.5±0.5℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。

总的来说，培养细胞对低温的耐受力比对高温强。温度上升不超过39℃，细胞代谢强度与温度成正比。39-40℃培养1h，细胞受到一定损伤但仍可能恢复；41-42℃培养 1h，细胞受到严重损伤，但不致全被杀死，个别仍可能恢复；43℃以上培养1h，细胞将被杀死。相反，温度不低于0度，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞置于25-35℃，细胞仍能生存和生长，但速度减缓；放在4℃数小时后，再回到37℃，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而缓慢，温度降至冰点以下，细胞可因胞质结冰受损而死亡。温度控制对培养细胞的健康和生长非常关键。CO2培养箱能够对温度提供精 准稳定的控制，主要有两种温控类型：水套式和气套式。它们的区别主要在它的加热方式上，其实气套式与水套式这两种加热方式对实验结果影响不大、都能够达到可靠的效果，只是在温度恒定和加热快慢上有所区别，所以用户可根据自身的实验环境和实验室条件来选择。

1、水套式加热

水套式加热方式是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的，其主要优点是：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就可以较长时间保持培养箱内的温度准确性和稳定性。但水套式需要对水箱进行定期加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况，若清理不及时可能会有潜在的污染隐患。

2、气套式加热

气套式加热主要是通过设置在箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，也叫六面直接加热；气套式和水套式相比较，加热速度更快。为了不影响培养，培养箱应在培养区域外安装一个风扇，可以帮助培养室内的空气循环，而不会干扰细胞培养；当箱门开启或关闭时，这种温和的空气循环可以加快内部温度，CO2浓度和湿度的恢复。此加热方式特别适用于短期培养以及需要箱门频繁开关取放样的实验。另外，对于用户来说气套式设计比水套式更简单化。